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1.
目的利用发光细菌-青海弧菌Q67对于法医毒物的敏感性,建立一种案发现场快速检测法医毒物的发光细菌检测方法。方法制备冷冻干燥青海弧菌Q67测试液,将法医毒物检材的不同浓度稀释液加入制备好的青海弧菌Q67测试液中,通过检测青海弧菌Q67反应前后的相对发光强度的变化,计算出样本对青海弧菌Q67相对发光强度的变化率或抑制率,对法医毒物检材的毒性进行生物影响的定性评价。结果通过对包含多种农药混合物的法医检材稀释液的测试,发现发光细菌检测结果呈阳性的4个检材对青海弧菌Q67的发光强度抑制率分别为:100.00%,90.41%,84.26%,88.81%。结论通过对包含多种农药混合物的法医检材的测试表明,青海弧菌Q67发光检测方法对法医毒物的毒性的检测是一种快速、灵敏的现场检测方法。  相似文献   
2.
目的利用SELEX筛选甲基苯丙胺适配子,并初步鉴定获得甲基苯丙胺的适配子。方法体外合成全长为76 bp的随机ssDNA文库,以甲基苯丙胺完全抗原偶联到溴化氰活化琼脂糖上,作为固相靶分子对随机ssDNA文库进行SELEX筛选。利用SPR测定适配子和甲基苯丙胺的结合率和特异性,通过MFOLD分析软件对适配子进行二级结构预测和结合位点分析。结果经过10轮筛选后,甲基苯丙胺适配子的结合率由88.3 RU上升到113.7 RU,表明特异性适配子得到逐步富集。获得的适配子进行测序,得10个序列,二级结构均为茎-环结构,可能是适配子和甲基苯丙胺结合的结构基础。结论本研究使用SELEX技术筛选小分子毒品甲基苯丙胺适配子的方法,获得与甲基苯丙胺特异性结合的适配子序列,揭示了适配子与甲基苯丙胺结合的基本结构,为制备特异性甲基苯丙胺检测试剂盒奠定了基础。  相似文献   
3.
FluMag-SELEX技术体外筛选识别氯胺酮的DNA适体   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 利用FluMag-SELEX技术筛选出能特异性识别氯胺酮的DNA适体. 方法 体外合成78 bp的随机ssDNA文库,氯胺酮作为靶分子,表面修饰甲苯磺酰基的磁珠作为固相载体筛选特异性识别氯胺酮的适体.经过13轮筛选后进行DNA克隆测序,并进行一、二级结构分析.通过对荧光强度的分析检测适体的亲和性、特异性和Kd值. 结果 获得2条ssDNA适体Apt#4和Apt#8,能够特异性地与靶分子氯胺酮结合,Kd值分别为0.59和0.66 μmol/L.二级结构预测以茎环和G-四聚体为主,茎结构可能是适体结构稳定的基础,环和G-四聚体结构可能是与氯胺酮特异性结合的关键. 结论 FluMag-SELEX技术可以较好地提高适体的筛选效率,得到能特异性识别氯胺酮的DNA适体,有望用于氯胺酮的快速检测.  相似文献   
4.
巴比妥单克隆抗体制备及其免疫学特性鉴定   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的建立抗巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗巴比妥单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法将巴比妥分子环状丙二酰脲环上氨基引入活性羧基,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到完全抗原BAR-KLH和BAR-BSA,并用紫外分光光度计鉴定。用BAR-KLH免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立稳定分泌抗巴比妥单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备巴比妥单克隆抗体,饱和硫酸铵法、亲和层析法纯化,并进行免疫学特性鉴定。结果完全抗原偶联成功,其偶联率为30∶1;筛选出1株杂交瘤细胞命名为5C6,其产生的单抗效价为1∶6.4×104,属于IgG1/kappa,抗体亲和力常数为2.27×108L/moL。纯化后的巴比妥单克隆抗体用ELISA法检测其灵敏度为130ng/mL,并与其他7种镇静催眠类药物交叉反应率小于1%。结论本研究制备的杂交瘤细胞株5C6分泌的抗体具有高特异性和灵敏度。  相似文献   
5.
适配体是体外合成的能与蛋白质、其他小分子物质、有机离子等等各种配体特异结合单链DNA/RNA,是由SELEX(体外指数富集配体系统进化技术)技术筛选得到,适配体具有对靶标的高特异性和亲和性、合适的化学稳定性、无免疫原性和毒副作用的优点。利用适配体的这些优越性是得适配体可以作为生物识别分子元件应用于传感器及分析试纸中,进而可以快速高效的检测毒物毒品。为了大大提高办案的效率,为维护法治、打击犯罪提供更好的技术支持,通过介绍了一种基于适配体(aptamer)为识别元件的高选择、高灵敏、快速的毒物毒品检验方法。  相似文献   
6.
