替米考星肺靶向微球的研制

采用乳化-化学交联法制备了替米考星肺靶向微球,并采用高效液相色谱法,通过MCPKP药代动力学软件分析,验证了该替米考星明胶微球在兔体内的肺靶向性。结果显示,替米考星明胶微球性质稳定、分散良好,且带有正电荷,平均粒径为11.20μm,粒径5.0～25.0μm的微球占总数的95.65%;载药量为39.83%,包封率为70.47%;形态圆整;体外释药半衰期(T50)为5.99 h,约在35 min时有突释效应,随后缓慢释放。替米考星明胶微球对肺的靶向效率较心脏、肌肉、肝和肾分别提高了5.05、3.04、4.60、3.47倍;肺、心脏、肌肉、肝和肾的相对摄取率分别为8.48%、1.72%、2.79%、1.85%和2.44%;肺、心脏、肌肉、肝和肾的峰浓度比分别为2.19、0.41、0.64、0.75和0.84。表明用优化的制备工艺制得的替米考星明胶微球有良好的肺靶向性,同时可以减轻替米考星的心脏毒性。     

硒化修饰太子参多糖对巨噬细胞免疫活性的影响

为了探究硒化太子参多糖对细胞免疫活性的影响,运用醇沉水提获取太子参粗多糖,Sevage法除蛋白,DEAE-52纤维柱进行粗糖纯化,然后运用亚硒酸钠法,在不同时间、不同温度和不同亚硒酸钠浓度条件下对太子参多糖进行三因素水平的正交硒化修饰[L9(34)],从而得到了9种硒化太子参多糖,分别为sRPP1~sRPP9。运用MTT法比较了这9种硒化多糖对RAW264.7巨噬细胞体外增殖的影响,选出了效果较好的4种硒化多糖:sRPP2,sRPP3,sRPP8,sRPP9。通过在细胞中分别添加这4种硒化多糖,检测硒化多糖对细胞免疫活性的影响,结果显示,这4种硒化太子参多糖促进了巨噬细胞对中性红的吞噬能力,NO产生量以及IL-6、TNF-α分泌。结论,硒化修饰的太子参多糖能够提高巨噬细胞的免疫活性,其中sRPP3活性最强,可以作为新型免疫增强剂的候选药。     

转移因子纳米脂质体的制备及其体内吸收情况的观察

采用逆相蒸发法制备转移因子脂质体(TFL),以包封率为优化指标,正交试验优选最佳配方;电镜下观察TFL形态,紫外法检测包封率和渗透率;并用电镜观察用药后小白鼠小肠的吸收情况。结果,确定的最佳制备工艺为:卵磷脂与胆固醇的摩尔比为2∶1,转移因子(TF)浓度为6 mg/mL,吐温-80为1 mL,有机相与水相的体积比为4∶1。电镜下大部分TFL粒径小于100 nm,分布均匀,包封率高达49.5%,4.5个月后的渗透率为52.4%。采用优选工艺制备的转移因子纳米脂质体具有一定的稳定性,而且小肠内吸收良好。     

利用Box-Behnken效应面法优化氟苯尼考纳米混悬剂处方

为了优化制备氟苯尼考纳米混悬剂,使用介质研磨法制备氟苯尼考纳米混悬剂,以粒径、多分散系数为评价指标,采用Box-Behnken设计-效应面法评价氟苯尼考纳米混悬剂的处方,并进行验证,用HPLC法测定氟苯尼考纳米混悬剂的含量。结果显示,最优处方为药物浓度为10.12%、HPMC浓度为11.88 mg/m L、SDS浓度为1 mg/m L。制得的氟苯尼考纳米混悬剂的粒径、多分散系数、含量分别为(264.57±5.37)nm、0.176±0.004、(10.67±0.12)%,与模型理论预测值接近。结果表明,Box-Behnken效应面法适用于氟苯尼考纳米混悬剂的处方优化,且具有良好的预测性。     

伊维菌素聚乳酸微球的研制及其体外释药试验

以生物可降解材料聚乳酸（ＰＬＡ）为载体,用乳化溶剂挥发法制备含伊维菌素（ＩＶＭ）的聚乳酸微球,采用Ｌ１８（３７）正交设计,以微球粒径分布为主要优选指标,筛选出最佳制备条件。所得微球药物包封率高,粒径分布理想,大小适合注射给药;体外释药试验微球无明显突释现象,可缓慢地以接近恒速释药。     

