对用煌绿滴鼻法检测兔巴氏杆菌隐性感染的异议

由于家兔自身常常隐性感染巴氏杆菌,因此许多书刊都介绍,用于巴氏杆菌病试验的家兔需在试验前数日以0.3～0.5％的煌绿溶液滴鼻,观察有无化脓性鼻炎反应。如果滴鼻后出现脓性鼻涕流出,该兔即为隐性感染巴氏杆菌阳性,不能用于试验;反之为阴性,可用于试验。1986年以来,我们用此法检测试验兔数批80余只,滴鼻后阳性率很高,且反应强烈,脓性鼻涕浓稠、量多,且有约50～60％的阳性兔逐渐不食、消瘦、呼吸困难而死亡。主要剖解病变为一侧或两侧呈化脓性肺炎或格鲁布性肺炎;而未用煌绿滴鼻的同圈饲养兔子则表现正     

多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理,采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51-17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pm9616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因,并对其进行序列分析。将C51-17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中,将重组表达载体pET30a-prfA转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blot分析。结果显示,这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95.6%~100%,在氨基酸水平上的同源性为98.9%~100%。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45.6ku,与预期的大小一致,以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应,具有良好的反应原性。     

煌绿激发试验引起死亡初报

动物试验是对巴氏杆菌病进行细菌学诊断的常用方法之一,在实验动物中小白鼠和家兔对哺乳动物的各种巴氏杆菌均富有感受性。《兽医微生物学》(吉林农业大学主编,189页,农业出版社,1961年)。《养兔学》(张家口农专主编,188页,农业出版社,1981年)、《家兔传染病》(张家口农专编,17页,1977年)、《兽医检验》(解放军兽医大学编,655页,农业出版社,1979年)各书中规定:进行动物实验如果选用家兔时,在接种前数日,应每天以0.2～0.5％煌绿溶液2～3滴,滴注于鼻腔内,经18～24小时后检查,有化脓性鼻炎者为阳性,此种家兔不宜作实验感染用。但是我们依照上述规定进行试验时,却发现可以引起家兔大批死亡。为了查明原因,笔者以各种浓度的煌绿溶液进行多次反复试验。现将结果报告如下。     

对《煌绿激发试验引起死亡初报》一文的不同看法

兔巴氏杆菌病(Pasteurellosis cuniculum)又称兔出血性败血症或兔传染性鼻炎,其病原体为多杀性巴氏杆菌,通常存在于健康兔的上呼吸道及消化道内。当家兔抵抗力强,外界环境良好时,不易致病。当外界环境恶劣,饲养管理不良,家兔体质差,抵抗力减弱时,此菌乘机活动,引起发病。统计资料表明,该病是引起9周龄至6月龄的兔死亡的最主要原因。为了预防和治疗目的,必需做出生前或病前诊断。煌绿滴鼻试验是多种:日刊介绍的诊断兔巴氏杆菌病的一种方法。《中国兽医科技》(原《兽医科技杂志》)1982年第11期刊登宋兆敏的《煌绿激发试验引起死亡初报》(以下简称《初报》)的文章,对煌绿滴鼻进行了否定,使兽医临床莫衷一是,不知其可。工作的需要,要求我们做兔巴氏杆菌病生前诊断、病前诊断、所以对《初报》进行了研究、推敲,认为其所谓“假阳性”理由不能成立,致死滴鼻兔不能排除药物以外的     

针刺大脉穴结合中西药物治疗水牛水肿型巴氏杆菌病的疗效观察

牛水肿型巴氏杆菌病,发病快,病势猛,死亡率高。1975年秋冬季,荣昌地区陆续发生巴氏杆菌病,在水牛中大多为水肿型。经有关单位协同进行实验室诊断,为毒力较强的Fg型巴氏杆菌引起。鉴于过去对水肿型巴氏杆菌病单纯采用药物治疗,效果差,死亡率很高,因而改用中兽医针刺大脉穴,结合中西药物治疗的方法,先后在荣昌     

