外伤性癫痫病灶中caspase-10的表达

【摘要】目的观察凋亡基因caspase-10存外伤性癫痫病灶中的表达变化,探讨其作用机制。方法收集外伤性、非外性癫痫患者手术切除的恼皮质及交通事故死亡者脑皮质各15例,运用RT-PCR技术观察比较各实验组凋亡基因caspase-10表达水平,采用荧光免疫组织化学染色技术观察各实验组凋亡基因对应蛋白的表达情况。结果外伤性癫痫组（：aspase-10基冈和蛋白表达水平比非外伤性癫痫组和交通事故死亡组高,差异有统计学意义（P〈0．05）;非外伤性癫痫组caspase-10基因和蛋白表达水平亦显著高于交通事故死亡组（P〈0．05）。结论凋亡基因caspase－10能促进神经元凋亡,对外伤性癫痫的发病过程有促进作用。     

Bcl-2蛋白在外伤性癫痫病灶中的表达

目的观察Bcl-2蛋白在外伤性癫痫病灶中的表达变化,探讨其作用机制。方法收集外伤性癫痫、非外性癫痫患者及交通事故死亡者脑皮质各15例,采用免疫组织化学和荧光免疫组织化学技术,观察各实验组Bcl-2蛋白表达水平,测定阳性表达的灰度值,数据采用SPSS 12.0软件进行统计分析。结果外伤性及非外伤性癫痫组Bcl-2蛋白表达水平均高于交通事故死亡组（P〈0.05）;而非外伤性癫痫组表达明显高于外伤性癫痫组,差异亦具有显著统计学意义（P〈0.05）。结论 Bcl-2蛋白能抑制神经元凋亡,对外伤性癫痫的发病过程具有抑制作用。     

外伤性癫痫灶中泛素蛋白酶体系的形态学改变

目的检测泛素(ubiquitin,Ub)和泛素激活酶(ubiquitin-activating enzyme1,UbE1)在外伤性癫痫灶中的表达,探索其对鉴定外伤性癫痫的应用价值。方法收集脑外伤后癫痫灶皮质样本15例(外伤性癫痫组)、非脑外伤后癫痫灶皮质样本15例(非外伤性癫痫组),交通事故死亡正常脑皮质样本15例(非癫痫组),通过HE常规染色观察各组形态学改变,用免疫组化染色检测3组中Ub和UbE1的表达情况。结果常规HE染色下,与非癫痫组相比,外伤性癫痫组和非外伤性癫痫组出现神经元数量减少、神经元变性等形态学改变,外伤性癫痫改变更明显。Ub和UbE1主要表达在癫痫灶神经元细胞核、细胞质内,细胞外未见表达。图像分析显示两指标的表达量为外伤性癫痫组非外伤性癫痫组非癫痫组,差别具有统计学意义(P0.05)。结论正常神经元数量减少、神经元变性是癫痫灶的主要病理改变之一,外伤性癫痫神经元病理改变更明显。与HE染色比较,Ub和UbE1免疫组化染色更灵敏,有助于鉴别外伤性癫痫和非外伤性癫痫。     

外伤性癫痫灶中泛素与泛素激活酶的定量分析

目的 定量测定人体外伤性癫痫灶中泛素(ubiquitin,Ub)和泛素激活酶(ubiquitin-activating enzyme,UbE1)的表达,研究泛素蛋白酶体系在外伤性癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)发病机制中所起的作用,探索其在PTE鉴定中的应用价值. 方法 分别收集颅脑外伤致癫痫患者脑癫痫灶组织(外伤性癫痫组)、非颅脑外伤性癫痫灶组织(非外伤性癫痫组)和交通事故死亡者正常脑组织(非癫痫组)各15例,应用RT-PCR、Western印迹技术检测3组中Ub和UbE1的含量,并对所得数据进行统计学分析. 结果 RTPCR、Western印迹技术测定显示Ub和UbE1的mRNA和蛋白质在3组中含量为外伤性癫痫组>非外伤性癫痫组>非癫痫组,两两比较,组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Ub和UbE1在癫痫灶组织中表达增加,且在外伤性癫痫灶组织中增加最为明显.推断泛素蛋白酶体系的活化是PTE神经元病理改变的重要机制之一.     