地克珠利肠溶微囊的制备及其特性的研究

为了以肠溶材料聚丙烯酸树脂Ⅱ为囊材制备地克珠利肠溶微囊,以地克珠利为囊心物,丙烯酸树脂Ⅱ为囊材,采用液中干燥法制备了地克珠利肠溶微囊并研究了其粒径、载药量、包封率、体外释药等性质。结果显示,经对制备工艺优化制得的地克珠利肠溶微囊为类圆球形颗粒,平均粒径为270μm,平均载药量为26.57%,包封率为87.42%,体外释放符合肠溶制剂的标准。结果表明,该制备工艺简单,所制得的地克珠利微囊具有肠溶特性。     

硫酸阿米卡星脂质体的制备及包封率测定

为研制硫酸阿米卡星脂质体 ,在研究了有关单一因素对硫酸阿米卡星脂质体包封率和稳定性影响的基础上 ,运用正交设计法 ,优化脂质体的制备工艺和处方为 :m(磷脂 )∶m (胆固醇 ) =1.5∶1.0 ,m (硫酸阿米卡星 )∶m(总脂 ) =1∶15 ,PBS液的 pH值为 7.0 ,V (脂 )∶V (水 ) =3∶1,以乙醚为有机溶剂 ,运用逆相蒸发法制备了硫酸阿米卡星 ,其包封率和稳定性较好。     

不同部位贯众黄酮的响应曲面法优化微波提取和体外抗氧化及细胞增殖试验的研究

本试验旨在研究响应曲面法制备贯众黄酮的最佳提取工艺条件。在单因素试验的基础上,采用响应曲面法考察乙醇体积、料液比以及微波处理时间对贯众黄酮提取率的影响,并研究提取不同部位的贯众黄酮对细胞进行增殖试验和体外抗氧化能力的测定。结果显示,黄酮的最佳提取工艺:乙醇浓度70%,料液比1∶56.04,微波处理时间10.74 min,在此条件下黄酮得率的实测值为2.63%,与预测值2.69%相接近。不同部位的贯众黄酮,在一定质量浓度范围内,对羟自由基、DPPH自由基清除率和总还原能力表现良好。细胞增殖试验表现出贯众黄酮对巨噬细胞有显著的增殖作用。结果表明,采用响应曲面法对贯众黄酮提取条件进行优化合理可行,贯众黄酮具有较好的体外抗氧化和细胞增殖能力。     

猪脾转移因子微囊的制备及其活性检测

为了提高转移因子的稳定性,以壳聚糖和海藻酸钠为囊材,采用乳化外部凝胶法制备猪脾转移因子微囊,并检测了其粒径大小、包封率、载药量等性质;通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验和迟发型超敏反应试验检测转移因子微囊的药理活性。结果显示,转移因子微囊呈类圆形,平均粒径为11.05μm,包封率为60.8%,载药量11.60mg/g;转移因子微囊能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,提高迟发型超敏反应的能力,效果优于转移因子。结果表明,该制备工艺简单,转移因子微囊具有较好的发展前景。     

头孢噻呋钠-壳聚糖纳米粒的制备及相关性质的研究

为了延长头孢噻呋钠的作用时间,采用离子交联法制备头孢噻呋钠-壳聚糖纳米粒,研究其形态、粒径、载药量、包封率和体外释药特性。结果显示,经优化工艺所得的纳米粒形态规整,近圆形,平均粒径为179.4±39.5nm,平均包封率为84.31%±2.53%,平均载药量为6.69%±0.18%。体外释放试验表明,原料药在放入释放介质后第4小时释放率达到90%以上,而纳米粒在此时药物仅释放60%。结果表明,该纳米粒制备工艺可行,对头孢噻呋钠具有明显的缓释效果。     

