H7N2禽流感病毒分离株血凝素蛋白全基因的序列分析

为进一步分析H7N2禽流感病毒(AIV)分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表序列设计了1对引物,采用RT-PCR获得了1条约1.7 kb的DNA片段,测序后进行了同源性比较、HA基因系统发育进化树分析和氨基酸编码分析。结果表明,所测的2个分离株的HA基因全长1 664 bp,编码除信号肽以外的HA蛋白的全部544个氨基酸,其中包括HA1的323个氨基酸,HA2的221个氨基酸。2个分离株HA基因核苷酸序列的同源性为99.4%;与GenBank中AIV标准株A/Afri.Star./Eng-Q/983/79(H7N1)的同源性最高,分别为99.4%和99.0%;与美国A/Chicken/NewYork/13142-5/94(H7N2)株同源性很低(仅65.0%),而与以色列、意大利H7N2AIV的同源性较高(为96%~97%);2个分离株在HA基因进化树中均处于H7亚型AIV的欧亚群系分支内。推导氨基酸的序列分析表明,其HA蛋白裂解位点的氨基酸序列为-GR-GLF-,仅包含1个碱性氨基酸(R-)残基,符合低致病力AIV的基因特征。     

小反刍兽疫病毒抗体高敏快速荧光定量检测方法的建立

为建立快速定量检测羊血清中小反刍兽疫病毒抗体的方法,本研究通过优化大肠杆菌密码子、优化表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白,基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒抗体高敏荧光免疫定量检测试剂盒。该方法能够快速定量检测绵羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对292份临床血清样品进行检测,同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较,两种方法符合率达到93.84%。与血清中和试验进行比较,高敏荧光快速定量检测方法检测效价值基本与标准阳性血清(OIE参考实验室提供)的中和试验效价值相符合。本试验建立的方法可对小反刍兽疫病毒抗体进行现场快速定量检测,具有较高的实用价值和推广价值。     

论企业与农户间利益联结机制的变迁

现行的企业与农户间的利益联结多是采用契约形式,是典型的松散型联结,这种联结机制是导致"企业+农户"型组织模式不稳定问题的主要原因。要扭转这一困境,就必须改变联结机制,实现由松散型向紧密型利益联结转变,股权联结应是实现这一转变的较佳机制,即农户先将土地承包经营权以股权形式与其他农户的股权进行联结,成立农民股份合作组织,然后再由合作组织以总体股份与龙头企业尤其是公司型龙头企业进行联结,形成"公司型龙头企业+农民合作经济组织"模式,这一模式应是我国农业经营企业化的发展方向。     

我国11个省份山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的血清抗体检测

为摸清我国山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的流行情况,用竞争ELISA(C-ELISA)方法对采自河北等11个省份的山羊与绵羊血清进行了抗体检测。结果显示,共检测山羊血清2 083头份,检出山羊关节炎-脑炎抗体阳性血清8份,阳性率为0.38%;检测绵羊血清1 339份,检出绵羊进行性肺炎抗体阳性血清6份,阳性率为0.45%。按不同山羊血清来源统计,山羊关节炎-脑炎的规模场阳性率为0.51%,散养户阳性率为0.50%;按不同绵羊血清来源统计,绵羊进行性肺炎的规模场阳性率为0.53%,屠宰场阳性率为0.12%。按不同山羊饲养方式统计,山羊关节炎-脑炎的全舍饲阳性率为0.41%,半舍饲阳性率为0.35%,放牧阳性率为0.35%。按不同绵羊饲养方式统计,绵羊进行性肺炎的全舍饲阳性率为0.48%,半舍饲阳性率为0.26%,放牧阳性率为0.85%。结果表明,我国山羊与绵羊中分别存在山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的感染,但感染流行率较低。     

基于双任务代理模型的股权激励及其经验证据

股权激励作为一种基于业绩的中长期薪酬制度,已经逐渐被各国的上市公司、投资者和市场各方所接受,更多的上市公司开始选择股权激励。本文构建双任务代理下的股权激励模型,以2006-2010年实施股权激励的上市公司为样本,考察了政府干预和地区市场化进程对股权激励的影响。结果显示,政府干预降低了股权激励强度,地区市场化进程与股权激励正相关。该经验证据为新时期完善股权激励决策优化提供了方向。     

禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定

参考已发表的禽流感病毒 (AIV)H7亚型血凝素 (HA)基因序列设计引物 ,经RT PCR扩增了AIV H7亚型的HA1基因片段 ,再将该片段定向插入到原核表达载体 pGEX 4T 2中 ,转化大肠埃希氏菌。重组表达载体经酶切和测序鉴定后 ,用IPTG诱导表达。用Western blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明 ,融合表达蛋白能与AIVH7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应 ,而与H5N1、H9N 2等其他 13个亚型的抗血清无交叉反应。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的分离与分析

根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的核酸序列,设计合成1对引物,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从病猪肺中扩增出编码核衣壳蛋白(NP)基因,克隆入T-载体后,利用双脱氧链末端终止法测定序列,所获得的序列经Bankit投放到GenBank,并利用DNASIS、Dnastar等软件进行了分析.