基于同源重组技术的表达CRE重组酶的减毒沙门菌的构建及功能初步研究

为了构建表达Cre重组酶的减毒沙门菌,本试验首先将Cre重组酶表达框插入到自杀质粒pYA3599中,构建重组自杀质粒pYA3599-Cre,电转至感受态χ7232中,经酶切鉴定与测序后,电转至χ7213感受态中,得到含有自杀质粒pYA3599-Cre的重组菌χ7213。随后通过同源重组,经两步筛选,将Cre重组酶表达框整合至减毒沙门菌χ11802的基因组中,得到重组减毒沙门菌χ11802-Cre,通过Western-boltting技术检测重组酶Cre的表达,进而将报告质粒pYA4545-lox P电转至重组菌中验证Cre重组酶的功能。结果显示,成功构建了自杀质粒pYA3599-Cre,并基于同源重组技术成功将重组酶Cre表达框整合至χ11802基因组中,通过Western-blotting成功检测出重组酶Cre的表达,且报告质粒电转至重组菌中可被切除lox P位点之间序列。本试验成功构建出能表达重组酶Cre的减毒沙门菌,为后期以位点特异性重组酶Cre为基础的减毒沙门菌微环DNA疫苗的构建奠定了基础。     

表达Ⅶ型新城疫病毒F蛋白的延迟裂解型沙门菌DNA疫苗载体的构建

为了构建表达新城疫病毒Ⅶ型F蛋白的延迟裂解型沙门菌载体,本试验首先通过PCR技术将Flag标签携带到pUC-F-opt片段中,构建出pUC-F-opt-Flag片段,再将构建好的片段克隆到沙门菌载体pYA4545中,构建重组质粒pYA4545-pUC-F-opt-Flag,并将重组质粒转染HEK-293 T细胞,收集细胞总蛋白。通过Western-blot检测目的蛋白的表达情况。同时将真核表达质粒转染Caco2细胞,并以间接免疫荧光试验检测蛋白表达。结果显示,成功构建了重组质粒pYA4545-pUC-F-opt-Flag,经Western-blot和间接免疫荧光法检测目的蛋白成功表达,为后期试验奠定了基础。     

中西平等思想发展比较分析

平等作为法的价值之一,无论在中国还是西方,在历史上都是呈多元演变的。从古希腊古罗马到中世纪、文艺复兴,西方的平等思想源于并始终体现了人们对人生意义、价值的认知和关怀。中国的平等思想虽也有深厚传统,但大都以平均主义为出发点并以经世致用为基本取向,其内涵与西方的平等观相去甚远。通过比较中西平等思想发展的历史,有助于厘清当代中国需要何种平等,进一步践行以人为本的和谐价值理念。     

免疫乳与血中抗轮状病毒和大肠埃希氏菌抗体的比较研究

以引起婴儿腹泻的轮状病毒和大肠埃希氏菌为免疫原给妊娠后期乳牛免疫,定期采乳和血,分别用试管凝集反应和反向间接血凝抑制试验检测抗大肠埃希氏菌和轮状病毒抗体,比较血和乳中抗体相互关系.结果表明,乳牛在免疫前只能在初乳中检出抗体;免疫后在初乳和近2个月常乳中均能检测到抗体,两者呈平行关系,仅乳中抗体效价比血中抗体效价低2个滴度.     

功能性重组乳杆菌NC8-RLP对HUVEC细胞氧化应激损伤的抑制作用

为探究功能性重组乳杆菌NC8-RLP在缓解细胞内氧化应激损伤中的作用,首先构建氧化应激细胞模型,使用不同浓度的NC8-RLP作用细胞模型,通过MTT方法检测细胞的存活率和NC8-RLP毒性作用,观察细胞形态的变化;检测细胞模型内ROS含量的变化;采用Western-boltting检测NOX2、iNOS、Nrf2蛋白表达的情况。结果显示,成功建立氧化应激细胞模型OS-HUVEC,MTT结果发现NC8-RLP对HUVEC细胞无毒性作用,且具有一定的促进细胞增殖作用,同时可减少OS-HUVEC细胞凋亡。当NC8-RLP保护OS-HUVEC模型2 h后,细胞内的ROS含量降低,iNOS、NOX2蛋白表达量与阳性对照组相比明显减少,Nrf2蛋白表达量增加。说明NC8-RLP对缓解细胞内氧化应激损伤作用有很好的调控作用。     

城郊农村生态环境多元主体治理路径探析——基于河北省廊坊市近郊农村的考察

无论是以市场为中心的产权交易治理模式,还是以政府为中心的治理模式,都很难提供有效的农村生态环境治理制度和措施。农村生态环境的治理并不是在市场与政府间的非此即彼的简单选择,构建一种包含政府、市场和社会的多元主体治理模式十分必要。如何在市场和政府间寻求一个平衡点,实现治理成本和产权划分间的平衡,是解决农村生态环境治理不足的途径之一。     

从法律工具主义论法律信仰的缺失

和西方相比,中国的法律的意义从古至今意义都更多地体现在其“工具”价值上,对法的阐释也大都从“制度”层面入手,而没有充分考查社会公众对法律本身的内心体验和实际需要。而当法律能够适当并且正确地表达了全体社会公众的普遍共同的精神．情感、意识时,法律信仰才能够建立起来。     

我们是怎样联系实际的

政治课的教学过程是理论和实际的辩证统一过程。近几年来,我们教研组注意坚持了理论联系实际这条原则,收到了较好效果。现将我们联系了哪些实际简介如下。 1.联系学生的年龄实际。各学年的学生因年龄不同、心理状态不同、知识面宽窄深浅不同、对知识的理解和掌握的程度不同,因而讲授理论时必须因年级而宜。例如“大错不犯,小错不断也没关系”这个观点,在初三就要根据学生感性知识较理性知识多、理解力较差的特点,结合法律常识的内容,引导     

《白噪音》——剖析美国现代生活方式的一把利刃

唐.德里罗的《白噪音》可以被看做反映后现代美国社会生活的一面镜子,更是通过细节描述向我们展示了后现代美国人的生存状态。本人将从两方面来分析小说,首先通过分析,指出现代消费社会的社会特征;然后结合现代人的消费方式——异化消费,分析其形成根源,揭示现代人空虚孤独的躁动的内心世界以及两者之间的关系,从而引发人类对现代生活方式的思考,为人类重建和谐的内心世界家园起到积极的意义。