牛趋化因子受体4基因的克隆表达及序列分析

采用RT-PCR技术,从被刺激诱导的牛外周血单个核细胞(PBMC)中克隆了牛趋化因子受体4(CXCR4)全长基因,并将CXCR4基因和CXCR4基因N端1～126 bp(CXCR4~(42aa))片段分别亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,命名为pGEX-4T-1-CXCR4、pGEX-4T-1-CXCR4~(42aa).获得重组菌株后,采用不同的IPTG浓度、不同诱导时间、不同温度和不同培养基等组合诱导表达这两种重组菌,其中pGEX-4T-1-CX-CR4~(42aa)重组菌获得了表达,并在37℃、IPTG浓度为0.8 mmol/L、诱导6 h时表达量最大,约占菌体总蛋白的45%,目的蛋白主要以包涵体的形式存在;而pGEX-4T-1-CXCR4重组菌未表达出目的蛋白.     

统一战线内部构成变化对转变经济发展方式的影响——以南充市为例

新形势下,统一战线内部构成发生了新的变化,新的社会阶层逐渐成为统一战线的重要组成部分,这对服务经济发展方式的转变将产生积极影响。南充市着力研究统一战线内部构成变化的规律、特征和趋势,探索新形势下统一战线服务经济社会发展的新途径,取得了明显实效。     

关于我国高校教师教学评价的几点思考

随着教学评价功能的日益凸显,高校教师教学评价已经通过不同的形式在我国范围内广泛开展。但高校教师教学评价的四大关键问题———"为什么评价"、"谁来评价"、"怎样评价"、"如何保障评价"均存在很大争议。本文针对四大问题相对应的认识偏颇、实施冲突、方法落后、机制缺失方面     

牛胸腺素原α基因的原核表达与分析鉴定

为了把牛胸腺素原α(ProTα)开发为免疫增强剂,从重组克隆载体pMD18-T-ProTα上扩增ProTα基因,分别构建和筛选出了pGEX-4T-1-ProTα、pET-30a(+)-ProTα的BL21、BL21codon plus和Rosetta Blue(DE3)plys重组原核表达菌株,采用不同的条件组合对其进行诱导表达。结果,重组菌BL21codon plus-pET-30a(+)-ProTα表达出约24ku和30ku两个蛋白条带,且在37℃、IPTG浓度为0.5mmol/L、诱导3h时表达量最大,重组蛋白主要以可溶性形式存在;而pGEX-4T-1-ProTα重组菌在诸多条件下都未表达出目的蛋白。纯化产物的Western-blot分析显示,重组蛋白可与兔抗人ProTα多抗发生特异性免疫反应,表明重组蛋白具有免疫学活性结构。研究结果为重组ProTα蛋白的结构与功能研究奠定了基础。