外伤后大脑癫痫灶中SLIT-2的表达变化

目的通过测定人体大脑外伤后癫痫灶中轴突再生调控因子SLIT-2的表达情况,探讨其在外伤后癫痫鉴定中的应用意义。方法 75例人大脑皮质样本分为3组:①实验组:为脑外伤后癫痫患者(30例),②对照组1:为非外伤性癫痫患者(30例),③对照组2:为车祸致颅脑损伤死亡者(15例)。实验组和对照组1样本来源于癫痫手术所切除的脑皮质(患者或其近亲属知情,自愿提供);对照组2样本来源于尸体解剖的大脑皮质。通过HE染色、免疫组化染色、westernblot和图像分析技术,观察、检测上述样本SLIT-2的表达情况,所得数据经统计学处理分析。结果 SLIT-2在实验组与对照组1癫痫灶皮质的神经细胞膜上呈阳性表达,在对照组2中仅有微量表达。实验组SLIT-2的表达高于对照组1,两组间的差异具有显著性意义(P0.05);显著高于对照组2,两组间的差异具有显著性意义(P0.05)。结论 SLIT-2有望作为区别外伤后癫痫与非外伤性癫痫的病理指标之一,通过进一步研究,逐步运用到法医学的鉴定实践之中,为外伤后癫痫的法医病理学鉴定提供客观依据。     

外伤性癫痫灶组织的基因表达谱分析

目的比较外伤性和非外伤性癫痫灶组织的基因表达谱,探索外伤性癫痫的发病机制,为相关鉴定提供依据。方法收集外伤性和非外伤性癫痫灶组织样本各15例。分别提取总RNA,经逆转录标记不同的探针与人类cDNA表达谱芯片杂交,获得扫描图像,分析信号的强度和比值,对实验数据按照RNA微阵列分析法标准化,对差异表达基因进行聚类分析。结果两组样本中共有超过2 990条基因明显表达（表达超过背景2～5倍以上）。以30%样本中的表达调节水平大于1.5倍作为差异基因筛选标准,与非外伤性癫痫组比较,外伤性癫痫组样本中存在显著性表达差异的基因有192个,其中表达上调的有115个,表达下调的有77个。结论采用基因表达谱芯片技术可以有效地识别外伤性癫痫和非外伤性癫痫的差异表达基因,并可用于外伤性癫痫发病机制和分子分型的研究。     

大鼠外伤性癫痫模型皮层SPP1蛋白的表达

目的检测分泌型焦磷酸蛋白1 (Secreted phosphoprotein 1,SPP1)在外伤性癫痫(post-traumaticepilepsy,PTE)大鼠皮层脑组织中的表达变化,探讨其与外伤性癫痫的关联。方法随机将18只大鼠分为正常对照组、生理盐水组和实验组。建立外伤性癫痫模型。采用免疫组化法检测GFAP蛋白,采用Western blot法检测SPP1蛋白。结果大鼠行为学平均评分为4分;EEG显示明显痫性放电;免疫组化结果显示,实验组大鼠脑组织GFAP阳性细胞与正常对照组和生理盐水组比较,显著增高(P <0.05);生理盐水组GFAP阳性细胞与正常对照组比较,差异不具有统计学意义(P> 0.05),以上结果综合表明成功建立了大鼠外伤性癫痫模型。Western blot结果显示,实验组SPP1蛋白表达量较正常对照组和生理盐水组显著增高(P <0.01);生理盐水组SPP1蛋白表达量较正常对照组不显著,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 SPP1在外伤性癫痫大鼠皮层脑组织中表达显著上调,外伤性癫痫的发生机制可能与SPP1的表达异常增高有关。     

