仔猪睾丸组织体外培养方法的建立

以30日龄仔猪睾丸组织块为培养对象,应用飞利普TECNAI10电子显微镜对培养前后的生精细胞类别进行了观察,对培养后的组织块进行生精细胞分化程度鉴定,建立了仔猪睾丸组织生精细胞爬片体外培养模型。培养前后电镜观察及HE染色结果显示,培养前细胞种类主要有2种:支持细胞和精原细胞,有少数几个初级精母细胞;培养第20 d的睾丸组织块HE染色观察到3个精子细胞,电镜观察到2个精子细胞。证实,在没有添加睾酮的情况下,此培养体系能够提供睾丸组织块生精细胞分化所需要的条件,使非精子细胞类生精细胞减数分裂为精子细胞。     

FSH对仔猪睾丸支持细胞增殖和GDNF表达的调节

以原代培养的仔猪睾丸支持细胞(SC)为试验模型,研究了FSH对SC胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达及其增殖的影响。结果显示,外源性添加FSH可促进GDNF蛋白表达,而且这种促进作用具有浓度和时间依赖关系,GDNF蛋白水平随着FSH浓度的增加而升高,当FSH浓度为50 ng/mL时,GDNF水平达到最高,然后逐渐降低;FSH(50 ng/mL)作用30 min,可显著促进GDNF蛋白的表达(P<0.05),当FSH作用1 h时,GDNF蛋白水平达到最高,随后逐渐降低。FSH可以时间-剂量依赖性促进SC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,FSH(50 ng/mL)作用30 min时,PCNA的表达显著增加(P<0.05),作用1 h达极显著水平(P<0.01),至2 h时,PCNA蛋白的表达水平达到最高,随后逐渐降低。提示,FSH可在体外条件下通过刺激SC表达GDNF进而促进其增殖。     

犬生殖系统的常见疾病

犬生殖系统的常见疾病张家骅（西北农业大学陕西杨陵７１２１００）本文重点讨论引起母犬不育的各种生殖器官解剖学异常、器质性病变、功能性异常和怀孕期、分娩期、产后期疾病以及公犬的不育。（－）母犬生殖系统疾病１．母犬生殖器官解剖学异常：（１）间性：真正的两性...     

17β-雌二醇对海马组织结构和GFAP表达的影响

为研究17β-雌二醇对脑的保护作用机制,以去卵巢大鼠为动物模型,采用甲苯胺蓝染色、免疫组织化学染色和透射电镜技术,观察了17β-雌二醇对海马组织结构和胶质纤维酸性蛋白表达的影响。结果显示:①与对照组、假手术组和去卵巢后补充雌激素组比较,在去卵巢组中,海马CA1～3区、齿状回神经元数量显著减少(P<0.05),CA4区神经元数量减少不显著(P>0.05);海马CA1～4区、齿状回星形胶质细胞数量增加不显著(P>0.05);海马CA1～4区、齿状回胶质纤维酸性蛋白表达增加,除CA4区与去卵巢后补充雌激素组之间无显著差异外(P>0.05),其余均差异显著(P<0.05);海马CA1区神经元、胶质细胞线粒体肿胀,神经元突触和突触囊泡减少,轴突变性;②与去卵巢组比较,去卵巢后补充雌激素组海马CA1～3区、齿状回神经元数量明显增加(P<0.05);海马CA1～4区、齿状回星形胶质细胞数量减少不显著(P>0.05);海马CA1～3区、齿状回胶质纤维酸性蛋白表达显著降低(P<0.05);保持了海马CA1区神经元和胶质细胞超微结构的正常。结果表明,17β-雌二醇能通过增加神经元数量,降低星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白表达,保持神经元和胶质细胞正常的超微结构,实现对海马的保护。     

放射免疫测定方法——Ⅰ.放射免疫测定的基本原理及标准曲线的制作

许多生物体液中的活性物质含量很低,各种生殖激素含量一般都在10~(-9)～10~(-12)克/毫升水平,而各种常规的化学测定方法只能测到10~(-3)～10~(-6)克/毫升水平。1960年以前,要测定这些微量生物活性物质只能采用生物学测定法,即根据特异器官对被测成分的生物学效应的大小来判断被测物的水平。这种方法除对实验动物需要严格选择外,方法本身也很复杂、费时,特异性差,难以准确定量。 1959年,Yalow和Berson利用胰岛素抗体与放射性同位素标记的胰岛素试剂进行血液中胰岛素测定,成功地建立了胰岛素放射免疫测定法,奠定了放射免疫测定法(Radioimmunoassay,简称RIA)的基础。RIA是将具有极高灵敏度的放射性同位素示踪技术与高度特异性的免疫化学技术结合而建立起来的新的分析方法,灵敏度高、特异性强、精碗度高、重现性好,最低可测量达10~(-9)～10~(-12)克/毫升,甚至可达     

类固醇合成相关酶在小鼠不同组织中的表达

利用RT-PCR和Western-blotting技术分析了胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟甾脱氢酶(3-βHSD)、C17-20裂解酶(P450c17)、StAR mRNA和蛋白在成年昆明小白鼠心脏、脾、肝、肾中的表达。结果显示,StAR mRNA及其蛋白、P450scc mRNA在以上组织中均有表达;3-βHSD在肾中有较强的表达,在其他组织的表达较弱;P450c17在上述组织中无明显的表达,但在睾丸中有明显的表达。这表明,心脏、脾、肝、肾均具有合成类固醇的能力,但合成类固醇的类型存在一定的差异。     

放射免疫测定办法(续)——Ⅱ.测值的计算和RIA的质量控制

(一)样品含量的计算 RIA标准曲线是估计样品含量的标准,但是根据样品管结合率直接在曲线上查出对应的测值,其结果并不准确,因此应该建立一种数学模型,通过计算得出较为精确的样品含量。 计算时,以标准曲线中标准品含量和对应的结合率进行log—logit转换后的数值为基础(见表5)。     

犬的生殖生理

犬的生殖生理张家骅（西北农业大学陕西杨陵７１２１００）关于犬的生殖生理目前在我国尚缺乏较详细的资料，本文将对大的初情期、发情周期、妊娠和分娩期一般生殖生理特点和交配行为进行较为详细和系统的论述。（一）初情期犬在出生后１５天左右出现初级卵泡，６个半月时...     

放射免疫测定方法(续) Ⅲ.血样和乳样的RIA

目前,国内能为家畜生殖激素测定提供的RIA药箱主要还只用于类固醇生殖激素的测定。血中和乳中类固醇生殖激素的RIA过程如下: (一)血中类固醇生殖激素的测定 1.血样的采集、处理和保存:确定采样时间要根据课题的要求和实际可能性来定,特别要考虑到激素水平可能有的季节性变化、周期性变化(母畜)、昼夜分泌节律和阵发性分泌范型(公畜)。周密的课题设计是可能得到有意义结果的先决条件。 采样的时间要统一,环境要安静,动作要熟练。惊吓、性刺激和剧烈运动都可能对激素水平产生影响。需要在短期内频繁采样或对未经调教的动物要多次采样,应安装静脉导管。