利用间接免疫荧光技术检测鸡传染性贫血病毒抗体

利用间接免疫荧光技术检测鸡传染性贫血病毒抗体王秀荣王笑梅李建伟杨琳１）陆月华陈卫国（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１）鸡传染性贫血（ＣＩＡ）早期称为贫血因子病，是由鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）引起的。ＣＩＡ于１９７９年由日本学者Ｙｕａｓａ等首...     

进口雏鸡传染性贫血的诊断

进口雏鸡传染性贫血的诊断马双民寇改霞陆红飞郭虎（西安动植物检疫局７１００６８）１９９５年陕西某鸡场从美国进口种用雏鸡５９００只，隔离检疫期间发现该批雏鸡中有以贫血为主要症状的病鸡，经临床及流行病学、病理剖检和实验室诊断，确诊为鸡传染性贫血（ＣＩＡ）。...     

鸡传染性支气管炎免疫扩散试验研究

鸡传染性支气管炎免疫扩散试验研究范根成，杜元钊，朱万光，刘佩兰（农业部动物检疫所青岛２６６０３２）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）诊断方法很多，免疫琼脂扩散试验（ＡＧＰ）是其中之一。Ｗｏｅｒｎｌｅ等用感染鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）制备出ＡＧＰ抗原，但由于ＣＡＭ...     

鸡贫血病病毒

鸡贫血病病毒辛九庆袁吉１）陈奖励（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１）鸡贫血病病毒（Ｃｈｉｃｋｅｎａｎｅｍｉａｖｉｒｕｓ，ＣＡＶ）是鸡传染性贫血病的病原体。ＣＡＶ感染可引起雏鸡严重贫血和胸腺萎缩，甚至造成死亡；亚临床感染则引起食欲下降，并导致...     

鸡马立克氏病单价活疫苗免疫效力比较试验

用农业部南京药械厂和三家外国动物保健品公司生产的４种火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗、实验室制备的ＣＶＩ９８８细胞结合苗和ＨＶＴ细胞结合苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）单价活疫苗免疫１日龄ＳＰＦ白来航鸡，８日龄时用鸡马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）ＧＡ株攻击，同时以Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗作对照，进行免疫效力比较试验。结果表明，６种ＭＤ单价活疫苗均能使免疫鸡群获得对ｖＭＤＶ攻击的免疫保护力，免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８，ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗；国产ＨＶＴ冻干苗的免疫效力不低于三家外国公司生产的ＨＶＴ冻干苗；Ｚ４＋ＦＣ１２６双价苗的免疫效力显著高于各种ＭＤ单价苗     

鸡病毒性关节炎JN－1株疫苗的免疫研究

将鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）Ｊ－１株经一系列培养和蚀斑克隆，筛选出一株蚀斑大小为２．７～３．１ｍｍ的克隆株（ＪＮ－１株）。该株分别以１０￣（５·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）足掌皮下注射和１０￣（４·７２５）～１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射１日龄肉鸡，以５×１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射肉用种鸡，均不产生任何临床症状和病理变化；在敏感雏鸡体内传代５次和鸡胚细胞内传代１０次，无毒力返强现象。雏鸡的最低免疫剂量为１０￣（３·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０），抗体持续时间达９个月以上。用ＪＮ－１株免疫１日龄肉用雏鸡后７、１４、２１和２８天分别用强毒于足掌皮下攻击，临床保护率分别为２／１０、９／１０、１０／１０、１０／１０，病理保护率分别０／１０、７／１０、９／１０、１０／１０。抗体应答反应和特异性淋巴细胞转化试验证明，ＪＮ－１株的免疫作用是由细胞免疫和体液免疫共同完成。体外中和病毒试验显示，ＪＮ－１株抗血清能中和Ｊ－１、Ｓ＿（１１３３）、ＦＤＯ和Ｈ＿（９３０７）株。在５个有疫情的肉用种鸡场共免疫２８０００余只仔鸡和种鸡，免疫后再无ＡＶＡ疫情发生。     