鉴别家兔多杀性巴氏杆菌与支气管败血波氏菌的双重TaqMan qPCR方法的建立

为提高家兔呼吸道疫病主要细菌性病原检测的可靠性和标准化,根据GenBank中多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida) Kmt基因与支气管败血波氏菌(Bordetella bronchiseptica) Fla基因分别设计特异性引物和探针,对反应条件进行优化,建立兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏菌双重TaqMan qPCR方法,并初步用于检测家兔肺脏及鼻拭子临床样本。结果显示,该方法建立的标准曲线在标准品浓度为2.35×10~6～2.35 copies/μL时有良好的线性关系;与绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌无交叉反应;最低检测限均为2.35 copies/μL;批内、批间重复性检验变异系数均小于2%。检测70份临床样本DNA结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为50.0%,支气管败血波氏菌阳性率为42.9%,混合感染率为21.4%,该方法与细菌分离培养和常规PCR符合率分别为80.0%、 92.0%。以上数据表明,本研究建立的双重TaqMan qPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,无需病原菌的培养即可用于临床样品的快速检测,为兔多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏菌的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、高效、准确的检测方法。     

牦牛爆发巴氏杆菌病的诊治

牦牛爆发巴氏杆菌病的诊治朱中武（西藏山南地区农牧局８５６０００）列确（西藏自治区畜牧兽医技术服务中心牛巴氏杆菌病又名牛出血性败血病，是牛的一种急性传染病，以高热、肺炎、急性胃肠炎以及内脏广泛性出血为特征。牦牛巴氏杆菌病临床上主要表现为败血型和浮肿型两...     

28株禽源多杀性巴氏杆菌热浸抗原的分型研究

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是禽出血性败血症(即禽霍乱)的病原体,其抗原结构甚为复杂。中国兽药监察所以及河北、四川、吉林、广东等地对我国禽源多杀性巴氏杆菌的K、O抗原进行了大量的分析研究,确认我国各地绝大多数的禽源多杀性巴氏杆菌的O抗原为5,K抗原为A,( 5:A),但利用琼脂扩散法(Agar diffusion method)鉴定禽源多杀性巴氏杆菌的热浸抗原的分析研究,报道较少。我们参考Heddleston的研究方法,对28株禽源多杀性巴氏杆菌进行了琼扩分型鉴定,以了解我国禽源多杀性巴氏杆菌的血清型,为进一步研究各种分型方法的关系以及为研制理想的禽霍乱菌苗提供理论根据。     

磺胺嘧啶在兔体内代谢动力学的研究

磺胺嘧啶(SD)属于抗菌力强,抗菌谱较广的中效抗菌药物(在人),近年来有用SD同抗菌增效剂TAP预防和治疗兔的巴氏杆菌病和球虫病,取得一定效果。关于SD在牛、猪、鸡体内代谢动力学有报道。该药在家兔体内代谢动力学的研究,国内外尚未见报道,本试验研究了SD在家兔体内的代谢动力学,为临床应用提供参考。     