单核细胞趋化蛋白1及其受体在冠心病猝死中的表达

目的：探讨单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）及其受体CC类趋化蛋白受体2（CC chemokine receptor-2,CCR-2）在冠心病猝死（sudden coronary death,SCD）和非SCD冠状动脉粥样硬化斑块中的差异表达。方法应用免疫组织化学方法检测MCP-1和CCR-2在SCD组、动脉粥样硬化组（冠状动脉粥样硬化但非SCD）、对照组（冠状动脉正常）的差异表达。结果 MCP-1在三组间的阳性细胞表达率分别是78%、47%、0%,两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;CCR-2在三组间的阳性细胞表达率分别是72%、47%、0%,在SCD组和动脉粥样硬化组、SCD组与对照组表达差异均有统计学意义（P〉0.05）,而在对照组和动脉粥样硬化组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论冠状动脉粥样硬化斑块中的MCP-1及其受体CCR-2的表达增加与SCD密切相关。     

交通事故致癫痫大发作伤残等级鉴定43例分析

目的研究交通事故脑外伤致癫痫大发作者伤残等级评定的影响因素,探讨癫痫大发作伤残等级评定中的注意事项。对象与方法应用SPSS软件．统计2006年1月至2007年12月本中心受理的交通事故致癫痫大发作鉴定案例共43例,对受伤时年龄、初次癫痫发作时间、损伤部位与伤残等级的相关性进行分析,并对外伤性癫痫的认定方法进行探讨。结果左、右两侧大脑半球脑损伤致癫痫大发作后伤残等级比较有统计学意义（P〈0．01）,20岁以下者与60岁以上者脑损伤后癫痫的伤残等级比较有统计学意义（P〈0．01）,20岁以下者与20岁以上（未达60岁）脑损伤后癫痫的伤残等级比较无统计学意义（P〈0．05）;癫痫初次发作时间不同的各组间伤残等级比较无统计学意义（P〈0．05）。影像学（CT片、MRI片）资料是确定外伤性癫痫的必备条件,而脑电图检查则是参考条件。结论根据损伤部位、影像学表现等认定外伤性癫痫。并对癫痫大发作做出准确的伤残等级鉴定。     

实验性脑挫伤后caspase—1表达的研究

目的阐明不同程度及不同时间脑挫伤后caspase-1表达的变化。方法应用免疫组织化学染色、Western-blotting和RT-PCR方法对48例实验性脑挫伤大鼠的脑组织进行了检验,同时以3例非脑挫伤和3例假手术的脑组织做对照。结果脑挫伤后1h caspase-1即有表达,24-48h达高峰,挫伤后两周caspase-1阳性细胞仍维持较高水平。阳性细胞多集中于挫伤区及周围带皮质和脑实质内海马区,不同程度脑挫伤各组之间阳性细胞面积存在差异;损伤组caspase-1酶原裂解增加;损伤组caspase-1mRNA表达量明显高于对照组;不同程度脑挫伤组之间于各个时间段caspase-1mRNA表达未见差异。 结论 Caspase-1表达增加,可辅助诊断1h-14d的脑挫伤,并可根据caspase-1阳性细胞面积的变化来确定脑挫伤程度,同时对判断挫伤时间方面也有一定的价值。caspase-1参与脑挫伤后的神经细胞凋亡。     

外伤性癫痫的法医学鉴定21例分析

为了探讨颅脑损伤后癫痫的法医学鉴定要点,对 21例颅脑损伤后癫痫出现发作者进行了现病史、既往史调查,并结合临床脑电图（ EEG）及 X线片、 CT片、 MRI片等影像学资料。结果发现外伤后癫痫常继发于严重的颅脑损伤,多以晚期发作为主,其发作性质决定于颅脑损伤的部位和程度,头皮 EEG和 24小时动态 EEG证实有异常癫痫样波存在,影像学检查有助于定性分析。结果提示：外伤性癫痫法医学鉴定必须以掌握外伤史及既往史为基础,结合 EEG、 CT、 MRI等检查方可作出正确鉴定。     