中药复方禽瘟王对机体免疫功能的影响

以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠、京白蛋用鸡为对象，以白细胞介素－２（ＩＬ－２）、干扰素（ＩＦＮ）和自然杀伤细胞（ＮＫＣ）为指标，观察了中药复方制剂禽瘟王对机体ＩＬ－２，ＩＦＮ，ＮＫＣ网络的影响。结果表明，禽瘟王既能显著增强小鼠ＩＬ－２的活力，又能强化小鼠ＮＫＣ的杀伤活性，同时还可提高鸡体ＩＦＮ的效价水平。提示充分发挥ＩＬ－２，ＩＦＮ，ＮＫＣ网络的正向调节效应，可能是中药复方禽瘟王的药效学基础。     

网状内皮组织增殖病病毒感染鸡红细胞免疫功能的动态变化

对１日龄ＳＰＦ鸡分别腹腔接种３株禽网状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ）的ＲＥＶ－Ｔ，ＤＩＡ和Ｃ４８株，测得试验鸡红细胞补体（Ｃ３ｂ）受体花环率自接种后１１ｄ起显著低于对照组；而红细胞免疫复合物（ＩＣ）花环率从接种后２５ｄ起（３２ｄ除外），又显著高于对照组。接种不同ＲＥＶ毒株的鸡红细胞Ｃ３ｂ受体花环率和ＩＣ花环率的变化程度不一致，表明不同毒株引起的免疫抑制程度不同。     

鸡传染性支气管炎病毒的生物学特性

鸡传染性支气管炎病毒的生物学特性杨增岐赵余放李东成（审校）（西北农业大学陕西杨陵７１２１００）鸡传染性支气管炎病毒（ＡｖｉａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＢＶ）是冠状病毒科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）冠状病毒属（Ｃｏｒｏｎ...     

鸡用天然缓释免疫增强剂的研究──天然免疫增效药物的筛选

选用黄芪等１０种天然药物，将２６４只８日龄蛋用雏鸡分为１１组，每组２４只。１０个试验组，每组饲料中添加１种天然药物。在鸡３，５，７和１０周龄时检测Ｔ淋巴细胞Ｅ花环（ＥＲＦＣ）形成率、Ｂ淋巴细胞花环（ＥＡＣ）形成率、外周血淋巴细胞转化率、酸性α醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）阳性率，结果证明所选用的药物程度不同地增强了鸡的免疫功能。从中筛选出黄芪等７种免疫增效作用较强的药物。     

鸡传染性鼻炎血清抗体间接ELISA诊断试剂盒的研究

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的鸡上呼吸道传染病,有Ａ、Ｂ、Ｃ３种血清型,检测鸡血清中Ｈｐｇ抗体的方法有血清平板凝集试验（ＳＰＡ）、琼脂扩散试验（ＡＧＰ）、红细胞凝集抑制试验（ＨＩ）、间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）和阻断ＥＬＩＳＡ（Ｂ?..     

鸡传染性法氏囊病病毒的提纯和鉴定

取鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）患鸡的法氏囊病料经氟利昂作用去除杂蛋白，并经甘油一酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化；细胞适应毒在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上出现明显细胞病变后冻融、ＰＥＧ沉淀纯化。电镜观察、吸光庆测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）的结果表明，得到了完整形态的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。     

分泌抗鸡病毒性关节炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用鸡病毒性关节炎病毒（ＲｅｏＶ）免疫８ＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ＿２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＥＬＩＳＡ法检测和筛选，以有限稀译法克隆３次，获得４株分泌抗ＲｅｏＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，在传代期间能稳定地分泌ＭｃＡｂ。用杂交瘤细胞注射ＥＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水，其ＥＬＩＳＡ抗体效阶达４０００～８０００，在－７０℃条件下保存半年，其抗体效价不变。特异性分析结果表明，该ＭｃＡｂ只特异地与ＲｅｏＶ发生反应，而不与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＢＤＶ发生反应。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病，经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ ＧＩＢ） ，并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 株，ＨＡ 效价为２１２，ＥＩＤ５０ 为１０ －６．８１／０ ．２ ｍ Ｌ。病毒干扰试验中，ＩＢＶＪＢ９７０２ ＋ ＮＤＶ ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ 效价为２４～６ ，ＬａＳｏｔａ 接种鸡胚ＨＡ 效价为２１０～１１ ；用ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 病毒液１∶１０ 稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ１２０ 弱毒疫苗免疫雏鸡，发病８／１０ ，死亡３／１０ 。     

