猫泛白细胞减少症的调查

猫泛白细胞减少症(Feline panleukopenia)又名猫瘟热(Feline distemper)、猫传染性胃肠炎(Feline infection senteritis)。本病30年代发现于欧美国家,Bolin和Johnsoil分离和鉴定其病原为细小病毒。血清学调查表明本病近年来亦广泛流行于日本。国内曾发生于江苏、陕西等省的家猫及公园猫科动物。近两年来,贵州省黔西县广泛流行着一种以呕吐、稀便(后期部份猫便秘),体温正常或偏高,常规药物治疗无效,病势凶猛,死亡率     

用醛化猪红细胞进行猫泛白细胞减少症病毒血凝试验

猫泛白细胞减少症(FPL )的病原是猫泛白细胞减少症病毒(FPLV),系细小病毒成员,又称为猫细小病毒(FPV)。本病在我国,据报道(张振兴等,1984)已成为当前最严重的猫病之一,本病可用血凝(HA)试验检测病猪粪便中的病毒而作出诊断。然而,应用新鲜猪红细胞作HA试验存在着不易长时间保存,不同个体的红细胞间有差异,以及有些个体的红细胞存在自凝现象等缺点。所以,我们进行了醛化猪红细胞的HA试验,得到了较好的效果。     

FPLV、LPV、CPV三种细小病毒的比较研究

用琼脂扩散试验(AGP)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和限制性核酸内切酶技术比较了我国分离的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)、云豹细小病毒(LPV)和犬细小病毒(CPV)的相关性。结果表明,在AGP中,纯化病毒(FPLV、LPV和CPV)混和液与3种病毒抗血清分别形成的沉淀线完全吻合;在ELISA中,OD值差异不显著(P>0.05);限制性核酸内切酶HaeⅢ、HindⅢ的酶切图谱初步显示,FPLV、LPV和CPV核酸电泳区带数目和位置均相似。     

豹、猞猁疑似猫泛白细胞减少症的诊断

猫泛白细胞减少症(Feline Panleukopenia)除了感染猫之外,还感染猫科动物,如豹、狮、虎、山猫、野猫,麝香猫;鼬科动物,如水貂、臭鼬;浣熊科的小熊猫、浣熊、长吻浣熊;灵猫科的熊狸等。其主要症状为消化道粘膜炎症和坏死,外周白细细减少,具有较高的发病率和死亡率。近年来,由于鼠害严重,养猫盛行,猫的市场交易频繁,而又没有严格的检疫,造成猫泛白细胞减少症在关中地区爆发流行,尤其是在珍贵观尝动物中出现此病,更应引起重视。本文报告了某动物园送检死豹、猞猁的脏器以及喂动物的羊肉的实验诊     

番鸭细小病毒与鹅细小病毒PCR鉴别诊断方法的建立

根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)的病毒培养物及其核酸进行扩增。结果,引物MDPVF1/R1仅特异性扩增出MDPV的900 bp核酸片段,引物GPVF1/R1仅特异性扩增出GPV的465 bp核酸片段。表明,建立的PCR方法可用于GPV和MDPV的鉴别诊断。     

猫细小病毒广西株的分离鉴定及动物发病模型的建立

本研究通过利用FK81细胞按常规方法对猫细小病毒进行分离鉴定。选取其中效价最高的分离株以不同剂量经口腔和鼻腔感染猫,通过测定LD_(50),观察临床症状、白细胞含量变化、组织病理变化等指标,构建动物发病模型。从86份疑似猫瘟粪便样品中成功分离到6株猫细小病毒,其中GX01株TCID_(50)及血凝价均高于其他5株;不同剂量GX01感染猫后均表现出高热、腹泻、呕吐和体重下降等典型临床症状;感染后第3天粪便中检测到病毒;发病后期白细胞严重减少;攻毒第14天测定LD_(50)为1×10~(-2).2;解剖表现为肠臌气、部分脏器肿大有出血点;组织病理切片观察到十二指肠和肺上皮细胞出现胞浆、胞核侵染、坏死等明显的组织病变,肾出现脂肪变性。本研究成功分离6株广西地区猫细小病毒并建立发病动物模型,为猫细小病毒发病机制和治疗药物的研究奠定了基础。     

猫瘟热的血凝和血凝抑制试验研究

猫瘟热(又称猫泛白细胞减少症)的诊断,国内外已作了大量报道和评价,其中以猫瘟热病毒(FPV)的血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验较为简单,但存在着粪便样品的HA检出率不高,血清样品的HI阳性标准不统一等缺点,为此我们对Carmichael等(1980)报道的HA-HI方法进行     

雪豹和云豹出血性肠炎的调查

雪豹(Panthera uncia)和云豹(Neofelis nebulosa)是珍贵野生动物,属于重要保护对象。豹的出血性肠炎,国内外有少量文献报道。1986年10月下旬至12月中旬在重庆动物园雪豹和云豹发生的出血性肠炎,通过实验动物和血清学检测,证明为猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)所致,并分离出FPLV病毒1株。 (一)发病情况 1986年10月21日,重庆动物园1只雪豹突然发病,体温升高、精神沉     

犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析

为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒能在CRFK细胞上良好生长并产生细胞变圆、脱落等特征性细胞病变;细胞培养物能扩增出CPV的特异性基因组;对病毒的VP2基因序列和推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,本研究的分离毒株属于New CPV-2a型,与CPV SH-2/2011株的亲缘关系最近,其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为99.83%和100%。上述结果表明,成功分离到1株New CPV-2a型犬细小病毒,将其暂命名为SH14株。本研究结果为进一步研究我国犬细小病毒的进化和变异,以及疫苗的研制奠定了物质基础。     

猫细小病毒广西分离株FPV-GX01全基因的克隆及遗传进化分析

为了解广西地区猫细小病毒(feline parvovirus,FPV)的生物学特性,阐明其基因组与遗传进化等特征。笔者采集经胶体金检测FPV阳性的粪便样品接种FK81细胞,进行病毒分离及理化特性鉴定,同时利用PCR分段扩增病毒基因组DNA,并与国内外分离株进行同源性及遗传进化比较分析。结果显示,分离株在FK81细胞上盲传3代后出现CPE,猪红细胞血凝价达1∶1 024,第5代病毒TCID50测定为10-5.2/0.1 m L,该毒株对热、酸、氯仿及乙醚有较强的抵抗力,将分离株命名为FPV-GX01。全基因测序结果表明,分离株基因组为4 901 bp,与2007年我国猫源细小病毒株FPV-XJ1同源性高达99.0%,属同一分支。氨基酸位点分析显示,FPV-GX01株VP2蛋白功能较少发生突变,与犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)氨基酸位点存在宿主差异;FPV-GX01 NS1蛋白序列上没有VP2蛋白稳定,第619位异亮氨酸突变成苯丙氨酸。广西地区分离的猫细小病毒也在不断发生遗传变异进化,本研究对该地区猫细小病毒的进化特征提供了一定的参考。     

用SPA-固相免疫电镜技术诊断犬细小病毒性肠炎

(一)材料与方法 1.被检粪样和肠内容物处理:新疆某警犬所出现呕吐、血样腹泻的病犬5只,采其粪样或病死犬肠内容物,分别编号为1、2、3、4、5号,按1/2(V/V)量加入0.01MpH7.6的PBS,充分振摇,冻融2次,再加入等量氯仿充分振荡后,3000rpm离心30分钟,吸取水相待检。 2.抗体:①西德产Magioban,该制品为含有犬瘟热、犬腺病毒肝炎、犬钩体、犬细小病毒的狗免疫球蛋白,批号为23795。②猫泛白细胞减少症阳性血清、南京农大蔡宝祥教授惠赠。     

抗水貂肠炎病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

将水貂肠炎病毒SMPV-11株纯化后免疫4～6周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经亚克隆和间接ELISA筛选,获得了8株稳定分泌抗水貂肠炎病毒SMPV-11株单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为D3、H5、F5、F4、A9、B7、H11和H8.经过鉴定:其腹水ELISA效价分别在1:6.4×103和1:2.56×104之间;且与犬瘟热病毒、阿留申病病毒、犬腺病毒不发生交叉反应;而与水貂肠炎病毒、犬细小病毒和猫泛白细胞减少症病毒呈特异性反应;这8株单克隆抗体均为IgG类型.     

猪细小病毒感染的流行病学调查

猪细小病毒(PPV)是引起猪繁殖障碍的主要病原之一。该病普遍存在于世界各地的猪群中,主要表现为胚胎和胎儿感染和死亡,而母体通常缺乏临床症状。1988年我们通过血清学试验证实了北京地区猪细小病毒感染的存在,随后分离到2株病毒,对其中1株做了理化特性鉴定,证明为猪细小病毒。为了进一步了解猪细小病毒的危害情况,我们在北京地区进行了血清学及15个阳性猪场繁殖障碍情况调查,现将调查结果报告如下。     

犬细小病毒广西流行株的分离鉴定及生物学特性分析

为了解当前犬细小病毒广西地方毒株的生物学特性,本研究收集广西各地疑似犬细小病毒(CPV)感染病犬的粪便通过接种F81细胞进行病毒的分离培养,并通过血凝试验、抗性分析、同源性分析和攻毒试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,接种3代后,细胞出现明显的病变(CPE),血凝效价为1∶512,第5代病毒的TCID_(50)为1×10~(-3.6)/0.1 m L,能抗热、酸、氯仿和乙醚;电镜观察到CPV为直径约25 nm圆形、无囊膜的结构,应用CPV特异性引物检测到长约1 419 bp和1 254 bp的特异性条带,提示成功分离到一株犬细小病毒毒株;测序分析结果表明,VP2基因与周边国家地区及我国各地方的参考毒株、流行株核苷酸同源性为98.9%~99.8%;系统进化发生分析表明,广西分离株的基因型为CPV-2a亚型,与泰国参考毒株VT148亲缘关系最近;与其它CPV-2a亚型相比,分离株的第267位、305位、324位和440位氨基酸位点发生了变异;动物回归试验结果表明,犬细小病毒广西分离株属于强毒株。本研究成功分离到犬细小病毒广西地方流行株,并对其主要衣壳蛋白VP2基因进行遗传变异分析,为更好的预防和控制犬细小病毒提供依据。     

