脂肪干细胞联合褪黑激素对犬坐骨神经损伤的修复作用

为了提高脂肪干细胞(ADSCs)对犬坐骨神经损伤的修复效果,采用MTT法筛选褪黑激素(MT)促进ADSCs增殖的最佳浓度。通过比较ADSCs联合MT复合神经支架材料修复犬坐骨神经损伤的试验效果,观察受损神经的再生情况、腓肠肌形态及其功能恢复情况。采用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪检测方法和透射电镜方法评价ADSCs联合MT的治疗效果。结果,与单独移植ADSCs组相比,50 nmol/L MT联合脂肪干细胞治疗组的犬脊髓神经节中HRP标记的阳性细胞数量、再生神经纤维数目明显增多;有髓纤维面积和密度分别显著提高了15.3%和21.0%;腓肠肌湿重恢复率提高了8.09%。上述结果表明,MT预处理ADSCs显著提高了ADSCs对犬坐骨神经损伤的修复效果,为临床上坐骨神经损伤的修复提供了新的治疗策略。     

犬半月板脱细胞基质支架的制备及其特性的研究

半月板是膝关节中的基础纤维软骨组织。损伤半月板会损害正常膝关节功能和易患骨关节炎。人和其他动物半月板的脱细胞处理均有文献报道,但犬半月板的脱细胞支架制备鲜有文献报道。本研究采用高低渗反复冻融和1%十二烷基硫酸钠溶液(SDS)脱细胞处理,制备犬半月板脱细胞基质支架。通过HE染色、天狼猩红染色、阿尔新蓝染色和DNA含量测定检测细胞脱除成度。组织学观察和扫描电镜结果显示犬半月板的胶原纤维主要呈线性沿圆周方向排列,鲜有径向排列,细胞陷窝沿纤维束排列。力学性能检测显示,脱细胞基质与天然半月板相比压缩模量有所降低,这与阿尔新蓝染色显示的脱细胞后蛋白多糖丧失具有一定的关系。体外细胞毒性测定结果表明半月板脱细胞支架对犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)没有毒性。细胞增殖、扫描电镜观察和活/死细胞染色试验表明犬BMSCs可粘附于支架并且不断增殖。这说明犬半月板脱细胞基质支架可作为构建组织工程半月板的支架。     

纤维蛋白粘合剂应用于犬小肠端端吻合术的临床组织学观察

本试验将24只犬随机分为两组,进行小肠端端吻合术。试验组采用纤维蛋白粘合剂配合缝线简易缝合的方法进行吻合,对照组仅采用缝线的方法进行吻合。通过记录肠管吻合术时间、观察术后吻合肠管大体形态、测定术后第14、28天吻合口爆破压及术后第28天吻合口肠管内径比率,对术后第3、7、14、28天吻合口组织进行病理组织学观察,并测定术后第7、28天吻合口组织内Caspase-3的质量分数,以探讨纤维蛋白粘合剂对犬小肠端端吻合术愈合的影响。结果显示,肠管吻合术时间试验组显著短于对照组(P0.05),试验组术后第3天仅有1只犬在肠管吻合部位发生了极少粘连,所有犬均未发生肠梗阻。对照组所有犬术后吻合部位均有不同程度的粘连,术后第28天有1只犬发生了肠梗阻。术后第28天,试验组吻合口内径比率大于对照组(P0.05)。术后第14天和第28天,试验组吻合口爆破压均高于对照组,差异显著(P0.05)。术后第7、28天Caspase-3的质量分数试验组均高于对照组(P0.05)。术后第3、7、14、28天取吻合口组织进行病理组织学观察,发现愈合过程中试验组炎性反应较对照组轻,试验组成纤维细胞出现较早。上述结果表明,应用纤维蛋白粘合剂可缩短肠管吻合术时间,加快愈合进程。     

周围神经浸出液对犬脂肪干细胞向神经膜细胞分化的影响

本研究旨在研究周围神经浸出液对犬脂肪源性干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)向神经膜细胞(Schwann cell,SCs)分化的影响。采用Ⅰ型胶原酶消化法体外原代培养犬ADSCs,并应用流式细胞术进行表型分析,同时观察所培养细胞的成脂成骨分化能力。分离犬坐骨神经,无菌剪碎、浸出和过滤制备犬周围神经浸出液。将周围神经浸出液作为诱导剂,作用于犬ADSCs,7d后分别通过倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光试验和Western-blot观察SCs标志蛋白GFAP和S-100的表达情况。结果显示,周围神经浸出液作用于犬ADSCs 7d后,大多数细胞形态由原来的三角形或梭形变为两端伸出2个细长突起的长梭形,非常像成熟SCs的形态;免疫荧光和Western-blot试验显示,周围神经浸出液诱导ADSCs后,细胞出现GFAP和S-100阳性表达。以上结果提示,周围神经浸出液能有效诱导犬ADSCs向SCs分化。     

皮肤移植术在兽医临床上的应用

用皮片移植来修复皮肤缺损,达到既能加速创伤愈合,又能较好恢复功能,这已成为兽医外科临床上修复创伤的重要手段。马的皮肤移植、牛的皮肤移植、羊以及犬的实验性皮肤移植常有资料报道。但是,由于动物受到经济价值的影响,以及兽医临床某些条件的限制,对皮肤移植缺乏认识,因而这一技术尚未得到普遍推广。为了普及皮肤移植技术,本文就有关几个主要问题综述如下。 (一)移植皮片的种类 1.根据来源不同:分为人造皮、异体皮和自体皮,兽医临床上一般都是使用自体皮。