高效液相色谱法同时检测水产品中7种四环素类抗生素残留的研究

采用Inertsil C8-3(5μm,250 mm×4.0 mm i.d.)反相色谱柱,以pH 4.0的EDTA-McIlvaine缓冲溶液为提取溶液,以HLB固相萃取柱为净化柱,以甲醇 乙腈 0.01 mol/L三氟乙酸为流动相(梯度洗脱),流速为1.5 mL/min,检测波长为350 nm,进样量100μL,建立了同时检测水产品中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、去甲基金霉素、甲烯土霉素和二甲胺四环素等7种四环素类抗生素残留的液相色谱法。该方法的检出限为1.5~5.0μg/kg,测定低限为50μg/kg,线性范围为50~1 000μg/kg,加标回收率为75.2%~100.6%,相对标准偏差为2.19%~10.56%。上述结果表明,该方法具有灵敏、准确、简便、快速等优点,适用于水产品中上述7种四环素类抗生素残留的同时检测。     

氯霉素在动物源食品中的残留分析研究进展

作为一种广谱抗生素,氯霉素因其良好的抗菌性能,曾被广泛应用到畜牧业及水产养殖中。但由于其严重的毒副作用,近年来美国、欧盟及中国等已禁止应用于动物疾病防治,规定在动物源性食品中不得检出。因氯霉素具有良好的抗菌性能,在养殖业中依旧存在违法滥用可能,并导致在动物性食品中残留。本文主要介绍了氯霉素残留的危害、残留现状及常见的检测方法,通过对比各种方法的优缺点及适用范围,为氯霉素残留分析选择检测方法及开发更高效的检测技术提供参考。     

我国动物性食品中兽药残留监控工作的现状和建议

20 0 1年 4月 ,欧盟从我国出口的水产、蜂蜜、肠衣等产品中检测出氯霉素残留超标 ,对我国畜产品及水产品出口造成一定负面影响。为此 ,认真分析当前我国动物源性食品中兽药残留监控的现状和存在的问题 ,制订相应的办法和措施 ,将会给我国动物源性食品中兽药残留监控工作的开展带来积极的影响。1　造成动物性产品药物残留的主要原因动物性产品的生产链长 ,包括养殖、屠宰、加工、储存运输、销售等环节 ,任何一个环节操作不当或监控不力都可能造成药物残留 ,而畜禽养殖环节用药不当是造成药物残留的最主要原因。目前 ,畜禽养殖不规范用药的现…     

苦马豆素来源及其检测方法的研究进展

概述了苦马豆素的来源和理化特性的研究情况,从薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、酶分析法、荧光光谱和离子抑制色谱等几个方面介绍了苦马豆素定性、定量检测方法的研究进展,并对各种检测方法的优缺点进行了比较.     

严格监控动物源食品中兽药残留保障人类健康和出口贸易的发展

由于现代兽药在防治畜禽疾病和促进畜禽增产上的广泛应用,必然要造成动物源食品中的兽药残留。这些残留兽药便会构成对人类健康的威胁,同时也会直接影响动物源食品的出口贸易发展,这一问题已引起了国际社会的极大关注。我国对动物源食品残留兽药的控制和监测工作起步较晚,现已引起国家高度重视,并正在不断完善一系列法规的制定工作。     

白鸡屎藤挥发油主要成分的定性定量分析

为了探讨白鸡屎藤挥发油的药代动力学特征及其药物残留检测方法,采用化学试剂法对白鸡屎藤挥发油进行定性分析,然后通过柱前衍生高效液相色谱技术对白鸡屎藤挥发油的主要成分进行了定量检测。化学试剂定性方法的研究结果表明,白鸡屎藤挥发油含有酸类、酚类、醛或酮类、醇类、酯或内酯类(包括△α,β-γ内酯环)以及被还原性成分;高效液相色谱技术分析结果表明,白鸡屎藤挥发油含有丁香酚、异丁香酚、左旋α-松油醇、右旋α-松油醇、芳樟醇、水杨酸甲酯、樟脑、龙脑等药理活性成分,以芳樟醇、水杨酸甲酯、龙脑的含量最高,丁香酚、异丁香酚、左旋α-松油醇、右旋α-松油醇、樟脑的含量相对较高。通过白鸡屎藤挥发油柱前衍生化处理,建立的白鸡屎藤挥发油主要成分的高效液相色谱检测方法具有简单、快速的特点,在30min内可完成对白鸡屎藤挥发油主要活性物的分析,适用于白鸡屎藤挥发油的质量控制、药代动力学研究和药物残留检测。     