头孢噻呋钠纳米脂质体的制备及表征

优选头孢噻呋钠纳米脂质体的处方工艺并对其理化性质进行考察,为奶牛乳房炎的治疗提供参考。以无水乙醚为助溶剂,磷酸缓冲液(PBS,pH=6.3)为水化剂,采用逆向蒸发-薄膜分散法制备头孢噻呋钠纳米脂质体。以头孢噻呋钠与卵磷脂质量比、卵磷脂与胆固醇质量比、无水乙醚与PBS的体积比为考察因素,包封率为评价指标,采用L_9(3~4)正交试验设计优选处方。利用紫外分光光度法测定头孢噻呋钠含量,超滤离心法测定头孢噻呋钠纳米脂质体的包封率。以纳米激光粒度仪测定脂质体的粒径,光学显微镜和透射电镜观察其形态,体外释药曲线计算脂质体的累计释放率。结果显示,头孢噻呋钠纳米脂质体的最佳处方工艺为膜材比为4∶1,药脂比为1∶5,有机相与水相的比为3∶1。所得脂质体包封率为61.8%±1.14%,平均粒径为86.74 nm,多分散指数(PDI)为0.23。头孢噻呋钠纳米脂质体标准曲线为A=24.549C+0.1246,平均回收率为98.44%,RSD均小于1%。头孢噻呋钠纳米脂质体在6 h内累计释放率为65%以下,而同样时间内头孢噻呋钠累计释放率超过80%,头孢噻呋钠纳米脂质体的释放率较头孢噻呋钠更缓慢。结果表明,以逆向蒸发-薄膜分散法制备的头孢噻呋钠纳米脂质体较头孢噻呋钠有缓释性。其形态为椭圆、均一无黏连聚集的球形,粒径分布均匀、包封率高。     

吡喹酮脂质体的研制

以氢化豆磷脂和胆固醇为膜材 ,采用逆相薄膜蒸发法制备了吡喹酮脂质体 (PZQ Lip)。经电镜和光镜检测显示 ,PZQ Lip粒径大部分为 2～ 5 μm ,并以大单层脂质体为主 ;3批PZQ Lip的平均包封率为 71.8%± 2 .2 % (n =3 ) ,平均含药量为 8.9%± 0 .2 % (n =3 ) ;用建立的反相高效液相色谱法 (RP HPLC)检测PZQ时 ,简便、准确 ;绝对平均回收率按照低、中、高 3个浓度水平 ,依次为 99.7%± 1.4%、99.8%± 1.7%、99.5 %± 1.8%     

基于免疫彩色纳米微球的犬瘟热病毒抗体检测凝集试验

为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体,快速检测幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源抗体或免疫犬抗体水平的间接凝集试验,本研究表达纯化了CDV H截短的重组蛋白rsH2,并以rsH为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过间接凝集反应条件的优化,特异性、敏感性、稳定性试验和临床样品的检测,建立了一种快速检测CDV抗体的间接凝集试验。特异性结果显示,致敏微球仅与CDV阳性血清发生凝集反应,不与狂犬病病毒、犬腺病毒和犬细小病毒的阳性血清发生凝集反应,特异性强;凝集试验可检测血清中和抗体的最低效价为1∶35;不同批次制备的致敏微球和4℃保存90 d的致敏微球的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性好;该凝集试验对45份血清样品的检测结果与CDV抗体检测试剂盒检测结果的阳性符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的检测CDV抗体的间接凝集试验具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为CDV抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的检测方法。     

利福昔明悬乳剂的制备及稳定性影响因素试验

为制备稳定的利福昔明悬乳剂,采用单因素试验法初步筛选了悬乳剂油相、乳化剂、辅助乳化剂的种类及悬乳剂配方。采用正交试验设计,对初定配方和生产工艺进行了优化,最终筛选的悬乳剂配方为:利福昔明1.08 g,油相20 m L,乳化剂7 m L,辅助乳化剂2 m L,水25 m L;生产工艺为:室温条件下以800 r/min搅拌速度乳化7 min;制备的悬乳剂黏度为424.58 m Pa·s,颗粒粒径大小均匀,呈正态分布,平均粒径为386 nm,稳定性好,室温久置不分层。试验结果表明,研制的2%利福昔明悬乳剂性状良好,符合相关质量要求。     

新型伊维菌素微球片剂的制备及其对猪蛔虫病的疗效观察

用包封了伊维菌素的玉米醇溶蛋白微球制备新型伊维菌素微球片剂。通过片剂崩解试验和硬度测试,优化了其配比和干燥时间;将制得的片剂在温度为(40±2)℃、相对湿度为(75±5)%的条件下进行为期6个月的加速稳定性试验,评估环境因素对片剂质量的影响;通过对猪蛔虫病的疗效试验,确定了该伊维菌素微球片剂的推荐剂量及药效持续时间。按照优化配方制备的药片崩解时间小于15 min,对温度和湿度不敏感,稳定性佳;剂量在0.3 mg/kg以上的各伊维菌素微球片剂处理组给药7、14、21 d后,蛔虫卵转阴率均超过90%,与未经药物处理的空白对照组有极显著差异(P0.01)。结果证实,该新型片剂符合《中华人民共和国兽药典(二2 2五年版)》的要求,对猪蛔虫病的治疗效果较好,推荐剂量为0.3 mg/kg,药效能持续3周以上,具有很好的临床应用前景。     

