紫外分光光度法测定藤黄药材中总藤黄酸含量

目的 建立藤黄药材中总藤黄酸含量的测定方法。方法 采用紫外分光光度法，以新藤黄酸为对照品，在360 nm处对藤黄样品中的总藤黄酸进行含量测定。结果 〖JP2〗新藤黄酸浓度在5.304~26.520 mg/L范围内，与吸收度的线性关系良好（r=0.999 5），平均加样回收率为98.53%（RSD=0.21%，n=9）。〖JP〗结论 该方法简便、准确、重现性好，可用于藤黄药材的质量控制。     

藤黄中藤黄酸B的制备分离方法优选及结构确证

目的 建立一种高效且重现性好的藤黄酸B的制备分离方法，并对分离产物进行结构确证。〖JP〗方法 采用乙醇超声提取方式对藤黄药材进行初步提取，用中压制备色谱和高压制备色谱相结合的方式对藤黄乙醇提取物中藤黄酸B进行分离和纯化，并采用正交设计对提取和分离工艺进行优化。采用红外光谱、质谱、1H-核磁共振谱、13C-核磁共振谱对分离得到的样品进行结构鉴定。结果 优选的分离方法较其他方法简便且高效可控，分离得到的样品通过结构鉴定，确定为藤黄酸B且纯度可达到99％以上。结论 所建立的藤黄酸B的提取分离方法具有高效、简便且重现性好的特点。同时，本研究提供了藤黄酸B相对完整的谱图信息，并确证了所分离藤黄酸B的结构。     

藤黄中新藤黄酸提取分离工艺改进

目的 改进从中药藤黄中提取、分离新藤黄酸的工艺。方法 按正交试验法优选提取工艺，以乙醇为提取溶剂，并采用AB-8大孔树脂富集，硅胶柱湿法上样，流动相（石油醚∶乙醇=20∶1）洗脱，分离得到纯化的金黄色化合物。运用熔点测定、紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振技术，通过与文献数据比较来确证化合物结构。结果 金黄色化合物的熔点、紫外光谱、红外光谱、质谱、1H 核磁共振谱（nuclear magnetic resonance, NMR）、13C-NMR数据与文献中新藤黄酸的相应数据一致。结论 运用改进的工艺从藤黄中提取分离新藤黄酸是可行的，更利于工业化生产。     

新藤黄酸提取工艺的优化研究

目的:探讨回流提取新藤黄酸的最佳工艺。方法:以新藤黄酸含量为考察指标,采用正交试验法优选提取工艺。结果:溶剂的浓度对提取量有显著影响,其次的影响因素为提取时间、提取次数、溶剂的量。结论:提取新藤黄酸的最佳工艺为:12倍量的甲醇,提取3次,每次3 h。     

新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）增殖和凋亡的影响。方法 用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论 新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。     

新藤黄酸温敏原位凝胶剂的设计与研究

目的 制备注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂。方法 运用星点设计-效应面优化法确定注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂的最佳处方,并采用高效液相法对其体外释放进行含量测定。结果 最佳处方为0.2%新藤黄酸+18.26%泊洛沙姆407（F127）+7.4%泊洛沙姆188（F68）+0.5%苯甲醇,胶凝温度为35.4 ℃。新藤黄酸温敏原位凝胶的体外释放方程为 Y=0.983 5X+4.028, R=0.999 3, 符合零级释药。结论 星点设计-效应面优化法能很好地优化该制剂处方,优化后处方的体外释药稳定,达到预期要求。     

新藤黄酸诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用研究

目的 研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法 采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果 MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst 33342染色和Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高。结论 新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用。     

高效液相色谱法测定新藤黄酸纳米粒中新藤黄酸的含量和包封率

目的:建立新藤黄酸纳米粒中新藤黄酸含量和包封率的测定方法.方法:采用C18-ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇:1.0 mol/L磷酸(9:1),流速为1.0 ml/min,检测波长为360 nm,进样容积为20 μl,柱温为25℃.结果:新藤黄酸在10～120 μg范围内线性关系良好,r=0.999 9(n=7);新藤黄酸平均回收率为99.32%,RSD为1.03%(n=3).平均含量为99.52%,包封率为83.81%.结论:高效液相色谱法准确、可靠、重复性好,可用于新藤黄酸纳米粒含量及其包封率的测定.     

高效液相色谱法测定新藤黄酸羟丙基-β-环糊精包合物冻干粉中新藤黄酸含量

目的 建立新藤黄酸羟丙基-β-环糊精包合物冻干粉中新藤黄酸含量的测定方法.方法 色谱柱:Hypersil ODS2 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(90∶10);流速:1.0 ml/min;检测波长:358 nm;柱温:25 ℃.结果 新藤黄酸线性范围为10~80 μg...     

HPLC测定新藤黄酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定新藤黄酸的含量。方法:采用ALLTIMA C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-1.0 m l/L磷酸(9∶1),流速:1.0 m l/m in,检测波长:360 nm,进样容积:20μl。结果:该法的专属性强,用于新藤黄酸含量测定,准确可靠。