猪源多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

2014年3月至2015年2月从来源于全国15个省份的180份临床猪肺组织样品中共分离到71株多杀性巴氏杆菌,分离率为39.4%。利用PCR技术对所分离的多杀性巴氏杆菌进行荚膜血清型鉴定,其中A型菌株41株(占57.8%),D型菌株27株(占38.0%),F型菌株3株(占4.2%),71株多杀性巴氏杆菌中包括1株D型产毒素多杀性巴氏杆菌(占1.4%),说明当前在我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌主要为A型和D型菌株。应用PCR检测多杀性巴氏杆菌23种毒力基因,结果显示:多杀性巴氏杆菌毒力基因的数量大多分布在15~19之间,平均携带个数为17.5个;23种毒力基因中,ptfA,fimA,hsf-2,sodA,sodC,ompA,ompH,oma87,plpB,exbB,tonB,Fur,hgbB的检出率在90%以上,而toxA基因的检出率极低(1.4%),并且在猪源多杀性巴氏杆菌中未检测到t bpA的存在;分析毒力基因在不同血清型菌株中的携带及分布情况发现,A型的平均毒力基因携带数为18.2个,D型为16.4个;不同毒力基因在不同血清型的多杀性巴氏杆菌中的分布也存在一定的差异,其中唾液酸代谢酶基因nanB、透明质酸酶基因pmHAS及黏附基因tadD和pfhA在A型多杀性巴氏杆菌中的检出率高于其在D型多杀性巴氏杆菌中的检出率(P0.01);而黏附基因hsf-1在D型多杀性巴氏杆菌的检出率显著高于其在A型多杀性巴氏杆菌中的检出率(P0.01)。对所分离菌株的16SrRNA基因进行测序,并与NCBI上公布的10株多杀性巴氏杆菌16S rRNA基因进行进化树分析,结果显示:71株多杀性巴氏杆菌主要分为2个亚群,亚群Ⅰ和HB03及3480的亲缘关系较近,而亚群Ⅱ则与HN06、Pm70、36950等菌株的亲缘关系较近;遗传进化的结果说明,多杀性巴氏杆菌的亲缘关系与其来源、血清型及其导致的疾病种类并没有表现出特定的亲缘关系。     

血液直接培养快速诊断兔巴氏杆菌病

(一)材料和方法 1.试验菌株:采用3株多杀性巴氏杆菌,C48—1菌株由中国兽药监察所提供,C8709(猪源)和Y8608(鸭源)菌株均系我们从自然病例分离的地方菌株,菌落荧光型,前者为Fg型,后者为FO型。 2.试验兔:系未注射过巴氏杆菌疫苗的健康家兔,体重1.5kg左右,试验前煌绿滴鼻呈阴性反应。 3.采血瓶;洁净青霉素瓶内装4～5个玻珠(直径约0.5cm),加塞后用胶布牢固固定,高压灭菌备用。     

巴氏杆菌人工接种感染试验

多杀性巴氏杆菌(以下简称巴氏杆菌)是畜禽巴氏杆菌病的病原菌。其分布遍及世界各地,常常引起畜禽巴氏杆菌病的发生和流行,造成畜牧业生产的很大损失。其所致的巴氏杆菌病是畜禽的一种重要传染病。巴氏杆菌取何种途径、在什么样的情况下引起发病,长期以来有两种说法:一是内源性感染,认为巴氏杆菌正常存在于动物体内,特别是呼吸道内,当遇到某些应激因素的影响,抵抗力降低时,就可侵入体内引起发病。另一种说法则     

多杀性巴氏杆菌选择培养基的研究和制备

在作者进行畜禽多杀性巴氏杆菌(以下简称巴氏杆菌)带菌情况的研究中,开始参考了一些资料,以消毒棉签采样,在普通血平板上进行划线培养,然而挑取疑似菌落进行鉴定,反复进行了许多次,都未获成功。后来参考了Morris的选择培养基的资料,从一些抗菌药物中进行筛选,结果以几种抗菌药物的适当配合加入马丁琼脂基础培养基中,制成了巴氏杆菌选择培养基,用以检查动物上呼吸道和扁桃体携带的巴氏杆菌,取得满意的结果。研究制     

海狸鼠巴氏杆菌病的诊治

海狸鼠巴氏杆菌病的诊治毛万俊（河北省滦平县畜牧局０６８２５０）（一）发病情况海狸鼠对巴氏杆菌较为敏感。通过对滦平镇２个养殖场，８个饲养专业户的调查统计，１９９２年饲养成年及育成海狸鼠５４８只，患巴氏杆菌病病鼠５７只，死亡４１只，发病率１０．４％，死亡...     

