Asia 1型口蹄疫病毒多表位基因的原核表达及ELISA 检测方法的建立

根据国内流行的Asia 1型口蹄疫病毒的基因组特性,合成了Asia 1型口蹄疫病毒2个流行毒株VP1基因的5个抗原表位,并将其克隆到pMDl8-T载体上,再按设计的酶切位点连接,构建出Asia 1型口蹄疫病毒VP1双拷贝基因片段(VPlAsia).然后,将VP1Asia基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,构建了重组表达质粒pET-28a-VPlAsia,接着将其转入BL21茵中进行原核表达.以纯化的表达蛋白作为抗原检测了牛Asia 1型口蹄疫病毒阳性血清.结果显示,VPIAsia基因在大肠杆菌中获得了高效表达,以纯化的VPIAsia蛋白作为抗原建立了检测Asia 1型口蹄疫病毒抗体的ELISA方法.以建立的ELISA方法和标准Asia 1型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒对30份临床样品进行了检测,两种检测方法的阳性率分别为90.0% (27/30)和93.3%(28/30),符合率为89.7%(26/29).本研究为组装Asia 1型口蹄疫病毒抗体ELISA诊断试剂盒奠定了基础.     

Asia 1 型口蹄疫病毒多表位基因的设计及其在毕赤酵母中的表达

为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)特异性诊断抗原,根据国内Asia 1型FMDV流行毒株的序列,合成了2个FMDV流行毒株VPl基因的5个抗原表位.采用Insight Ⅱ软件进行蛋白空间构象模拟,证实设计的多表位分子结构符合要求.将合成的多表位基因按设计的酶切位点进行酶切连接,构建了Asia 1型FMDV VP1双拷贝基因重组质粒(pMD18-dVP1Asia).从该重组质粒获得dVP1Asia基因,与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-dVP1Asia.用BglⅡ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌.经筛选、鉴定,成功获得了表达FMDV多表位VP1蛋白的阳性重组酵母茵.该阳性重组酵母茵经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白.Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别Asia 1型FMDV抗体,且具有很好的反应原性.     

养在深闺人未识

我时常想，我该如何去形容拜县这个地方。恬静、安宁、养在深闺，就如同一位俏丽多娇的小家碧玉，端坐于烟雾袅袅之处，仅等人去揭开她神秘的面纱。     

古泗水 今何在

水是生命之源,人类文明总是伴随着水的兴衰变迁而跌宕起伏。宿迁自古就是水乡泽国。泗水则是流经宿迁大地最为古老、流域最广,对宿迁历史文明发展有着十分重要影响的一条天然河流。古泗源流古泗水,是一条古老、独特、历史厚重的河流,《尚书·禹贡》《山海经》《史记》《水经注》等中均有记载,是古代"四渎八流"中的"八流"之一,也是传说中"禹治九水"之一。     

论科学社会主义与民主社会主义的本质区别

科学社会主义是关于社会主义的科学的理论体系、理论模型与实践模式。科学社会主义是人类一切文明成果的结晶。民主社会主义是一种主张在民主体制里进行社会主义运动的政治意识形态。是社会民主党所宣扬的一种部分类似资产阶级民主制度的理论体系。可见,民主社会主义的理论概念与科学社会主义的理论概念有着本质上的区别,二者必然会朝着不同的方向发展。     

囧的正是时候

1在看《港囧》之前,正被萧亚轩刷屏,当年的天后营预备人选,现在热衷于在地县乡村的简陋舞台上演出,去年凭着65场商演,成为台湾艺人收入榜季军,仅次于周杰伦和王力宏。今年,她依然奔忙在各地演出的路上,她的粉丝列出了她9月份的行程表,演出因     

路不远,就在前方

关键词当心背离了世界,那么普世的价值便会变得一文不值。闭上双眼,不去看这世界的来来往往;堵塞双耳,不去听这世界的是是非非。即便是绚丽多彩又于我何干,我不曾迷恋一丝的喧闹浮华,也不曾追逐片刻的奢美惊艳,一个人的脚步始终走在自我沉沦的路上,不是来时。沉醉在四周的黑寂之中,听着窗外风声的躁动,我屏住呼吸,试图不去惊扰它们的私语。将自己陷入黑     

电子政务与民众关系管理

在现代信息技术推动下的政府管理出现了各种创新,其中民众关系管理是建立在客户关系管理与行政管理基础之上的一种新颖行政管理模式.政府利用民众关系管理可以有效地区分不同的服务对象,为不同的服务对象提供及时的、有针对性的服务,以实现发展经济、稳定社会的政府职能.     

国家战略新落点

一家著名国际传媒新发布的“国家形象环球调查”指出,人们对“主要通过软实力与世界打交道的国家”倾向于给予正面评价英国《金融时报》2月20日发表一篇文章,题目是《确凿证据表明中国的“软实力”政策正在发挥作用》。作者吉迪恩·布拉赫曼说:随着中国谋求“和平崛起”,“软实力”最近在北京已经成了一种时尚观念。