鸡贫血病毒山东分离株的限制性内切酶酶切图谱多态性分析

利用套式ＰＣＲ扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）６８７ｂｐ片段,分别以ＨａｅⅢ,ＨｉｎｆⅠ和ＨｐａⅡ酶切,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析其限制性片段长度多态性。用该技术对我国山东分离株的分析表明,ＳＪ１和ＳＪ２与日本的ＴＫ５８０３株和瑞典的１／８０和１／９１株相同,应属于Ｔｏｄｄ用限制性内切酶酶切图谱多态性分析（ＲＦＬＰ）分类方法中的第２组。     

进境种鸡传染性贫血抗原检测

鸡传染性贫血（ＣＩＡ）是由鸡贫血病毒（ＣＡＶ）引起，以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为特征的鸡病。可导致发病鸡贫血、免疫功能低下、疫苗免疫失败以至死亡，给养禽业造成较大的经济损失。为掌握国外种鸡ＣＩＡ的带毒情况，对来自不同国家、不同品种的种鸡进行了...     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

分泌抗鸡病毒性关节炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用鸡病毒性关节炎病毒（ＲｅｏＶ）免疫８ＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ＿２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＥＬＩＳＡ法检测和筛选，以有限稀译法克隆３次，获得４株分泌抗ＲｅｏＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，在传代期间能稳定地分泌ＭｃＡｂ。用杂交瘤细胞注射ＥＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水，其ＥＬＩＳＡ抗体效阶达４０００～８０００，在－７０℃条件下保存半年，其抗体效价不变。特异性分析结果表明，该ＭｃＡｂ只特异地与ＲｅｏＶ发生反应，而不与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＢＤＶ发生反应。