人胚胎原始生殖细胞的原代培养

从 5～ 9周人胚胎生殖嵴中消化分离原生殖细胞 (PGC) ,将其置于经过丝裂霉素C处理过的单层小鼠胚胎成纤维细胞 (PMEF)饲养层上培养。结果 ,经过培养形成的克隆以及克隆的生长方式基本符合小鼠胚胎干细胞 (ES)的特性 ,表现为细胞核大 ,细胞排列紧密 ,界限不清 ,集落边缘可见分化的成纤维细胞等 ;将其接种于裸鼠皮下 ,经过 2 9d生长 ,得到具有 3个胚层组织结构的畸胎瘤     

重复超数排卵获取兔成熟卵母细胞的研究

采用重复剖腹手术方法 ,收集经过激素刺激超数排卵兔的成熟卵母细胞 ,分为垂体促卵泡素 (FSH)组 (3d分 6次注射 )和FSH与 2 5 0mg/L聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)混合组 ,用正常排卵雌兔作对照。结果 ,经 3次手术取卵 (每次手术间隔至少 5 0d以上 ) ,由输卵管插管冲出卵母细胞、收集并筛选 ,用激素处理的 2组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出 3倍以上 (P <0 .0 1) ,两种超排方法之间超排效果无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;连续 3次手术均成活兔中 ,对照组和FSH组 3次取卵效果无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,FSH与PVP混合组首次手术与第 3次手术出现显著差异 (P <0 .0 1)。     

透明质酸酶对牛卵母细胞孤雌激活的研究

在37-39℃50 mL/L CO2条件下,用含80 mL/L发情牛血清及50 mL/L犊牛血清的M199成熟培养液培养牛的A、B级卵丘-卵母细胞复合体(COCs),18-22 h后以无血清的TCM199培养液洗涤3次,用透明质酸酶消化吹打脱去卵丘细胞,以无血清的M199培养液洗涤3次,移回成熟培养液中培养.结果,卵细胞于成熟后第3 d开始出现卵裂,第5 d卵裂率达到37%,第9 d囊胚率达5%-9%.表明透明质酸酶可以促使成熟的牛孤雌卵母细胞激活并发育至囊胚.