猪细小病毒的电子显微镜观察

猪细小病毒(porcine parvo virus简称ppv)是母猪繁殖障碍引起流产、死胎、木乃伊、畸形和不孕的重要因素。该病毒首先由英国从死产猪胎儿、分娩之后死亡的猪和猪的阴道分泌物中分离获得。(Cartnwight等,1967),此后比利时、法国、美国、澳大利亚等国相继报道,我国的上海、黑龙江、四川等省近年来也先后报道了该病在本地区的发生,其血清抗体阳性率为50～80％。     

猪霉形体病的监控与预警预报

猪霉形体病(Mycoplasmalpneumoniaofswine ,MPS)是由猪肺炎霉形体(Mycoplasmahyopneumo niae)引起的慢性接触性呼吸道传染病[1] ,对养猪业危害极大。笔者试图从病原学、流行病学、临床症状、病理变化等方面对该病的监控和预警预报作一概述。1　病原学关于猪霉形体病的病原,早期有人认为是细菌,以后又有人认为是病毒,直到196 5年,美国的Mare等和英国的Goodwin等在无细胞的人工培养基中培养成功,证实其病原是霉形体,并将该病命名为猪霉形体病或霉形体肺炎。1973年,我国学者也从发病猪体分离到该病原。1.1　猪肺炎霉形体的形态特征猪肺炎霉…     

貉源细小病毒的分离鉴定

从大庆某貉养殖场采集病貉的病理病料,处理后接种于犬肾细胞(MDCK),分离到8株病毒.对分离毒株进行了中和试验、血凝试验、理化性质的鉴定试验,应用PCR方法扩增分离毒株VP2部分基因并进行序列分析.结果显示,病料接种MDCK细胞72 h后产生了明显的细胞病变(CPE);分离毒株可以被犬细小病毒阳性血清中和,中和效价为1:106～1:107;分离毒株对氯仿、乙醚不敏感,耐酸耐热,可以凝集猪红细胞,其凝集作用可被犬细小病毒阳性血清抑制;用PCR检测病毒的细胞培养液,可扩增出长531 bp的片段,该片段的核苷酸序列与吉林分离的犬细小病毒株(EU310373)的同源性为99.6%.表明,分离的这8株病毒均为貉源细小病毒.     

猫杯状病毒GX2019的分离鉴定及全基因克隆遗传进化分析

从南宁某宠物医院疑似感染猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)猫鼻咽拭子中,利用F81细胞分离1株FCV后,RT-PCR和电镜鉴定,测定TCID_(50)和理化性质。同时利用RT-PCR分段扩增病毒全基因序列,进行同源性及遗传进化分析。结果显示,FCV GX2019分离株的TCID_(50)为1×10~(-8.67)/0.1 mL,基因组全长为7 687 bp,与FCV CH-JL4(长春株)毒株核苷酸序列相似性最高,为85.3%,属于同一分支。氨基酸分析表明,与国内FCV疫苗株255、国外FCV疫苗株F9、FCV跛行综合征株2280及FCV GX01分离株氨基酸变异率分别为46.7%、26.7%、53.3%、40.0%,其中B细胞抗原识别表位中氨基酸位点发生了改变。     

鸡传染性贫血的研究进展

鸡传染性贫血 (Chickeninfectiousanemia)是由鸡传染性贫血病毒 (Chickeninfectiousanemiavirus ,CIAV)引起的 ,以贫血、胸腺萎缩、骨髓黄化、造血机能障碍和免疫机能损害为特征的传染病。 1979年Yuasa等[1] 在日本首次分离到CIAV (Gifu 1株 )。最初定名为鸡贫血因子 (CAA)。目前已发现该病毒广泛分布于主要家禽生产国家 ,如日本、美国、澳大利亚、新西兰及欧洲、南美洲一些国家[2 ] 。我国于1992年首次分离到该病毒[3] ,随后相继从黑龙江、山东、辽宁、吉林等地的鸡群中分离到野毒株。根据近几年的流行病学调查 ,CIAV在我国鸡群中…     

东北虎感染猫泛白细胞减少症的研究——综合诊断

本文根据武汉动物园3只7月龄同窝幼虎相继发生以高热、腹泻、呕吐和白细胞减少为特征的临床症状,经过流行病学调查、病理剖检、血凝试验、人工感染试验,初步确诊东北幼虎患的是猫泛白细胞减少症。