法医学二代测序STR分型准确度与测序深度的关联性评估

目的利用实验数据对法医学二代测序STR分型测序深度与分型结果准确度的关联性进行评估。方法使用商业化基因组DNA制备单一来源和混合的DNA样本,以Thermo Fisher公司的25重早期测试试剂盒进行目的STR片段扩增,每种扩增产物分别使用4种不同的序列标签平行建库,并控制标记每一种序列标签的文库上机量依次占一张Ion 318芯片的1/4、1/8、1/16、1/32。经Ion PGMTM基因测序仪测序,以及Ion Torrent SuiteTM软件进行数据分析;同时对庞敬博等人发表的基于相同试剂盒和测序仪检测的95名中国汉族无关个体的6928条等位基因、影子峰和噪音序列进行测序深度统计分析,寻找测序深度与STR分型准确度的关联性。结果各基因座测序深度随文库上样量减少而呈明显下降趋势。对于单一来源样本,每张芯片上样不超过8个均一化文库可实现全部基因座的完整分型;对于1∶20比例的混合DNA,每张芯片上样不超过4个均一化文库时,未发现微量组分的等位基因丢失。人群数据测序深度统计显示,该体系基因座间存在不均衡性,有必要针对各基因座分别设定分析阈值参数。结论测序深度与法医学STR分型结果的准确性密切相关,各基因座最低测序深度与平均测序深度的比值可作为设定分析阈值的重要参考指标。本研究确定的单张芯片上样数量仅适用于本实验体系,但相关实验设计和方案可供其他实验体系开展类似工作参考。     

棉织物上血斑洗涤后无损取材方式及DNA提取方法研究

目的 探究不同无损取材方式及DNA提取方法对棉织物上洗涤血斑DNA分析成功率的影响。方法 采用棉签擦拭法、植绒拭子擦拭法、脱落细胞粘取器粘取法富集洗涤棉织物上的血痕。分别采用Chelex 100法、过柱法和磁珠法提取DNA。采用常规PCR和复合PCR技术扩增目标片段并分别运用琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳技术检测目标产物。结果 植绒拭子擦拭法取材的效果最差,通过脱落细胞粘取器粘取法获得的DNA浓度、STR分型成功率均高于棉签擦拭法,且粘取法操作较简单,实践中优先推荐选择粘取法作为该类检材的取材方式。此外,DNA浓度和STR分型结果均表明过柱法提取DNA的效果优于Chelex法,而磁珠法在3种DNA提取方法中效果最差,建议实践中选择过柱法作为此类检材DNA提取的首选方法。结论 针对棉织物检材上洗涤血痕无损取材及DNA分析,优先推荐选择脱落细胞粘取器粘取法和过柱法分别进行样本取材以及DNA提取。     

大鼠挫伤骨骼肌中M1/M2型巨噬细胞时间相关性研究

目的研究大鼠骨骼肌挫伤后M1/M2型巨噬细胞浸润的动态变化规律结合组织学改变建立损伤时间推断方法。方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型,挫伤后6h、12h、24h、36h、48h、60h、72h、96h、144h、216h、336h为实验组,对照组不进行任何处理。采用HE染色法和免疫荧光多重染色方法观察骨骼肌挫伤后修复规律,运用全景组织细胞定量分析系统检测损伤区内单位面积细胞核数量、M1及M2型巨噬细胞数量和比例变化规律并建立与损伤时间的关系。结果在0.5mm×0.5mm范围内,M1型巨噬细胞比例在0.05±0.02~0.18±0.12且M2型巨噬细胞比例在0.02±0.01~0.04±0.02范围内时,推断该组织的损伤时间为伤后6h~48h;M1型巨噬细胞比例0.22±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.09±0.02范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后60h;M1型巨噬细胞比例0.1±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.16±0.07范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后144h;M1型巨噬细胞比例0.05±0.01~0.09±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.07±0.02~0.09±0.01范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后216h~336h。结论大鼠挫伤骨骼肌中M1/M2型巨噬细胞时间相关性表达规律可作为损伤时间推断的新依据,结合病理组织学改变可进一步提高损伤时间推断的准确性。     

铁铬合金菜刀遗留金属颗粒的成分评价方法

目的检测铁铬合金菜刀遗留的金属颗粒成分,并建立可行的评价指标及方法。方法使用滤纸擦蹭菜刀制作金属遗留微小颗粒样本,应用扫描电镜-X射线能谱仪(scanning electron microscopy and energy dispersive X-ray spectrometer,SEM-EDX)的GSR颗粒分析功能检测遗留金属颗粒成分,计算遗留金属颗粒中铁、铬相对含量比。结果铁铬合金菜刀遗留金属颗粒内所含铁、铬相对含量比,在大部分菜刀间差异有统计学意义(P0.05)。结论使用GSR颗粒分析功能量化检测铁铬合金菜刀遗留金属颗粒内铁、铬相对含量比,为此类致伤工具的认定建立可行的评价方法。     

