鸡β-防御素13对尼罗罗非鱼生长和疾病抗性的影响

为探讨禽类β-防御素13(gallinaein-13,Gal-13)作为鱼用抗生素替代品的可能性,将150尾同塘同规格尼罗罗非鱼鱼种随机等分为2组:对照组喂商品罗非鱼饵料;Gal-13组在该饵料中添加100 mg/kg的Gal-13.通过观测试验鱼的生长表现及其对凡隆气单胞菌BJCP-9株的抵抗力和黏附能力,并采用cellELISA法体外测试Gal-13对BJCP-9黏附罗非鱼肠上皮的影响.结果显示,罗非鱼饲料中添加100 mg/kgGal-13可显著提高其生长表现和抗BJCP-9感染能力(P＜0.05);100μg/mL的Gal-13并不能抑制BJCP-9生长,但能在体内外抑制BJCP-9时罗非鱼肠道上皮细胞的黏附.离体模拟黏附试验表明,Gal-13在25和2.5/μg/mL的低浓度下有抗黏附作用(P＜0.05),提示Gal-13的抗黏附作用可能是其促进动物生长和提高罗非鱼抗凡隆气单胞菌感染的机制之一,这种抗黏附作用同离子桥和/或配体一受体连接有关,同疏水性无关.     

抗鱼类致病性嗜麦芽寡养单胞菌单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

以福尔马林灭活的嗜麦芽寡养单胞菌免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备针对鱼类致病性嗜麦芽寡养单胞菌的单克隆抗体(McAb),用软琼脂法进行克隆化培养,通过间接ELISA法对所得的杂交瘤细胞株进行特异性筛选,并鉴定其Ig亚类,测定腹水效价,进行了相对亲和力和抗原位点等生物学特性分析。结果显示,获得了8株可分泌特异性McAb的杂交瘤细胞,分别命名为1C3、1C6、4H8、3D9、2B11、3G3、2H11、1B8。经过鉴定,这8株McAb能够特异性地针对嗜麦芽寡养单胞菌,与其他测试菌之间无交叉反应;其抗体主要分为4个亚类,分别为IgG2a型、IgG2b型、IgG3型和IgM型;腹水效价均在10-6以上;相对亲和力较高;2B11针对的嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖表位,而其余7株McAb针对的非脂多糖抗原位点。试验结果证实成功制备了能稳定分泌抗嗜麦芽寡养单胞菌McAb的细胞株,为水产养殖中该菌的快速检测和免疫学研究奠定了基础。     

罗非鱼源无乳链球菌双重PCR快速检测方法的建立

根据GenBank中罗非鱼源无乳链球菌荚膜多糖的cpsF基因和CAMP因子的cfb基因序列,设计2对特异性引物,通过对反应体系和反应条件优化,并进行特异性试验、敏感性试验及人工感染罗非鱼组织样品检测,建立了快速检测无乳链球菌的双重PCR方法。结果显示,仅无乳链球菌能扩增出cpsF和cfb两条特异性条带,而海豚链球菌、金黄色葡萄球菌、鮰爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌无条带检出;经敏感性试验,最小模板检出量为7.632×10-2ng/μL;同时对30尾人工感染无乳链球菌的罗非鱼肝和肾组织中细菌DNA进行双重PCR检测和细菌分离鉴定,检出的阳性结果一致。证实,所建立的方法具有快速、特异、灵敏的优点,适用于对罗非鱼等无乳链球菌的感染病例进行流行病学监测。     

罗非鱼出血病病原鉴定及疫苗的研究

从患出血病罗非鱼的血液、肝、脾分离出嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),经动物回归和理化试验鉴定,确诊嗜水气单胞菌为罗非鱼出血病病原;用分离菌制成的饵料吸附型疫苗进行田间试验,免疫组罗非鱼保护率为87.1%,未免疫组存活率为59.9%,两组间差异极显著(P＜0.01).     

