利用间接免疫荧光技术检测鸡传染性贫血病毒抗体

利用间接免疫荧光技术检测鸡传染性贫血病毒抗体王秀荣王笑梅李建伟杨琳１）陆月华陈卫国（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１）鸡传染性贫血（ＣＩＡ）早期称为贫血因子病，是由鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）引起的。ＣＩＡ于１９７９年由日本学者Ｙｕａｓａ等首...     

禽流感及其研究动态

禽流感及其研究动态薛景山（拱北动植物检疫局珠海５１９０２０）禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ，ＡＩ）是由禽流感病毒（ＡＩＶ）引起的一种烈性传染病，几乎所有野生及家养禽类都可感染。当鸡感染高致病性ＡＩＶ时，常被称为鸡瘟（ＦｏｗｌＰｌａｑｕｅ，第一届...     

进境种鸡传染性贫血抗原检测

鸡传染性贫血（ＣＩＡ）是由鸡贫血病毒（ＣＡＶ）引起，以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为特征的鸡病。可导致发病鸡贫血、免疫功能低下、疫苗免疫失败以至死亡，给养禽业造成较大的经济损失。为掌握国外种鸡ＣＩＡ的带毒情况，对来自不同国家、不同品种的种鸡进行了...     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

人工感染鸡传染性法氏囊病病毒死亡鸡各脏器病原的含量测定

人工感染鸡传染性法氏囊病病毒死亡鸡各脏器病原的含量测定朱瑞良，张绍学，牛钟相（山东农业大学动物科技学院泰安２７１０１８）鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）感染雏鸡后，各组织器官的含毒量均不相同，我们通过琼脂扩散反应（ＡＧＰ）检测了人工感染ＩＢＤＶ死亡的...     

应用PCR检测人工感染鸡体内鸡传染性贫血病毒的动态分布

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测人工感染１２周龄ＳＰＦ鸡体内鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）的动态分布结果,感染后第２周可从外周血液白细胞中检出ＣＡＶＤＮＡ,在第３周时达到最高峰,然后逐渐下降,第６周时检出率仅为６．３％（３／４８）,第７周以后均未能从血液白细胞中检测到ＣＡＶＤＮＡ;人工感染后第２～１２周均能从骨髓、胸腺、脾、肾、肝和腔上囊等组织检出ＣＡＶＤＮＡ,其中以骨髓和胸腺的检出率最高（８５．０％）,其次是脾（８０．０％）、肾和肝（６０．０％）,腔上囊最低（２５．０％）,从１２周以后上述几种组织中再未检测到ＣＡＶＤＮＡ。并从ＰＣＲ检测结果为阳性的组织中也分离到ＣＡＶ。     

鸡传染性支气管炎病毒的生物学特性

鸡传染性支气管炎病毒的生物学特性杨增岐赵余放李东成（审校）（西北农业大学陕西杨陵７１２１００）鸡传染性支气管炎病毒（ＡｖｉａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＢＶ）是冠状病毒科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）冠状病毒属（Ｃｏｒｏｎ...     

网状内皮组织增殖病病毒感染鸡红细胞免疫功能的动态变化

对１日龄ＳＰＦ鸡分别腹腔接种３株禽网状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ）的ＲＥＶ－Ｔ，ＤＩＡ和Ｃ４８株，测得试验鸡红细胞补体（Ｃ３ｂ）受体花环率自接种后１１ｄ起显著低于对照组；而红细胞免疫复合物（ＩＣ）花环率从接种后２５ｄ起（３２ｄ除外），又显著高于对照组。接种不同ＲＥＶ毒株的鸡红细胞Ｃ３ｂ受体花环率和ＩＣ花环率的变化程度不一致，表明不同毒株引起的免疫抑制程度不同。     

鸡传染性支气管炎

鸡传染性支气管炎（ＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ＩＢ）是由冠状病毒科（Ｃｏｒｏｎａｖｒｉｒｉｄａｅ）冠状病毒属（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病。ＩＢＶ主要损伤雏鸡的呼吸道、生殖系统...     

禽脑脊髓炎琼脂扩散沉淀抗原制备与应用的研究

应用禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株和内蒙古禽脑脊髓炎（ＡＥ）自然病鸡分离毒株（ＡＥＶ－ＮＨ９３７株）分别接种鸡胚，制出ＡＥ琼扩沉淀抗原。经实验室和部分鸿场应用结果表明，该抗原具有良好的特异性。抗原效价为１：３２，可检出不同日龄、品种和不同发病期的人工感染鸡和自然发病鸡血清中的ＡＥ抗体，结果可靠，方法简便，可以推广应用。     

麻雀体内传染性法氏囊病病毒的分离鉴定及理化特性研究

从传染性法氏囊病（ＩＢＤ）阳性麻雀体内分离到了一株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验和ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针斑点杂交试验证明该病毒为ＩＢＤＶ。病毒可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，产生细胞病变效应（ＣＰＥ）。病毒血清型鉴定为Ⅰ型，病毒代谢抑制试验证明其基因组为ＲＮＡ，病毒核酸的电泳图谱呈两条特征带。病毒对乙醚不敏感，ｐＨ２．０不能灭活病毒，ｐＨ１２可使病毒失去感染性，５６℃作用３小时病毒仍有活性，７０℃１小时可灭活病毒。以上结果表明从麻雀体内分离到的ＩＢＤＶ理化性质比较稳定，与目前鸡场流行的ＩＢＤＶ极为相似，可能与鸡ＩＢＤＶ同源，提示麻雀可能在ＩＢＤ流行病学中起主要作用。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离株的血清分型研究

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离株的血清分型研究姜北宇郑世兰白丽萍刘月焕景小冬姚颖（北京市农林科学院畜牧兽医研究所１０００８１）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由病毒引起的一种急性、高度接触性呼吸道及泌尿生殖道疾病。鸡感染鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）后，表现...     

禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎（ＡＥ）病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。     

应用反转录 - 聚合酶链技术快速检测猪瘟病毒RNA的研究

依据猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）５′端非编码区保守序列设计一对ＰＣＲ引物，建立了检测ＣＳＦＶ的反转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）技术。应用该技术从猪瘟兔化弱毒感染兔的脾、淋巴结、肾与肌肉等以及石门株强毒感染猪的脾与肌肉和湖北分离毒株感染猪组织匀浆液中均特异扩增出了１条预期大小为１９４ｂｐ的片段，从实验感染兔和猪的血液中也特异扩增出了该片段，但对牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）和健康兔脾总ＲＮＡ以及健康猪的血液ＲＮＡ扩增均为阴性。采用这种方法，对实验感染兔脾总ＲＮＡ的检测灵敏度可达１０－８ｇ，表明其灵敏度足以达到临床检验的要求。     

禽脑脊髓炎病毒的提纯和电镜观察

将禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株、１１４３株和ＮＨ９３７株分别经卵黄囊接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚，接毒１０日后解剖鸡胚，收集尿囊液，采集脑、消化道和胰腺，用玻璃匀浆器制备２０％的组织悬液。组织悬液经３次冻融充分破坏细胞，释放病毒，然后以４００Ｏｒ／ｍｉｎ离心２０分钟，１００００ｒ／ｍｉｎ离心４０分钟。上清液经浓缩后轻轻加入已含２ｍｌＣｓＣｌ不连续密度梯度的５ｍｌ离心管内，再以４５０００ｒ／ｍｉｎｌ２℃离心２小时，在ＣｓＣｌ连续密度梯度内取出含ＡＥＶ的组分后经对蒸馏水透析除去ＣｓＣｌ，对聚乙二醇－６０００透析浓缩。病毒样本经１％磷钨酸负染后用透射电镜观察见到典型的ＡＥＶ粒子。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病，经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ ＧＩＢ） ，并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 株，ＨＡ 效价为２１２，ＥＩＤ５０ 为１０ －６．８１／０ ．２ ｍ Ｌ。病毒干扰试验中，ＩＢＶＪＢ９７０２ ＋ ＮＤＶ ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ 效价为２４～６ ，ＬａＳｏｔａ 接种鸡胚ＨＡ 效价为２１０～１１ ；用ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 病毒液１∶１０ 稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ１２０ 弱毒疫苗免疫雏鸡，发病８／１０ ，死亡３／１０ 。     

分泌抗鸡病毒性关节炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用鸡病毒性关节炎病毒（ＲｅｏＶ）免疫８ＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ＿２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＥＬＩＳＡ法检测和筛选，以有限稀译法克隆３次，获得４株分泌抗ＲｅｏＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，在传代期间能稳定地分泌ＭｃＡｂ。用杂交瘤细胞注射ＥＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水，其ＥＬＩＳＡ抗体效阶达４０００～８０００，在－７０℃条件下保存半年，其抗体效价不变。特异性分析结果表明，该ＭｃＡｂ只特异地与ＲｅｏＶ发生反应，而不与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＢＤＶ发生反应。     

感染IBDV的雏鸡在接种传染性支气管炎疫苗后血液中免疫细胞数量及功能的变化

感染ＩＢＤＶ的雏鸡在接种传染性支气管炎疫苗后血液中免疫细胞数量及功能的变化李晓明（甘肃农业大学兰州７３００７０）鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）主要侵害雏鸡免疫系统，引起免疫抑制，使其对多种疫苗的应答能力降低。但有关ＩＢ－ＤＶ感染鸡群在接种传染性支气...     

鸡传染性腔上囊病二价细胞弱毒疫苗的研究

鸡传染性腔上囊病二价细胞弱毒疫苗的研究贺荣莲吴健敏兰美益蒋冬福黄红梅韦志锋（广西兽医研究所南宁５３０００１）鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）是危害养鸡业的重要传染病之一，其病原鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）感染后引起鸡群发病死亡，因其损伤鸡的免疫器官腔上...     

鸡传染性支气管炎免疫扩散试验研究

鸡传染性支气管炎免疫扩散试验研究范根成，杜元钊，朱万光，刘佩兰（农业部动物检疫所青岛２６６０３２）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）诊断方法很多，免疫琼脂扩散试验（ＡＧＰ）是其中之一。Ｗｏｅｒｎｌｅ等用感染鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）制备出ＡＧＰ抗原，但由于ＣＡＭ...