腭皱法医学同一认定数字化系统的建立

目的建立腭皱法医学同一认定数字化系统并对其进行效果评价。方法在标准条件下获取腭皱的数字图像,对腭皱信息都进行采集、降噪、增强、分割、特征提取、边缘检测、信息匹配等处理,运用Matlab软件研制腭皱法医学同一认定系统,并进行效果评价。结果本研究成功建立腭皱法医学同一认定数字化系统,从匹配结果来看,正确率达到100%。结论腭皱法医学同一认定数字化系统的建立,为同一认定提供一种新的方法和途径。     

采用SEM/EDX方法推断铜锌镀层钢管的种类

目的采用扫描电镜/X射线能谱仪(SEM/EDX)法推断铜锌镀层钢管的种类,评价其在推断工具种类认定中的意义。方法用3根铜锌镀层钢管打击滤纸和猪皮后,分别提取残留的金属颗粒各5组,使用扫描电镜/X射线能谱仪颗粒分析方法进行检测,用SPSS 13.0软件对所得铜锌颗粒成分数据进行统计学分析。结果通过Cu和Zn元素相对含量的均数±标准差(x—±s),评估铜锌镀层钢管打击滤纸和猪皮后所残留的铜锌元素金属颗粒的稳定性。不同种类钢管残留金属颗粒成分(P0.05)有显著差异,同一把钢管打击猪皮和滤纸残留金属颗粒(P0.05)无差异。结论 SEM/EDX颗粒分析方法可以对铜锌镀层钢管进行种类认定。     

产褥期肺动脉血栓栓塞猝死医疗纠纷1例

1案例1．1简要案情 某女，24岁，某年1月10日因“足月妊娠”入住某县人民医院，次日阴道分娩一男婴，1月14Et出院。1月21日产妇因“左臀部疼痛5d”再次入住该院。实验室检查：血小板513x10。／L，C反应蛋白46．2mg／L，红细胞沉降率100mrn／h。1月26日患者突然出现意识丧失、口唇苍白、脉搏细速等，经抢救无效死亡。根据尸体解剖、组织病理学检查，并结合相关案情和病历资料认定，死者系产褥期继发双下肢深静脉血栓形成并脱落，引起肺动脉血栓栓塞，导致急性循环、呼吸功能障碍而死亡。家属认为医方的医疗行为存在过错，与患者死亡结果之间存在因果关系。遂诉至法院，要求赔偿。     

太原市未成年人道路交通事故死亡案例分析

近年来，随着机动车数量急剧增长，未成年人交通事故死伤率呈逐年上升趋势，2006年全国因交通事故死亡的未成年人占全年交通事故死亡人数的10％左右。本文对太原市2004～2006年41例未成年人（18岁以下）交通事故死亡案例的特点进行统计分析，旨在为相关案件的处理提供参考。     

大鼠骨骼肌挫伤后细胞间黏附分子-1mRNA表达变化

目的应用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术检测大鼠骨骼肌挫伤后细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecular—1，ICAM-1）mRNA表达。分析其与挫伤时间的关系。方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型．分别取伤后0．5、1、6、12、18、24、30h及对照组检材。检材冰冻切片后进行FISH．激光共聚焦显微镜观察。结果大鼠骨骼肌挫伤后ICAM-1mRNA的表达6h达到峰值，18h下降至对照组的3．46倍．随后继续升高。结论大鼠骨骼肌挫伤后30h内ICAM—1mRNA的表达有一定的时间规律性．可望作为推断骨骼肌早期损伤时间的指标之一。     

MMP-2和MMP-9与脑损伤及其法医学意义

基质金属蛋白酶2和9（MMP-2、MMP-9）是基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）家族中的两个成员，可降解Ⅳ型胶原、层粘连蛋白等基质成分，从而使血脑屏障结构破坏，通透性增加，导致血管源性脑水肿，在脑血管疾病和脑损伤形成过程中起着重要的作用。在损伤后不同时段，MMP-2和MMPO含量及分布均呈现一定的波动性，探讨这些问题对脑损伤的治疗及在法医学中推断脑损伤时间有十分重要的意义。本文就这些问题的相关研究作一概述。