罗非鱼源无乳链球菌灭活疫苗免疫效果的研究

将罗非鱼源无乳链球菌GD201008-001连续传50代,用API20 Strep生化鉴定试剂条和全自动生化分析仪对其各代次进行比较鉴定;将灭活疫苗以5×10~8CF U/尾分别肌肉注射和腹腔注射30 g±5 g的罗非鱼,第3次免疫后第14天,以50倍LD_(50)对其攻毒,记录死亡情况;在免疫后不同时间里用试剂盒检测罗非鱼肝的各个酶活指标,用RT-PCR检测头肾中IL-1β的表达量,分析其免疫保护效果。结果显示,GD201008-001各代次间生化特性稳定;肌肉注射免疫组和腹腔注射免疫组的免疫保护率分别为83.97%和93.33%,免疫前后多数酶活指标并没有显著差异(P0.05),第3次免疫后第14天IL-1β的表达量均显著高于第1次免疫后第14天的数值,且肌肉注射方式显著高于腹腔注射(P0.05),肌肉注射组超氧化物歧化酶活力、溶菌酶活力、总抗氧化能力、过氧化氢酶活力均略低于腹腔注射组,而丙二醛及IL-1β表达量则相反。结果表明,该无乳链球菌灭活疫苗对罗非鱼具有很好的免疫保护性,可以作为预防无乳链球菌感染的候选疫苗。     

嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶对斑点叉尾鮰的组织病理学影响

采用硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A50凝胶层析等方法从嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物中提纯了一种蛋白酶,将提纯的蛋白酶腹腔注射斑点叉尾鮰,研究了嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶对斑点叉尾鮰的致病性以及引起的病理变化。结果发现,斑点叉尾鮰出现不同程度的死亡,其LD50为3.49μg/g。病鱼鳃丝肿胀;肝及肾肿大,质地脆,有大小不等的坏死区;脾肿大出血。组织学观察可见肝细胞肿胀,严重者空泡变性,大量细胞坏死、溶解消失;肾小管上皮细胞严重空泡变性,细胞淡染,逐渐溶解、消失,隐约可见细胞轮廓;脾严重出血,网状内皮细胞坏死;胃肠黏膜下层炎性水肿。超微病理学观察发现肝细胞糖原颗粒减少,细胞核染色质溶解,线粒体肿胀,线粒体嵴模糊不清;脾大量红细胞浸润,网状内皮细胞核染色质大量消失;肾小管上皮细胞刷状缘微绒毛肿胀,脱落;细胞核染色质减少,边移,核膜扩张;线粒体肿胀,滑面内质网扩张。扫描电镜观察发现胃肠道黏膜上皮细胞肿胀、坏死、脱落。证实,嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶可致斑点叉尾鮰各组织器官出现不同程度的病理变化,特别是对肝、脾、肾、脑和胃肠道的影响较大。     

金鸡散对种鸡生产性能的影响

取37周龄父母代AA种鸡880只(母鸡800只,公鸡80只)随机分成4组,研究中草药制剂金鸡散对种鸡生产性能的影响.在用药前及用药后1-4周,统计各组产蛋率、蛋重、蛋形指数及受精率、孵化率和健雏率.结果采用金鸡散按高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)3个剂量拌料,连用5 d,对蛋重、蛋形指数均无不良影响,同时可显著提高种鸡产蛋性能及蛋孵化性能,在3个剂量组中,以中剂量组应用效果最为明显,同对照组相比可提高产蛋率6.2个百分点,孵化率及健雏率亦显著提高(P＜0.05).     