禽脑脊髓炎琼脂扩散沉淀抗原制备与应用的研究

应用禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株和内蒙古禽脑脊髓炎（ＡＥ）自然病鸡分离毒株（ＡＥＶ－ＮＨ９３７株）分别接种鸡胚，制出ＡＥ琼扩沉淀抗原。经实验室和部分鸿场应用结果表明，该抗原具有良好的特异性。抗原效价为１：３２，可检出不同日龄、品种和不同发病期的人工感染鸡和自然发病鸡血清中的ＡＥ抗体，结果可靠，方法简便，可以推广应用。     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

两种β_2受体激动剂快速免疫检测方法

分别以偶氮方法和碳化二亚胺（ＥＤＣ）方法将β２受体激动剂克伦特罗（ＣＬ）和塞曼特罗（ＣＩＭ）连接到载体蛋白上，并以连接物免疫家兔，分别制备兔抗ＣＬ和ＣＩＭ抗血清，经间接ＥＬＩＳＡ和间接抑制ＥＬＩＳＡ检测抗血清效价和特异性，并在此基础上建立了ＣＬ和ＣＩＭ快速免疫检测方法。２种抗血清工作浓度分别为１∶１００００和１∶５０００。ＣＬ和ＣＩＭ免疫检测范围分别为１．９ｎｇ～１５．６μｇ和０．４７７ｎｇ～１．８５μｇ。２种β２受体激动剂快速免疫检测方法的建立为监督畜牧生产上滥用ＣＬ和ＣＩＭ，检测肉品ＣＬ和ＣＩＭ残留提供了一种简便、灵敏、特异的手段。     

鸡传染性法氏囊病的快速诊断

应用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＦＭ＿１４）及其荧光标记物（ＦＭ＿１４－ＦＩＴＣ），对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳ－Ａ）和琼脂扩散试验（ＡＧＰ）三种检测方法的比较。结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６～８天的样品中检出抗原。２２例人工感染鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的整鸡阳性率分别为９６．８％、９５．２％和３８．７％；所有的ＡＧＰ阳性标本Ｄｏｔ－ＥＬＩ－ＳＡ和ＤＦＡ均为阳性，后两种方法的符合率为８７％。９６批次（被检鸡群达３８７００头份）野外送检病例之脾、肺、肾和法氏囊组织切片ＤＦＡ阳性率分别为４０％，１１％、１０％和８８％，而总阳性率则为９５％。     

微量血凝抑制试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

用Ａ型产气荚膜梭菌（ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓＩ）ｔｅ菌培养液和磷酸酯酶Ｃ分别处理的４株传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）浓缩液，经用微量血凝（ＨＡ）试验测定，ＩＢＶＭ，．株血义价较高，Ｈ（１２０）和Ｈ＿（１２０）株血凝价较低，Ｄ＿（４１）无血凝性，而以细菌培养液处理的Ｍ＿（４１）株，其血凝价最高。通过传染性支气管炎（ＩＢ）血凝抑制试验（ＨＩ）的研究以及对血清样品和卵黄样品的测定，表明所建立的微量ＨＩ可用于鸡ｍ血清和卵黄抗体的测定。     

几种鸡传染性法氏囊病灭能疫苗的效力试验

几种鸡传染性法氏囊病灭能疫苗的效力试验张生民，李桂芝，裴青生，刘振伟，张西云，马利青，冯金秀（青海省畜牧兽医科学院西宁８１０００３）我们用自然及人工感染鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）的死鸡的法氏囊、脾脏，肾脏、肝脏以及ＩＢＤＶ强毒接种鸡胚而死亡的全...