蛋鸡输卵管中肥大细胞发育情况的观察

采用甲苯胺蓝染色,观察蛋鸡输卵管中肥大细胞的形态和分布,探究输卵管中肥大细胞的发育规律。结果显示,在56日龄首次观察到输卵管中肥大细胞;随着日龄的增长肥大细胞数目增加,210日龄时达到最大值。肥大细胞主要分布于输卵管的上皮下、黏膜固有层、肌层等部位,具有围绕血管分布的特点。漏斗部中肥大细胞数目最多,峡部最少。结果表明,输卵管中肥大细胞210日龄时达到最大值,较肠道发育晚,这一结果为预防蛋鸡生殖道疾病奠定了理论基础。     

鸡肠相关性淋巴组织中IFN-γ和IL-2 mRNA表达的动态变化

通过实时荧光定量PCR方法,检测鸡在胚胎时期和出壳后初期肠道相关性淋巴组织(GALT)中IFN-γ基因和IL-2基因mRNA的表达水平,从而了解鸡GALT免疫功能的建立情况并反映鸡在此阶段的免疫状态。结果显示,胚胎20日龄和出壳后1日龄各肠段GALT中均有少量IL-2mRNA和IFN-γmRNA的表达。盲肠扁桃体、直肠和食管扁桃体中IL-2基因的表达水平在出壳后4日龄时显著升高(P<0.05),而在7日龄时又略有下降。除食管扁桃体外,各肠段GALT中IFN-γmRNA的表达水平在4日龄时显著升高(P<0.05),而空肠、回肠和直肠中其表达水平在7日龄时又显著下降(P<0.05)。各肠段在第2周内IL-2基因和IFN-γ基因表达水平迅速升高,并在14日龄时达到最高峰,之后各日龄都趋于稳定。另外,各日龄同一肠段IFN-γ基因的表达水平要明显高于IL-2基因的表达水平。证实,鸡GALT在出壳后4日龄就初步具有细胞免疫功能,直至第2周尤其是14日龄时其功能基本达到成熟水平。     

鸡盲肠扁桃体中B淋巴细胞的发育

通过免疫组织化学方法,应用IgM、IgG和IgA单克隆抗体研究了IgM~+、IgG~+和IgA~+B淋巴细胞在鸡盲肠扁桃体中的出现、迁移、组织定位分布以及数量变化规律等一系列发育过程.结果显示,IgM~+细胞在胚胎20日龄时开始出现,而IgG~+和IgA~+细胞均在雏鸡出壳后1日龄时出现.在定位分布变化上,4日龄之前,B淋巴细胞主要分布在黏膜上皮下固有层中;4～7日龄时,B淋巴细胞则主要分布在黏膜固有层的中上部区域,随后各日龄B淋巴细胞均匀地分布在黏膜固有层中;14日龄时,黏膜固有层中出现主要由B淋巴细胞组成的生发中心,21日龄时可见轮廓更清晰的生发中心存在于黏膜固有层中下部区域,并且生发中心中存在大量的IgM~+、IgG~+和IgA~+细胞.在数量变化上,B淋巴细胞随着日龄增长数量持续增加,直至35日龄时趋于稳定,各日龄的B淋巴细胞数量始终以IgM~+细胞最多,IgA~+细胞次之,IgG~+细胞最少.证实,鸡出壳后初期盲肠扁桃体的体液免疫功能逐渐增强,并在35日龄时达到成熟水平.     

妊娠期绵羊子宫内膜Fit-1基因表达的RT-PCR检测

以β-actin基因作为内源性内标,采用RT-PCR方法检测了Flt-1基因mRNA在东北细毛羊、小尾寒羊妊娠期不同阶段子宫内膜中的表达量.结果显示,绵羊妊娠期在不同阶段的子宫内膜中Flt-1 mR-NA均强烈表达,且随着妊娠期的延长,Fit-1 mRNA的表达量有逐渐增强的趋势(P＜0.05);在相同的妊娠阶段小尾寒羊子宫内膜中的Flt-1 mRNA表达量显著地高于东北细毛羊的Flt-1 mRNA表达量(P＜0.05).     

不同日龄雏鸡免疫新城疫病毒弱毒疫苗后体液免疫和黏膜免疫反应的变化规律

采用新城疫LaSota弱毒株疫苗经滴鼻、点眼途径免疫不同日龄雏鸡,然后采集血清、泪液和鼻洗脱液,应用血凝抑制试验(HI)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对抗原特异性IgM、IgG和IgA或SIgA抗体水平的消长规律进行检测。结果显示,血清中IgG抗体水平最高,IgA和IgM抗体水平相对较低。免疫组血清HI效价明显高于空白对照组血清HI效价。泪液和鼻洗脱液中新城疫病毒(NDV)特异性IgM出现的最早,于免疫后第4天可检测到,并于第7天达到高峰,而后迅速下降;而NDV特异性IgG、SIgA于免疫后第7天可检测到,并于第21天达到较高水平。13日龄免疫组总抗体水平分别高于6日龄免疫组和3日龄免疫组总抗体水平,但是1日龄免疫组不能诱导呼吸道黏膜产生抗体。研究结果表明,泪液、鼻洗脱液中抗体和血清中抗体均存在日龄相关性变化的特点,为雏鸡出壳后免疫机制的研究和更有效控制新城疫的发生提供了试验依据。     

鸡盲肠扁桃体中T淋巴细胞及其亚群的发育

通过免疫组织化学方法,应用CD3、CD4和CD8单克隆抗体研究了CD3 T淋巴细胞及CD4 和CD8 T淋巴细胞亚群在鸡盲肠扁桃体中的出现、迁移、组织定位分布及数量变化规律等一系列发育过程.结果显示,CD3 、CD8 T淋巴细胞最初于20日龄胚胎中出现,而CD4 T淋巴细胞在出壳后1日龄时出现.在定位分布变化上,4日龄之前,T淋巴细胞主要分布在黏膜层的中下部区域,而4日龄以后的各日龄在整个黏膜层中均匀分布,CD4 细胞主要聚集在滤泡间区域,而CD3 细胞和CD8 细胞在固有层中和黏膜上皮中都有大量分布.在数量变化上,4日龄时,各种阳性细胞的数量都骤然增加,而到7日龄时,CD3 、CD8 T淋巴细胞的数量明显减少,CD4 细胞的数量无明显变化,从14日龄开始直到35日龄,CD3 、CD4 和CD8 T淋巴细胞的数量持续增加.证实,鸡出壳后初期盲肠扁桃体的细胞免疫功能增强,并在14日龄时达到成熟水平.