母鼠妊娠期铅镉联合暴露对仔鼠脑组织的氧化损伤及乙酰半胱氨酸的保护效应

45只怀孕SD母鼠被随机分为9组,即A组(对照组,饮用蒸馏水)、B组(铅组,300 mg/L)、C组[铅 N-乙酰半胱氨酸(N-NAC)组,300 mg/L 20 mmol/L]、D组(镉组,10 mg/L)、E组(镉 NAC组,10mg/L 20 mmol/L)、F组(低剂量铅镉联合组,150 mg/L 5 mg/L)、G组(低剂量铅镉联合 NAC组,150mg/L 5 mg/L 20 mmol/L)、H组(高剂量铅镉联合组,300 mg/L 10 mg/L)、Ⅰ组(高剂量铅镉联合 NAC组,300 mg/L 10 mg/L 20 mmol/L).采用饮水染毒,染毒时间为21 d,分娩后每窝随机选取6只乳鼠测定脑匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱酯酶(TChE)活性和丙二醛(MDA)的含量.结果表明,低剂量铅镉联合作用具有中间效应(介于铅、镉单独毒性作用之间),而高剂量铅镉联合作用表现协同或叠加效应.NAC拮抗组与染毒组比较,MDA含量显著降低,SOD、GSH-Px、TChE、CAT活性有升高趋势,说明NAC可以提高大鼠的抗氧化能力,对母鼠铅镉暴露所致新生鼠脑脂质过氧化损伤有一定的保护作用.     

高铜对雏鸭肝羟自由基和一氧化氮产生的影响

为观察日粮铜水平对雏鸭肝羟自由基和一氧化氮(NO)产生的影响,360只1日龄天府肉鸭被随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜V组)6周.与对照组比较,高铜Ⅲ组、Ⅳ组和V组肝羟自由基含量和NO含量显著升高(P<0.05或P<0.01),同时肝铜锌超氧化物歧化酶和一氧化氮合成酶(NOS)活性降低(P<0.05或P<0.01).结果表明,日粮铜水平达400～800 mg/kg时肝羟自由基和N0产生增加,抗氧化功能降低,肝功能受损.     

扎鲁司特对低温诱发肺动脉高压肉鸡右心功能的影响

将 6 0只雄性艾维茵商品代肉鸡常规育雏免疫 ,17日龄时随机分为 3组 :常温对照组 (常温组 )、低温模型组 (低温组 )和低温扎鲁司特组 (扎鲁司特组 )。各组于处理后第 14d(31日龄 )和第 2 1d(38日龄 )分别用右心导管法测定右心室压、右心室内压最大变化速率 (±dp/dtmax)和腹水心脏指数 (AHI)。结果 ,31日龄时 ,扎鲁司特组右心室收缩压显著 (P <0 .0 5 )或极显著 (P <0 .0 1)高于低温组和常温组 ,但右心室舒张压无显著变化 ;其±dp/dtmax显著高于低温组 (P <0 .0 5 ) ;其AHI也显著高于常温组和低温组 (P <0 .0 5 )。 38日龄时 ,扎鲁司特组右心室收缩压显著低于低温组 (P <0 .0 5 ) ,但其右心室舒张压显著高于常温组 ,低温组与常温组无显著性差异 ;其±dp/dtmax显著降低 (P <0 .0 5 ) ;此时 ,其AHI仍最高 ,显著高于常温组 ,而低温组与常温组无显著性差异。表明 ,长期应用扎鲁司特可使肺动脉高压肉鸡右心功能降低 ,促使肉鸡低温诱发肺动脉高压的发生     

双乙酸钠对鸡血液生理生化指标的影响

将 15只临床健康、日龄相同的岭南黄公鸡随机分为 3组 ,每组 5只 ,并分别饲喂不加双乙酸钠的基础日粮、含双乙酸钠 2 g/kg和 4 g/kg的日粮 ,饲喂 2 1d。饲喂结束后 ,颈静脉放血采集血样 ,测定血清中 13项生理生化指标。结果表明 ,试验鸡与对照鸡的生理生化指标大多无显著差异 ,表明饲料中添加 4 g/kg以下的双乙酸钠对鸡机体的多数内脏器官无损伤     

干奶期不同能量摄入对围产期乳牛血液葡萄糖胰高血糖素和胰岛素浓度的影响

将围产期健康乳牛30头随机分为3组,分别于产前第28 d开始饲喂标准日粮(能量摄入100％组)、标准日粮增加20％的日粮(能量摄入120％组)和标准日粮减少20％的日粮(能量摄入80％组),产后各组乳牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后第56 d结束,观察干奶期不同能量摄入水平对围产期健康乳牛血液葡萄糖、胰高血糖素和胰岛素浓度的影响。结果表明,产前低能饲喂可以增加围产期乳牛血浆葡萄糖浓度,干奶期不同能量摄入水平对围产期健康乳牛血液葡萄糖、胰高血糖素和胰岛素浓度起重要调节作用。     

