Chelex-100法在腐败血痕DNA检验中的应用

因涉及一起凶杀案件 ,全省各地收集了共 4 0 0份犯罪嫌疑人的血样 ,由于种种原因未能及时送检DNA检验 ,送到本实验室时这批血样已经历时 3 - 4年之久 ,且由于办案单位未晾干就堆积在一个较为密闭的环境 ,因此检材降解较为严重 ,导致DNA检验难度明显增大 ,为能快速简便且有效地对该批犯罪嫌疑人的血样进行检验 ,笔者在方法上进行了一些尝试 ,结果显著提高了检验成功率。现将方法报告如下 :1　材料与方法1 1　实验材料4 0 0份腐败血痕检材来源如前所述 ,其载体主要是滤纸 ,部分是纱布。主要仪器设备与主要试剂见参考文献[1] 。1 2　实验…     

隐性血痕在命案现场中的运用

隐性血痕是命案现场存在的用肉眼或光学仪器无法发现的血迹。本文旨在通过实际案例,阐述隐性血痕的重要作用及发现方法。该方法简便快捷、灵敏度高,特别适合基层公安机关在命案现场勘验及分析中应用。     

显现黑色表面血痕的新方法

一、前言 目前,警方在现场勘查时,显现黑色物体表面血痕的方法缺乏可靠性和简易性。过去常采用发光试剂法,如使用匈牙利红、汞溴红和DFO(1,8-二氮芴-9酮)。这类方法存在两方面的问题:(1)需要替     

Dot—ELISA在用酶标单克隆抗体检验体液斑和血痕ABH血型物质中的应用研究

本文应用Dot-ELISA法用酶标单克隆抗体,直接检验出稀释5万倍的精斑、10万倍的唾液斑及阴道分泌物等体液斑和血痕中ABH物质,还可检验出1～17年的体液斑中ABH物质。全部操作在室温中进行,以肉眼观察颜色变化判断结果,试验周期30～60分钟,准确率100％,实验结果可长期保存。     

用双色荧光原位杂交技术鉴定血痕性别

目的 探讨荧光原位杂交技术在血痕性别鉴定中应用及其价值。方法对20例新鲜人血及20例1-2年人血痕的X、Y染色体采用双色荧光探针进行原位杂交分析。结果 人新鲜血,男性X、Y信号检出的完整率为98.8％,其中Y信号的检出率为100％,女性X、X信号检出的完整率为96.5％;1-2年人血痕,男性X、Y信号检出的完整率为88％,其中Y信号的检出率为90％,女性X、X信号检出的完整率为80％;40例血液(痕)性别检测的符合率为100％。结论双色荧光原位杂交技术可以鉴定血痕性别。     

UPLC-MS/MS法检测血痕中常见烟草、毒品和药物成分

目的建立UPLC-MS/MS测定血痕中尼古丁、可替宁、甲基苯丙胺、氯胺酮、吗啡、O6-单乙酰吗啡、地西泮、三唑仑、艾司唑仑、佐匹克隆和利血平的方法。方法以甲醇为提取液,采用基质提取溶液配制标准溶液制作定量曲线。采用超高效液相色谱柱对待测样品进行分离;以电喷雾离子源正离子（ESI＋）模式和多反应监测（MRM）模式进行质谱分析。优化实验条件,并进行方法学评价。结果选择UPLC HSS T3色谱柱,乙腈-5mmol/L甲酸铵＋0.1%（v/v）甲酸作为流动相,甲醇作为提取溶剂。11种检测物检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为0.04~2.82ng和0.13~7.64ng,1~500ng/mL范围内的线性关系良好。除利血平、吗啡外的检测物回收率为（53.8±5.3）%~（107.2±12.6）%。结论采用本文UPLC-MS/MS方法对血痕中11种常见烟草、毒品和药物成分进行检测,能够满足实际检案的要求,可在相关检验中选用。     

新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较

目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1～3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1．0mm纸片,分别用ONATyper^TM15Plus试剂盒、Goldeye^TM20A试剂盒和华夏。”试剂盒在标准条件（说明书条件）、优化条件1（标准条件＋1μLDMSO）和优化条件2（标准条件＋室温浸泡1h）扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均〉97．00％,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27．22％～31．67％,在优化条件2下,检验成功率相似（〉97．00％）,与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异（P〈0．01）。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。     

应用RNA分析技术推断现场血痕形成时间

目的检测血痕中β-actin mRNA和18S rRNA在人体死后8～15d期间的表达残留,为推断血痕形成时间寻找新的客观依据。方法在上述时段内每天抽提血痕总RNA,利用实时定量RT-PCR技术监测18S rRNA和β-actin mRNA的扩增状况并对产物进行定量分析,通过检测18S rRNA与β-actin mRNA含量在各个时间点的变化趋势来推测血痕形成时间。结果死后8～15 d时段内18S rRNA与β-actinmRNA量的比值呈明显升高趋势,显示出两种不同类型RNA降解的时间差异性。结论一定时段内18SrRNA与β-actin mRNA量的相对变化,可作为推测血痕形成时间的参考指标。     

北京地区人群血清型α2HS频率调查与血痕中α2HS的检测

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦和免疫固定技术,调查北京地区随机人群的α2HS糖蛋白(α2HS)的频率分布。在185名无亲缘关系的健康人中,发现3种常见表型,即α2HS1-1型(99人)、2-1型(74人)、2-2型12人。未发现稀有型。基因频率为:α2HS~1=0.7351,α2HS~2=0.6490。室温中保存6个月的血痕,可检出其α2HS表型。     

单克隆抗体斑点ELISA快速检测血痕ABO血型

本文利用酶标记单克隆抗A、抗B抗体进行直接斑点ELISA检测血痕ABO血型。此法可检测出含量相当于0.005μl的全血,整个实验过程仅需1.5小时。对48份血痕标本均能正确鉴定。与常规方法相比,具有快速、简便、灵敏等特点,有一定的实用价值。