用响应面法优化四黄止痢复方中药提取工艺

为制备四黄止痢复方中药并建立其高效液相色谱(HPLC)检测方法,在单因素试验的基础上,以浸渍时间、料液比[质量(g)体积(mL)比]、甲醇体积分数为自变量,黄芩苷、盐酸小檗碱质量浓度及干膏率综合评分为因变量,采用HPLC法测定其质量浓度,响应面法进行试验设计、建立数学模型,并进行预测分析。结果显示,四黄止痢复方中药的最佳提取工艺为浸渍时间146 min、料液比1︰333、甲醇体积分数80%。建立的HPLC色谱条件为色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 m),流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水(B)梯度洗脱,检测波长278 nm,流速1.0 mL/min,进样体积10 L,柱温25℃。结果表明,用响应面法优化的四黄止痢复方中药提取工艺,方法简单,精密度高;所建立的HPLC法可用于四黄止痢复方中药的检测。     

贝尼尔聚乳酸微球制备条件的研究

采用单因素设计 ,利用溶剂挥发法以微球载药量为主要的优先水平 ,结合微球粒径大小筛选制备贝尼尔聚乳酸微球的最佳条件。结果 ,贝尼尔与聚乳酸的最适质量比为 1∶2 ,聚乳酸的体积分数为 6 .6 7% ,超声波处理时间为 30s ,非溶剂系统为 10 g/L明胶缓冲液 ,二氯甲烷的挥发速度为 0 .0 5mL/min ,干燥温度为室温 (15～ 2 5℃ )。     

大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

以热灭活的大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)菌体抗原为免疫原,E.coli O157∶H7菌体结合脂多糖(LPS)为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体。采用改良过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(HRP)酶标抗体,并建立检测E.coli O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法。结果,成功制备了9株稳定分泌E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中7F9和7G2为LPS O-特异性多糖(O-SP)单克隆抗体,与E.coli O157∶H7菌体具有较好的反应性。此双抗体夹心ELISA方法对与受试的非O157菌株没有交叉反应,对E.coli O157∶H7纯培养菌液的检出下限为3×104CFU/mL。结果表明,建立的ELISA检测方法对E.coli O157具有较高的特异性和灵敏度,该方法有望与其他方法相结合用于对E.coli O157∶H7的检测。     

盐酸沙拉沙星混悬乳剂的制备及在家兔体内药动学的研究

采用高压均质法制备盐酸沙拉沙星混悬乳剂,测定其沉降体积比、重分散特性和粒径;将家兔分别单剂量肌肉注射盐酸沙拉沙星注射液和盐酸沙拉沙星混悬乳剂,采用高效液相色谱法测定家兔血浆中药物浓度,用DAS2.0药动学程序计算药动学参数。结果显示,制备的盐酸沙拉沙星混悬乳剂的沉降体积比为100%,重分散特性好,平均粒径为8.61μm。盐酸沙拉沙星混悬乳剂和盐酸沙拉沙星注射液在家兔体内的消除半衰期分别为11.89h±3.08h和5.04h±1.19h,AUC分别为15.38(h·μg)/mL±1.99(h·μg)/mL和4.90(h·μg)/mL±1.35(h·μg)/mL。结果表明,高压均质法制备盐酸沙拉沙星混悬乳剂的工艺简单可行,盐酸沙拉沙星混悬乳剂在家兔体内吸收、消除速度缓慢,作用时间延长,具有良好的缓释性能。     

太子参茎叶多糖对小鼠脾淋巴细胞因子含量及对细胞因子和转录因子mRNA表达量的影响

为研究太子参茎叶多糖(Radix pseudostellariae stem and leaf polysaccharides,RPSLP)对小鼠脾淋巴细胞因子含量及对细胞因子和转录因子mRNA表达量的影响。将RPSLP添加到体外分离培养的淋巴细胞中,用ELISA法检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α含量;RT-PC R法检测上述细胞因子以及转录因子T-bet、G ATA-3的mRNA表达量。检测结果表明,添加RPSLP后在3.125~50 g/m L浓度范围内可显著促进细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α的分泌及其mRNA的表达(P0.05),并能调控T-bet、GATA-3的mRNA表达,使T-bet/GATA-3比率处于动态平衡。上述结果说明,RPSLP可以通过调控细胞因子mRNA表达来改变分泌量,对小鼠脾淋巴细胞起免疫调节作用。