中草药添加剂对肉鸡胆固醇代谢的影响

将 6 0只艾维茵肉鸡随机分为A、B、C、D共 4组 ,A为对照组 ;B、C、D均为试验组 ,分别用含 2 0、30、4 0 g/kg中草药添加剂的饲料进行 4周饲喂试验。结果表明 ,试验组鸡血清胆固醇、低密度脂蛋白和肌肉中胆固醇水平均低于对照组 ,其中C和D组与对照组差异显著 (P <0 .0 5 ) ;血清中高密度脂蛋白含量与对照组差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;另外 ,试验组增重略高于对照组 ,而料肉比低于对照组。试验结果说明 ,该中草药添加剂具有下调鸡肉胆固醇含量和改善肉鸡生产性能的作用 ;在饲料中的添加量以 30g/kg为宜。     

摄入不同能量的围产期乳牛肝低密度脂蛋白受体 mRNA丰度的比较

将30头健康、经产、处于围产期的黑白花乳牛随机分为3组,每组10头。从产前28 d开始,低能量组乳牛饲喂《中国奶牛饲养标准(2000)》减少20%日粮(能量摄入80%),对照组乳牛饲喂《标准》日粮(能量摄入100%),高能量组乳牛饲喂《标准》增加20%日粮(能量摄入120%),产后各组乳牛均饲喂标准日粮,至产后第56 d结束试验;采用内对照RT-PCR方法检测摄入不同能量的围产期乳牛肝活体组织低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA丰度。结果,不同能量组乳牛肝LDLR mRNA丰度产前至产后均呈现先升高后降低的趋势,100%和120%能量组肝LDLRmRNA丰度在产后14 d达最大值,且产后均高于产前(产后56 d除外,P<0.01或P<0.05);而80%能量组产后1 d即达到最大值,产前14 d至产后14 d,LDLR mRNA相对表达量显著高于100%和120%能量组;产后28~56 d,120%能量组显著高于80%和100%能量组(P<0.01)。表明围产期乳牛能量摄入水平对肝LDLR mRNA丰度有显著影响。     

高锌对天府肉鹅免疫功能的影响

将1日龄天府肉鹅健雏200只随机分为A、B、C、D共4组,A组作为对照组仅喂基础日粮(Zn100mg/kg),B、C、D组分别饲喂基础日粮 Zn900mg/kg、基础日粮 Zn1400mg/kg和基础日粮 Zn1900mg/kg,试验期7周,以研究高剂量锌对雏鹅免疫功能的影响。结果,与对照组相比,高锌的B、C和D组雏鹅淋巴器官发育受阻,胸腺、腔上囊和脾的器官生长指数程度不同地降低;胸腺、腔上囊和脾淋巴细胞数量减少、变性、坏死;淋巴细胞分裂增殖受抑,胸腺、腔上囊、脾和外周血淋巴细胞分裂指数程度不同地降低。结果表明,日粮高锌可致雏鹅免疫功能受损。     

补铬对热应激蛋鸡甲状腺组织结构的影响

选择处于热应激条件下的 192只 35周龄新罗曼褐壳蛋鸡 ,随机分为 6组 ,分别饲喂添加 0、10、2 0、30、4 0、5 0mg/kg葡萄糖耐量因子 (GTF)的玉米 豆粕型基础日粮 5 2d ,试验结束时随机抽取试验鸡 36只 (每组 6只 ) ,取甲状腺称重并制作切片 ,观察有机铬对热应激蛋鸡甲状腺组织结构的影响。结果 ,试验组鸡甲状腺重量较对照组略有增加 ,滤泡上皮增高 ,细胞增殖 ,出现皱褶 ,表明补铬使热应激蛋鸡甲状腺组织结构呈功能旺盛状态。提示 :高温下给蛋鸡补铬的同时要适当补碘 ,以防因碘不足而引起甲状腺肿。     