奶山羊巴氏杆菌病的诊断和治疗

奶山羊巴氏杆菌病的诊断和治疗卢荣华（甘肃省天水市畜牧兽医工作站７４１０００）甘肃省天水市曾在１９６３年从外地引进奶山羊３０只，在火车运输途中发病死亡４只，根据临床症状、剖检变化及细菌学检查，确诊为巴氏杆菌病。近年来我市奶山羊未发生过该病。１９９６年５...     

兔瘟巴氏杆菌魏氏梭菌三联灭活苗的研制与应用

用人工感染兔瘟病兔的肝、脾、肾及从患急性巴氏杆菌病和魏氏梭菌性肠炎病兔分离的细菌制成氢氧化铝甲醛灭活苗（兔三联苗）。试验兔于免疫后７、５０、１００和１８０天时均能抵抗致死量兔瘟强毒的攻击；在免疫后２０天时全部能抵抗１０个最小致死量的兔巴氏杆菌培养物的攻击，经７５天保护率也为１００％；免疫后４５天用魏氏梭菌培养物攻击，其保护率为１００％；免疫后１２０天分别用兔巴氏杆菌与魏氏枝苗培养物攻击，其保护率均为７５％。该疾苗有效保存期为４～６℃１０个月，１０～１５℃６个月，１８～２５℃３个月。在流行兔瘟、已氏杆菌病、魏氏梭菌病的兔场试用该疫苗免疫家兔，在免疫后７天至８个月内能有效地预防这几种传染病。     

牛喘病病原菌的探讨

1951年始,广西、广东、河南等省先后发生黄牛的一种疾病。临床症状以喘气为特征,故名牛喘病。那时,在河南,曾有人认为是黄牛放牧麦苗引起的。此后,又有两种意见,一是巴氏杆菌,二是黑斑病甘薯中毒。1953年,笔者在河南开封对本病的病原菌进行了研究,用所分离到的菌株作了家兔和小牛犊的致病力测试,取得了比较满意的结果。于是,上报中央。1955年,由中央农业部组织和主持在中央兽医生物药品监察所进行黄牛的人工发病试     

家兔巴氏杆菌病免疫的研究——PC弱毒株冻干菌田间免疫试验

用巴氏杆菌PC弱毒株试制的冻干菌苗(以下简称PC冻干苗)已对家兔进行了安全性、免疫原性、稳定性、效力及免疫期等一系列试验获得了比较满意的结果,在此基础上又进行了田间免疫试验,现将试验结果报告于下: 试验材料 (一)试验动物 ①兔:实验室用的肉兔有成、年青紫蓝兔、日本大耳兔、中国本兔;     

多重PCR在多杀性巴氏杆菌荚膜定群中的应用

为了修订行业标准《猪巴氏杆菌病诊断技术》(NY/T 564-2002),改进多杀性巴氏杆菌荚膜定群方法,制备了多杀性巴氏杆菌分群抗血清,并建立了多重PCR,对53株菌同时用血凝方法及多重PCR进行定群。经正向间接血凝试验测定,制备的各型血清仅与对应型抗原发生凝集反应,表明血清具有较高的特异性,可作为多杀性巴氏杆菌的荚膜定群抗血清。53株多杀性巴氏杆菌均扩增出了相应的预期片段,PCR结果与Carter氏间接血细胞凝集试验结果相一致。结果表明,可将多重PCR增添至行业标准中,用其代替原有血清学方法进行多杀性巴氏杆菌荚膜定群。     

乳牛巴氏杆菌病二例

某奶牛场于1980年9月份连续发生二例乳牛巴氏杆菌病。一例成年牛7105号,一例青年牛B146号,两头牛发病间隔三日,临床症状相同。通过采颈静脉血,涂片镜检,确诊为乳牛巴氏杆菌病。该病在临床上比较少见,现报道如下,供同行们参考。