杂合抗菌肽BM16的原核表达及其生物学活性分析

为了在在大肠杆菌中融合表达杂合抗菌肽BM16并研究其生物学活性,本试验利用生物信息学分析软件设计出1条杂合抗菌肽BM16,运用同源重组的方法构建重组表达质粒p ET-28a(+)-Ub-BM16,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,采用Ni2+亲和层析纯化获得目的蛋白。结果显示,表达出13.2 ku的Ub-BM16融合蛋白,经SUMO酶切后获得2.0 ku的目的蛋白,纯化后纯度大于95%,该多肽对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌等均有抑制作用。上述研究结果为开发新型抗菌肽提供了思路。     

兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompH2基因的克隆与原核表达

为克隆和表达兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompH2基因,并对其表达产物的反应原性进行研究,用设计的1对特异性引物对兔多杀性巴氏杆菌CVCC500株总DNA进行ompH2基因的PCR扩增。将PCR片段克隆至pMD18-T载体中,进行测序。随后,将该基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,将重组表达质粒pET30a(+)-ompH2转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导。测序分析证明,得到了1条大小为1 052bp的基因片段,与国内外报道的兔多杀性巴氏杆菌ompH2基因的核苷酸序列相似性达99%以上。重组表达质粒的酶切鉴定、PCR扩增和测序分析表明,重组表达载体构建成功。SDS-PAGE检测结果证实,该基因可以在大肠杆菌中表达,表达产物为分子质量约47ku的融合蛋白。Western-blot分析表明,表达的重组蛋白ompH2具有反应原性。为研究兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompH2的免疫学活性奠定了基础。     

司法地方化的难题及解决路径

司法权作为国家主权的一种,是我国规定的由专门机关行使的不受其他职能机关干涉的权力。但是在司法实践过程中司法权受到了严重的桎梏,司法地方化即是阻碍司法权行使的一个主要因素。去除司法地方化,应实现体制上的完善,加强思想宣传和文化教育,避免司法人员来源的地方化,并加强法官队伍的建设。     

论如何实现法律与道德的有机整合

法律与道德自古就是一对规范范畴,二者在调整社会秩序这一终极价值目标上的一致性,决定了二者各用所长,互为补充,互相促进,交相为用。且通过法治与德治的具体应用,论证得出二者整合的途径是法律规范的道德化与道德规范的法律化,沿此途径二者得以有效整合,发挥重要的现实意义。     

乐果亚急性暴露对大鼠胆碱酯酶浓度及细胞色素P450亚型表达量的影响

对6周龄雄性Wistar大鼠5次灌胃给予20%LD_(50)的乐果,观察给药后大鼠的毒性反应,每日测定实验鼠采食量、饮水量和体重。最后一次给药后第24 h,采用丁酰硫代胆碱法测定大鼠红细胞、血清和脑组织中的胆碱酯酶浓度,并采用定量RT-PCR法检测大鼠肝中细胞色素P450基因8个亚型的表达量。结果表明,大鼠用药后不同时间内出现了有机磷药物中毒的典型症状,其采食量、饮水量和体重明显下降,红细胞、血清和脑组织中胆碱酯酶浓度均明显低于对照组,肝细胞色素P450的8个亚型中CYP2B1/2的表达量明显高于对照组。     

经济工作要实事求是——1956年到1957年初反冒进的回顾与思考

历史的经验值得借鉴.重温1956年到1957年初反冒进的历程,总结历史留下的经验,对于建设有中国特色的社会主义,仍然有着重要的借鉴作用.一1956年初,由于三大改造进展得出人意料的迅速和顺利,国民经济的恢复工作也取得了重大进展.于是,各部门纷纷修改1955年夏天国务院在北戴河会议上所确定的、接近实际的各项经济指标,争相提出不切实际的高指标.中央各部召开的专业会议,把远景规划中八至十二年实现的任务,纷纷提前到三至五年内,甚至一两年内完成.唯恐本部门、本单位犯右倾保守的错误.当时,主持日常经济工作的周恩来、陈云、李先念等人发现了这个问题,及时提出要防止冒进,在一些会议上慎重要求干部不可盲目冒进.周总理强调:“经济工作要实事求是”,也就是“说真话;鼓真劲,做实事,收实效”,不要搞那些不     

浅论山西煤炭物流业的发展

发展山西煤炭物流业是实现山西由煤炭大省向经济强省跨越的重要支撑。山西发展煤炭物流业有很好的资源基础、主体基础和信息平台基础，但在煤炭物流业发展中仍存在一些问题，包括管理体制不顺、管理手段落后、服务水平较低等，需要通过企业树立现代物流意识、加强电子商务人才和营销人才队伍建设、构建信息平台、合理整合煤炭物流运力、加强战略合作等途径促进山西煤炭物流业的发展。     

大学生学习政治理论课之我见

调动大学生学习政治理论课的热情,首先教师要根据各门政治理论课的特点来教授;其次要使大学生在理性上对政治理论课有一个正确的认识.     

大肠杆菌多重耐药调控基因rob的原核表达及其表达蛋白多克隆抗体的制备

提取阳性克隆质粒pMD18-T-rob,经SacⅠ+XhoⅠ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,SDS-PAGE分析证实pET-28a-rob可成功地在大肠杆菌中表达出Rob蛋白。Western-blot分析证明,Rob蛋白具有良好的反应原性。表达出的Rob蛋白经侧带法纯化后免疫獭兔3次,制备抗Rob蛋白的多克隆抗体。通过间接ELISA方法检测抗体效价,结果表明抗体血清1∶40稀释时抗体效价较高。     

蚊虫抗凝血活性物质的药理学应用前景

为了给蚊虫抗凝血活性物质的深入研究提供借鉴,介绍了蚊虫抗凝血活性物质的分类,综述了凝血酶抑制剂、抗血小板凝集因子、凝血酶原酶配合物抑制剂和输血管物质等蚊虫抗凝血活性物质的抗凝血作用原理,并对其药理学应用前景进行了展望.提出对蚊虫抗凝血活性物质结构和功能的研究可为治疗心血管疾病药物的研发提供新思路.