蜂花粉对肉鸡小肠发育的影响

将144只1日龄AA肉鸡随机分为2组,每组72只,日粮中分别添加0(对照组)和15g/kg(试验组)的蜂花粉,每周每组随机抽取试验鸡6只,剖取十二指肠、空肠、回肠,测量肠管长度及肠绒毛、肠腺长度,并制作石蜡切片,进行组织学观察,研究了日粮中添加蜂花粉对肉鸡小肠发育的影响。结果显示,试验组1～3周龄鸡的小肠绒毛和肠腺的长度显著或极显著高于对照组,肠道淋巴组织较发达,证实蜂花粉能够促进肉鸡小肠的早期发育,增强组织免疫功能。     

共轭亚油酸对缺氧大鼠一氧化氮合成酶和血红素氧合酶活性的影响

为了探讨共轭亚油酸 (CLA)对缺氧大鼠一氧化氮合成酶 (NOS)和血红素氧合酶 (HO)活性的影响 ,将 4 0只SD大鼠随机分为 4个组 :10g/LCLA组、10g/LCLA缺氧组、空白对照组和空白缺氧组。CLA组和空白对照组每日分别按 2 0mL/kg剂量灌服 ,10g/LCLA和蒸馏水连续灌胃 30d。灌胃结束后 ,将 10g/LCLA缺氧组和空白缺氧组大鼠置于人工模拟缺氧装置 (相当于海拔 5 0 0 0m处空气中的含氧量 )内 ,每日 8h ,连续缺氧 15d。然后测定各组大鼠血清NOS活性和NO含量以及大鼠心和肺中HO的活性。结果 ,在人工模拟缺氧条件下 ,与空白缺氧组大鼠相比 ,10g/LCLA能显著提高血清NOS活性和NO含量 ,降低心和肺中HO的活性 (P <0 .0 5 )。     

钒对肉鸡免疫器官发育的影响

取1日龄AA肉仔鸡144只,随机分为对照组和试验组,在试验组鸡的基础日粮中按0、30 mg／kg添加钒。试验期共42 d,每周末从每组取鸡6只,称重后扑杀,取胸腺、腔上囊和脾称重, Bouin液固定,制作石蜡切片,观察、摄像,研究钒对肉鸡胸腺、腔上囊和脾等免疫器官质量、器官指数和组织结构发育的影响。结果显示,试验组鸡的胸腺、腔上囊和脾平均质量和器官指数显著或极显著高于同日龄对照组(P<0．05或P<0．01);试验组鸡的胸腺小叶皮质增厚,胸腺小体增多;腔上囊皱襞发达,腔上囊淋巴滤泡体积较大、皮质较厚、退化延缓;脾小结体积较大、生发中心明显,动脉周围淋巴鞘增厚,椭球增大。结果表明,在肉雏鸡的日粮中添加钒30 mg／kg,可促进胸腺、腔上囊和脾的发育,延缓腔上囊的退化。     

中草药复合添加剂对虹鳟鱼增重及肝功能和结构的影响

为观察中草药复合添加剂富康163对虹鳟鱼生长性能、肝功能和结构的影响,选择18月龄的虹鳟鱼400尾,随机将其分为4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别在基础日粮中添加30、50和70g/kg富康163,试验期60d。结果显示:饲料中添加不同水平的富康163能提高增重率,并可不同程度地降低饲料系数;与对照组相比,试验组血清腺苷脱氨酶(ADA)活性、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性、胆碱酯酶(CHE)活性、总胆红素(TBiL)浓度和肝指数无明显变化(P>0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组肝细胞界限清楚,核圆而大,核膜清晰,胞质丰富,而Ⅳ组有的肝细胞间分界不明显、胞内空泡化。结果表明,虹鳟鱼饲料中添加富康163能促进鱼体生长,提高营养物质利用率,对鱼肝的功能和结构无显著影响,建议虹鳟鱼饲料中富康163的添加剂量以50g/kg为宜。