韭菜挥发油成分的气相色谱-质谱分析及抗常见病原菌活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取韭菜挥发油,通过体外抑菌试验检测其抑菌活性,确定体外最小抑菌浓度(MIC);并采用气相色谱-质谱(GC-MS)法分离检测韭菜挥发油成分。结果显示,韭菜挥发油具有广谱的抑菌活性,且对不同细菌的MIC不同。在韭菜挥发油中鉴定出17个组分,主要为二丙烯基-双硫醚(39.308%)、甲基-丙烯基-双硫醚(32.763%)、甲基-丙烯基-三硫醚(12.157%)、二丙烯基-三硫醚(7.330%)。结果表明,韭菜挥发油具有研发成新型抗菌药物与食品防腐剂的潜力。     

牛乳中三氮脒残留高效液相色谱检测方法的建立

以乙腈沉淀牛乳中的蛋白质,上清液采用Oasis WCX固相萃取小柱净化浓缩,用乙酸-甲醇溶液洗脱药物,研究了牛乳中三氮脒残留的高效液相色谱检测方法。洗脱液上机检测,紫外检测波长372nm,色谱分析柱为氰基柱,流动相为V(乙腈)∶V(甲酸铵溶液)=10∶90,等度洗脱。当样品中三氮脒的含量为0.010～1.00μg/mL时,药物质量浓度与检测信号存在良好的相关性(r2>0.999);牛乳中三氮脒的检测限为0.50×10-2μg/mL,定量限为0.010μg/mL。牛乳按0.010、0.10和1.00μg/mL 3个添加水平做三氮脒的回收率试验,回收率≥82%,变异系数在1.3～4.2之间。结果表明,本研究建立的三氮脒残留高效液相色谱检测方法重复性好,灵敏度高,操作简便,可用于牛乳中三氮脒残留的检测。     

适配体及其在动物医学领域中的应用研究进展

简要介绍了适配体的概念及其优点,从治疗药物的选择、小分子物质检测及基因调控等领域对适配体的研究现状进行了综述,叙述了适配体在动物疾病治疗、动物性食品中抗生素残留的检测以及动物性食品中微生物污染的检验等动物医学领域的应用情况。     

17α-甲基睾酮在猪毛发中蓄积规律的研究

为建立猪毛发中17α-甲基睾酮残留的液相色谱-串联质谱检测方法,研究多剂量内服、单剂量肌肉注射两种给药方式下,17α-甲基睾酮在猪毛发的蓄积规律及差异,选用体重为(20.0±3.5)kg的杜长大三元杂交猪6头,随机分为2组,一组按体重4 mg/kg内服17α-甲基睾酮、连续给药30 d,另一组按体重4mg/kg单剂量肌肉注射17α-甲基睾酮,毛发样品均采集到给药后第61天。样品处理后经液相色谱-串联质谱仪分析检测。以时间为横坐标、质量分数为纵坐标,分析17α-甲基睾酮在猪毛发中的残留规律。结果显示,17α-甲基睾酮在0.75~1 000 ng/g范围内线性关系良好(r2=0.999 1);检测限为0.30 ng/g,定量限为0.75 ng/g。多剂量内服给药组,第一次给药后第10天,毛发中药物质量分数达到峰值,而后出现下降,到约16 d后趋于稳定,停药后逐渐下降;单剂量肌肉注射给药组,药物质量分数在给药后第10天达到峰值,而后迅速下降;两种给药途径,在给药后第61天均仍能检测到17α-甲基睾酮。结果表明,建立的检测方法灵敏度较高;多剂量内服给药组在给药30 d及停药后31 d内、单剂量肌肉注射给药组在给药后61 d内均可在猪毛发中检测到17α-甲基睾酮,但不同给药方式之间蓄积差异较大。     

鸽蛋中氯霉素甲砜霉素氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺同时检测的超高效液相色谱-串联质谱法的建立

