番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC蛋白基因的克隆与序列分析

参考已发表的番鸭呼肠孤病毒(mDRV)的S4序列设计了1对扩增σC蛋白基因的引物,对mDRVZJ99株的RNA抽提物进行RTPCR扩增,获得了特异性的扩增片段。将PCR产物克隆测序,序列经同源性比较,发现mDRVZJ99株σC蛋白基因序列与福建MW9710株对应基因的同源性为99.5%,与法国89026株对应基因的同源性为94.2%,与法国89330株对应基因的同源性为95.0%;相应的氨基酸序列同源性分别为98.9%、94.1%、93.7%。基于σC基因及其推导氨基酸序列的蛋白质结构及物理化学性质预测结果,与国外学者对mDRVσC蛋白的报道相似。     

猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

根据已发表的PCV 1和PCV 2全基因组序列 ,设计了 3条引物 ,组成PCV 2的特有引物对和PCV 1、PCV 2的共有引物对 ,分别扩增长度为 4 72bp和 339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性 ,将 4 72bp的扩增产物纯化后 ,克隆到 pMD 18 T载体 ,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定 ,并测序。将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较 ,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV 2毒株核苷酸序列的同源性均在 99%以上 ,与PCV 1毒株的同源性为 86 %。结果显示 ,该方法最少可用于 3μg病料组织和 0 .75 pgDNA的PCV 2检出 ,具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市 4 7份“猪高热综合征”病料 ,PCV 2感染阳性率为 36 .17% ,PCV 1单独感染阳性率为 34.0 4 %。     

猪脑膜脑炎型肺炎链球菌病的诊断

1992年6～7月,在宁波 市郊县某猪场,发生了一种初生仔猪临床上以全身发抖和严重的神经症状,剖检呈脑膜脑炎为特征的疾病,经流行病学调查、临诊观察、病理学诊断和病原分离鉴定,确诊为由肺炎链球菌引起的脑膜脑炎。采取了相应的防治措施后,及时地控制了疫病的发生。 (一)流行情况与临床症状 该猪场于1991年10月从外地引入后备公母猪108头,其中后备母猪94头,经隔离饲养1个月未发现异常。1992年3月开始陆续配种,在配种3个月后有10余头母猪先后发生关节肿胀,经用抗菌素治愈后未留后遗症。该批母猪自6月11日开始产仔,至7月11日共产54胎,产活仔431只。其中有15胎母猪所产的仔猪中有63只在出生后至1周龄内发病,症状为全身发抖、呼吸急促,有的呈犬坐状或前肢作游泳状及昏迷不醒等严重的神经症状。发病后在数小时至2～3天内均死亡,发病率为14.6％,病死率达100％。