大鼠肝纤维化模型的建立

大鼠肝纤维化模型的建立史智勇牛廷献周景熙（解放军兰州军区总医院７３００５０）１材料与方法１．１动物选择与分组雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只（兰州医学院动物室提供），体重１８０～２５０ｇ，随机分为４组，即正常对照组、四氯化碳（ＣＣｌ４）组、ＣＣｌ４＋乙醇组...     

大鼠应激性胃溃疡发生机制及防治的研究

将Wistar大鼠束缚浸水应激 3h ,用光镜、电镜观察胃黏膜的病理变化 ,并检测胃黏膜溃疡指数。结果 ,应激组大鼠胃黏膜的完整性被破坏 ,上皮细胞坏死 ,毛细血管破裂、出血及渗出 ;胃黏膜表面微绒毛呈现明显水肿 ,胞膜消失 ,胞核肿大 ,核变形 ,核仁溶解 ,毛细血管内有微血栓形成。应激宁组大鼠胃黏膜病变比应激组大鼠轻 ,对照组大鼠的胃组织未发现病变。统计结果表明 ,胃溃疡指数具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。试验证明 ,在应激状态下 ,胃局部血液循环障碍是引起胃溃疡的重要因素之一 ;应激宁对应激性胃溃疡具有一定的防治作用     

旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因TsCP1的克隆与序列分析

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶的功能,根据GenBank中旋毛虫EST数据库的半胱氨酸蛋白酶基因部分cDNA序列设计引物,以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,克隆到旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因(TsCP1)的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析。结果表明,TsCP1cD-NA序列含有一个由1 101个核苷酸组成的开放阅读框,编码由366个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质的分子质量理论值为41.9ku,理论等电点为7.46。TsCP1二级结构中α螺旋占31.4%,β折叠占15.3%。TsCP1第1～19位氨基酸残基为信号肽序列,具有3处N-糖基化位点,而且具有半胱氨酸蛋白酶的保守活性位点Cys173,His309及Asn333残基,另外在酶前体序列中有与组织蛋白酶F特征基序ERFNAQ相似的LKFNAQ序列,表明该蛋白属于半胱氨酸蛋白酶家族的组织蛋白酶F亚类。同源性分析表明与其他寄生性蠕虫组织蛋白酶F的一致性在40%以上,系统进化分析表明与吸虫的组织蛋白酶F属于不同的进化分支。     

旋毛虫FYVE锌指结构蛋白基因的克隆及表达

用旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库中的T54克隆作为核酸探针,对旋毛虫成虫和新生幼虫混合cDNA文库进行筛选,获得1个全长1464 bp的cDNA分子.该cDNA含有1个1290 bp的开放阅读框架(ORF),Blastn同源性分析表明,与其它已知生物基因序列无明显的同源性,为一新的cDNA.该ORF编码1个429个氨基酸残基组成的多肽,其分子质量理论推导值为49.9 ku,等电点为5.6,在12-14及103-105氨基酸残基处分别有2个糖基化位点NLS及NVS,在C末端344-409氨基酸残基处有1个FYVE锌指结构域(Profile PS50178).Blastp同源性分析表明,与广东管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis)66.0 ku蛋白(gi/1743430)同源性最高,为39.0%.在此基础上对旋毛虫FYVE锌指结构重组蛋白进行了表达,表达蛋白占茵体蛋白的24%.