为建立同时检测鸽蛋中氯霉素(CAP)、甲砜霉素(TAP)、氟苯尼考(FF)及其代谢物氟苯尼考胺(FFA)多残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,将样品经过液-液萃取(LLE)或者加速溶剂萃取(ASE)提取、净化,采用电喷雾离子源(ESI)模式和多反应监测模式(MRM),通过UPLC-MS/MS检测和确证分析。结果显示,CAP、TAP、FF和FFA添加水平分别为定量限(LOQ),0.5、1.0和2.0倍的最低要求执行限量(MRPL)或最高残留限量(MRL)时,平均回收率在91.55%～105.47%范围内,相对标准偏差(RSD)均低于3.04%,日内RSD为1.83%～3.70%,日间RSD为2.72%～4.62%。CAP、TAP、FF和FFA在鸽蛋中的检测限(LODs)为0.03～0.4ug/kg(S/N≥3),LOQs为0.08～1.2ug/kg(S/N≥10),其显著低于最大残留限量(MRL)。结果表明,此方法快速、准确、灵敏度高,定性、定量准确,适用于鸽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的检测。     

山羊组织中硝唑尼特代谢产物的液相色谱-串联质谱检测

以替唑尼特为检测对象,建立了一种检测山羊组织中替唑尼特残留的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经正己烷脱脂、乙腈提取,收集提取液于60℃水浴氮气吹干,乙腈溶解,经0.22μm微孔滤膜过滤后,采用多反应监测模式进行分析。结果显示,对于肝样品,替唑尼特在0.25～25μg/kg范围内线性关系良好(r20.99),检测限和定量限分别为0.1μg/kg和0.25μg/kg;对于肾、肌肉、脂肪样品,替唑尼特在0.1～25μg/kg范围内线性关系良好(r20.99),检测限和定量限依次为0.05μg/kg,0.1μg/kg;0.025μg/kg,0.05μg/kg;0.025μg/kg,0.05μg/kg。结果表明,该方法操作简单,灵敏度高,适用于山羊组织中替唑尼特残留量的检测。     

进境动物源性饲料中沙门菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立快速鉴别诊断进境动物源性饲料中沙门菌的实时荧光定量PCR方法,以inv A基因为靶基因,通过构建p UCm-inv A重组质粒建立的标准曲线确定了检测体系的灵敏度,并利用特异性试验和稳定性试验评价体系的检测性能。结果显示,该检测体系对基因组DNA的检测灵敏度为17 copies/L;由标准曲线的相关系数可知,初始拷贝数的对数值与Ct值之间具有良好的重现性(R2=0.988);进境动物源性饲料样品的检出率与国标法一致;30份模拟污染样品的检出率达100%。结果表明,建立的快速鉴别诊断方法具有检测限低、重复性好、定量准确、数小时内即可得出检测结果的优点,极大地提高了进境动物源性饲料中沙门菌检测的工作效率和口岸通关速度。     

消毒鲜牛奶中抗生素残留的检测

消毒鲜牛奶中抗生素残留的检测王春奕赵青叶成江马睿麟（西宁动物检疫所８１０００７）抗生素是治疗动物疾病常用的药物，并作为饲料添加成分被广泛使用。但抗生素在动物体内及其产品中容易残留，经动物性食品进入人体，对人体健康产生不利影响和危害。为此我们采用目前国...     

动物产品及饲料中牛源和羊源性成分PCR检测方法的优化

以牛肉、山羊肉为试验材料,对动物产品及饲料中牛源、羊源性成分 PCR检测方法进行了优化。结果,牛源性成分的最低检测限可达 10μg/g,羊源性成分的最低检测限达 0. 1μg/g。PCR检测和酶切鉴定结果表明,在水平测试的混合饲料粉中可检出牛源、羊源性成分。     

利用UPLC-TOF及MS/MS鉴定头孢喹肟中的同分异构体

建立了分离鉴定头孢喹肟中同分异构体杂质的UPLC与TOF及MS/MS联用方法。以乙腈-1m L/L甲酸水为流动相进行梯度洗脱,经RP18色谱柱分离,通过电喷雾串联质谱正离子模式在线检测,使得头孢喹肟及其同分异构体杂质获得有效分离,主成分和其同分异构体杂质的保留时间分别为4.9 min和4.5 min,同时它们的二级质谱产物离子信息及其裂解方式呈现明显的差异。本试验初步建立了分离及鉴定头孢喹肟同分异构体杂质的色谱质谱检测方法,为硫酸头孢喹肟原料药和制剂的有关物质研究及检测奠定了基础。     