目的建立分泌抗三唑仑代谢物α-羟基三唑仑单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的三唑仑代谢物单克隆抗体,为三唑仑及其代谢物免疫分析方法的开发奠定基础。方法在三唑仑分子的6位苯环对位上引入活性氨基基团,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)相偶联形成完全抗原。以三唑仑-KLH免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术建立稳定的分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。纯化后的单克隆抗体,分别用SDS-PAGE电泳法、间接ELISA法和胶体金免疫层析法对其纯度、效价及灵敏度和特异性进行测定。结果获得3株能稳定分泌三唑仑代谢物单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2G4,4B2和5H6。2G4和4B2抗体只与三唑仑代谢物α-羟基三唑仑有反应,灵敏度分别为500ng/mL和750ng/mL。与其他参试物无交叉反应。因5H6抗体为IgM,考虑到纯化难度和实际应用的限制,暂未做深入研究。结论本研究制备的2G4和4B2单克隆抗体仅识别三唑仑代谢物α-羟基三唑仑,具有高度特异性和灵敏度。  相似文献   
7.
目的建立基于红外光谱(fourier transform infrared,FT-IR)、气相色谱-质谱联用(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)、高分辩质谱(high resolution mass spectrometer,HRMS)和核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)多技术联用鉴定可疑未知物的方法。方法样品分别用FT-IR、GC-MS、HRMS(溶剂为甲醇)及NMR(溶剂为氘代甲醇)检测。结果GC-MS测得样品中主要组分的质谱特征离子m/z分别为218(基峰)、362、306、274、246、144、116,HRMS实测的精确质量数[M+H]+为363.20774,经FT-IR、GC-MS和HRMS数据分析,推断未知样品为一种新的合成大麻素类新精神活性物质4F-MDMB-BICA,并用1H NMR对其结构进行确证。结论建立的多技术联合鉴定方法能用于未知样品中4F-MDMB-BICA的鉴定。该方法快速、方便、准确、可靠、实用,能够对今后涉及此类物质的案件检测鉴定提供参考依据。  相似文献   
8.
9.
麻黄碱(Ephedrine)和伪麻黄碱(Pseudoephedrine),被广泛应用在药物制剂中,同时又能够作为制作冰毒的原料。根据相关案件的情况分析,目前我国地下加工厂主要以麻黄碱/伪麻黄碱为原料,通过催化加氢法合成甲基苯丙胺。在实际的毒品检验中,快速高效的区分麻黄碱和伪麻黄碱,并确定二者的相对含量,有利于案情的精准定性。研究采用核磁共振技术鉴定样品中的麻黄碱和伪麻黄碱,并对方法进行评价。在进行NMR分析时,检材用気代甲醇溶解、超声处理并用漩涡混合器振荡均匀后进样分析。结果表明选用适当的気代甲醇试剂将二者溶解后进行核磁共振分析,得到二者的氢谱('H NMR)和碳谱(,3C NMR)图都有差异,其中'H NMR核磁共振图谱差异最为明显,可实现二者的有效区分。核磁共振技术能用于样品中麻黄碱和伪麻黄碱的鉴别,该方法简洁、明了、快速、方便,并且可以测定样品中麻黄碱和伪麻黄碱的相对含量。将此法应用于实际案件的检验,效果良好。  相似文献   
10.
特异性可卡因核酸适体测试条的研制   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的筛选识别可卡因的特异性核酸适体,制备可卡因核酸适体测试条(盒)。方法通过SELEX技术筛选可卡因核酸适体,制备胶体金标记可卡因完全抗原(COC-BSA),制作可卡因层析测试条,并对方法特异性、灵敏度、准确性等性能指标进行考察和验证。结果甲基苯丙胺等64种药品和毒品采用本文研制的可卡因测试条检测,结果均为阴性,无交叉反应;检测可卡因最低浓度在5ng/mL,比胶体金单克隆抗体方法检测高5倍;将测试条密封45℃烘烤1个月后,检测结果与未烘烤过的测试条检测结果一致;与GC/MS检测结果对照,准确性为100%。结论本文研制的可卡因核酸适体检测试条,性能稳定,特异性良好,灵敏性和准确性均可达到实际检测的要求,在毒品、毒物的检测中具有广阔的应用前景。  相似文献   
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