山羊GSDM家族相关基因的克隆及细胞焦亡效应蛋白GSDMD-NT的原核表达

为了解GSDM家族蛋白在山羊疾病发生过程中的作用,采用RT-PCR方法克隆了海南黑山羊GSDM家族相关基因,并对其进行序列及编码蛋白结构分析;基于对GSDMD的氨基酸序列分析,寻找到了其Caspases切割位点,扩增了GSDMD-NT序列,并将其克隆至原核表达载体进行诱导表达。结果显示,海南黑山羊GSDM家族基因种间同源性低,都存在Gasdermin超家族结构域,是结构保守蛋白;His标签GSDMD-NT的原核表达质粒经诱导后表达出51.2 ku的融合蛋白,该蛋白可以与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应。本研究结果为GSDM家族蛋白功能的物种间比较研究提供了基础数据,也为进一步探究GSDMD-NT诱导细胞焦亡的机制奠定了基础。