外伤性癫痫法医学评定100例分析

目的探讨颅脑外伤后癫痫的法医学评定要点,提出外伤性癫痫的法医学评定依据。方法对100例颅脑损伤后癫痫患者门诊及住院病历,结合临床脑电图（EEG）结果、CT片、MRI片等影像学资料,进行了回顾性分析。结果依据GBl8667-2002《道路交通事故受伤人员伤残评定》标准有关颅脑损伤后癫痫发作类型、发作频率的相关条款规定,Ⅲ级伤残8人,Ⅴ级伤残10人,Ⅶ级伤残22人,Ⅸ级伤残40人,Ⅹ级伤残20人。误工期限、营养期限和护理期限评定结论时间长短差异较大,具有个体化特征。结论外伤后癫痫常继发于严重的颅脑损伤,其发作特点决定于颅脑外伤的部位和程度,外伤性癫痫法医学鉴定必须以外伤史及既往史为基础,结合电生理及影像学检查,综合癫痫发作类型、频率及药物控制情况作出正确的伤残等级及误工期限、护理期限、营养期限的鉴定结论。     

创伤致休克和多器官功能不全综合征中的细胞凋亡研究

研究创伤致休克和多器官功能不全综合征中的细胞凋亡 ,探讨细胞凋亡在创伤性休克和多器官功能不全综合征中的发生机理及其在法医学上的应用。用TUNEL末端标记、流式细胞仪等方法 ,对广泛软组织挫伤死亡尸解15例的肝、肾、心、脑等组织进行凋亡检测。其中因创伤性休克死亡 10例 ;因MODS死亡 5例。TUNEL末端标记法检测 :创伤休克组肝、肾、心、脑的细胞凋亡指数 (AI)明显高于对照组 ;创伤MODS组肝、肾、心、脑的细胞凋亡指数 (AI)明显高于创伤休克组和对照组 ,经统计学处理有显著性差异 (P <0 0 1)。流式细胞仪检测 :创伤休克组肝、肾、心、脑的凋亡峰值分别为 2 0 3 %、 19 1%、 18 6 %、 30 0 % ;创伤MODS组肝、肾、心、脑的凋亡峰值分别为 42 2 %、 45 1%、 39 7%、 6 2 9%。创伤致休克和MODS死亡人体尸解器官中细胞凋亡增多。     

Postmortem investigation of lamotrigine concentrations

Lamotrigine is a relatively new anticonvulsant. Therapeutic plasma concentrations generally range from 1 to 4 mg/L, although several studies have shown that good control of epilepsy has been achieved with concentrations reaching 10 mg/L generally, with little toxicity. In overdose, however, the drug has been linked to ECG changes that may suggest a possible arrythmogenic effect and hence cardiac toxicity. Lamotrigine has also been shown to cause encephalopathy and thus neurotoxicity. There is no information concerning postmortem lamotrigine concentrations and their interpretation. We describe lamotrigine concentrations in postmortem specimens including blood, liver, bile, vitreous humour, and urine from eight cases. A high performance liquid chromatography (HPLC) method is described with extraction procedures for the various tissues. Two possible groups were identified. The first being the "broader therapeutic" group with blood concentrations ranging from 0.9 to 7.2 mg/L and corresponding liver concentrations ranging from 16 to 36 mg/kg. The second being a "supratherapeutic" group with blood concentrations ranging from 20 to 39 mg/L and corresponding liver concentrations ranging from 53 to 350 mg/kg. Although none of the eight cases described were attributed to overdose by lamotrigine alone, the cause of death for one of the three cases in the "supratherapeutic" group was given as mixed drug toxicity. Cause of death for the remaining two cases in this group was reported as epilepsy. However, both these cases showed elevated concentrations of lamotrigine and both were co-medicated with valproic acid. Such co-administration has been shown in the literature to lead to elevated lamotrigine concentrations and a reduction in lamotrigine dose has been recommended. With such data, we highlight the importance of monitoring lamotrigine concentrations in cases co-medicated, particularly with valproic acid.     