野生动物园不同源性大肠杆菌耐药性及PFGE分型研究

为了解福州动物园内不同源性大肠杆菌的耐药性及亲缘情况,为大肠杆菌病防治提供依据,笔者用微量肉汤法对8种抗菌药物进行药敏试验、PCR法检测intⅠ1、blaamp C、gyr A基因,并采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法对分离自不同源性的大肠杆菌进行DNA指纹图谱分型,比较菌株之间的亲缘关系。结果显示,不同源性大肠杆菌耐药率为84.30%,其中复方新诺明(66.94%)、四环素(65.29%)和头孢唑林(48.76%)耐药率最高;多重耐药以2~4重耐药为主,占67.86%;intⅠ1基因检出率为24.79%,gyr A基因检出率为83.47%,blaamp C基因检出率为85.95%;PFGE分型结果显示,各菌株之间相似系数大部分在40%~75%之间,少数在70%~75%。结果表明,福州动物园内大肠杆菌整体耐药情况较严重,intⅠ1、blaamp C、gyr A基因与多重耐药具有相关性;动物源性、环境源性和人员性之间存在的多重耐药大肠杆菌之间未发现同一菌株的垂直克隆传播,没有流行病学相关性。     

牛源纹带棒状杆菌的分离鉴定及其耐药基因与agr管家基因的检测

首次于牛鼻拭子中分离得到1株优势菌株,经16S rRNA鉴定该菌为纹带棒状杆菌。动物回归试验、小鼠致病性试验结果显示,该菌具有一定的条件致病性。药敏试验与耐药基因检测结果显示,该菌四环素耐药基因与大环内酯类药物耐药基因均呈显性表达。PCR检测结果显示,该纹带棒状杆菌存在毒力相关基因——agr管家基因(accessory gene regulator)。     

鱼肌肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的高效液相色谱检测

建立了同时检测鱼肌肉组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的高效液相色谱检测法。以水和丙酮为提取溶液,Oasis MCX固相萃取柱为净化柱,采用Inertsil ODS—3(5μm,250 mm×4.6 mm i.d.)反相色谱柱,以A液(0.02 mol/L庚烷磺酸-钠0.025 mol/L磷酸钠溶液,二者体积比68∶32,pH3.85)与B液(含1 mL/L三乙胺的甲醇溶液)为流动相,梯度洗脱,紫外检测器225 nm处检测。结果显示,在10~1 000μg/kg浓度范围内,线性关系良好;加标回收率为75.9%~82.8%,日内变异系数为2.1%~5.8%,日间变异系数为4.7%~7.7%;氟苯尼考胺和氟苯尼考的检测限分别为5μg/kg和10μg/kg,定量限分别为10μg/kg和20μg/kg。结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点,适于同时检测鱼肌肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺的残留。     

广东省鸡源弯曲杆菌的耐药性调查与PFGE分型

为研究广东省鸡源弯曲杆菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型与耐药的相关性,测定了42株空肠弯曲杆菌和33株结肠弯曲杆菌对6类12种抗菌药物的最小抑菌浓度并进行了PFGE分型分析。耐药性结果显示,这些弯曲杆菌对12种抗菌药物表现出较强的耐药性,对喹诺酮类药物的耐药率达100%,其中结肠弯曲杆菌对6大类抗菌药物的耐药率高于空肠弯曲杆菌,对大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、克林霉素的耐药性达60%以上,而空肠弯曲杆菌对这些抗菌药物较为敏感。PFGE分型结果显示,弯曲杆菌基因型呈现多态性,大部分空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌具有相似的耐药模式,均可分为27个不同的PFGE型,包含6个PFGE基因簇。结果表明,鸡源弯曲杆菌对喹诺酮类药物高度耐药,出现了对喹诺酮类+四环素类+氟苯尼考等多种耐药菌谱,同型弯曲杆菌菌株与耐药性具备一定的相关性。