大鼠脑震荡后大脑多巴胺D_1受体的动态表达观察

目的探讨大鼠脑震荡后不同时间大脑多巴胺D1受体在不同部位的表达变化。方法用金属单摆打击装置复制大鼠脑震荡模型,将56只大鼠随机分为脑震荡后1、2、4、8、16和24d 6个损伤组和1个正常对照组,每组8只。于大鼠脑震荡后不同时间取内侧隔核(MSN)、左右Broca斜角带垂直支(VDB)、丘脑网状带(RT)脑组织,用免疫组化染色(SP法)观察脑组织不同区域多巴胺受体(D1)表达情况,用图像分析系统进行定量分析。结果各组大鼠脑组织D1受体免疫组化阳性表达变化情况:在MNS区,脑震荡后1d细胞阳性表达开始减弱,到16d细胞阳性表达最弱,16～24d细胞阳性表达开始增强,但在24d仍比对照组的表达弱。在VDB区,脑震荡后1d细胞阳性表达开始减弱,2d细胞阳性表达最弱,脑震荡后2～24d细胞阳性表达开始增强,但在24d仍比对照组的表达弱。在RT区,脑震荡后1d细胞阳性表达开始减弱,4d细胞阳性表达最弱,4～24d细胞阳性表达开始增强,到24d与对照组表达接近。结论大鼠脑震荡后不同时间,脑组织多巴胺D1受体在MSN、VDB、RT不同区域的表达轻微下调,但下调差异无显著性意义。     

心肌缺血猝死心肌中高迁移率族蛋白B-1的表达研究

目的探讨高迁移率族蛋白B-1(High Mobility Group Box protein 1,HMGB1)在心肌缺血猝死后诊断中的法医学价值。方法收集不同案例心肌蜡块分为疑似早期心肌缺血猝死组(早期梗死组)20例、心肌梗死猝死组(心肌梗死组)15例、冠心病非心源性猝死组(对照组1)10例和正常心肌组(对照组2)10例,应用免疫组织化学二步法染色,观察心肌胞核和胞浆中HMGB1表达,用ImagePro Plus 6.0软件计算HMGB1表达的平均光密度,用SPSS 13.0对表达进行数据统计分析。结果 HMGB1在四组心肌细胞胞核中表达均呈阳性;早期梗死组和心肌梗死组胞浆均呈阳性表达,对照组1和对照组2胞浆呈阴性。各组平均光密度分别为0.3031±0.0557、0.3195±0.0523、0.0252±0.0030、0.0207±0.0029,早期梗死组和心肌梗死组的阳性反应与两个对照组相比存在显著差异(P﹤0.01)。结论 HMGB1可作为早期心肌缺血猝死的一个辅助诊断指标。     

Fatal and non-fatal bilateral delayed carotid artery dissection after manual strangulation

Carotid artery (CA) dissection and/or thrombosis may occur in a number of medical and forensic relevant situations. However, post traumatic carotid artery dissection is considered rare, and often underestimated due to possible delayed presentation. We describe two cases of carotid artery dissection following strangulation with delayed symptoms as well as discuss medical diagnostic problems and their forensic implications.     

Patient Profiles of Criminal Behavior in the Context of Traumatic Brain Injury

Traumatic brain injury (TBI) can lead to significant post‐traumatic disturbances in mood and behavior, with the frontal lobes playing a key role in emotional and behavioral regulation. Injury to the frontal lobe can result in disinhibition and aggression which can result in police intervention and/or incarceration. We highlight four adult cases with a history of severe TBI with frontal lobe injuries and the presence of post‐TBI criminal behaviors. There is evidence to support an anatomical basis for aggressive behaviors, yet there are other risk factors to be considered. Behaviors must be investigated thoroughly by obtaining adequate pre‐ and post‐TBI psychiatric and psychosocial histories. By having a comprehensive understanding of aggression while appreciating the complex relationship between TBI, aggression, and premorbid risk factors, clinicians can more adequately treat patients with TBI, with the aim of potentially preventing criminal behaviors and recidivism.