放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测

为了筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白在肺泡上皮细胞上的作用受体,应用酵母双杂交技术构建诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,进行酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-omp在酵母双杂交系统中的自激活和毒性作用。结果表明,成功构建了诱饵质粒载体pGBKT7-omp,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。表明pGBKT7-omp可应用在酵母双杂交系统中,用于寻找猪肺泡上皮细胞cDNA文库中与omp相互作用的蛋白质。     

推进基层治理法治化——兼论党的基层组织建设

推进基层治理法治化,是确保改革发展稳定的总开关,是实现依法治国的基础和关键。本文就基层组织在推进基层治理法治化的过程中如何发挥作用进行了积极有益的探索与思考。     

“区长热线”不是空号又如何？

2012年12月26日，广州市越秀区区长王焕清做客广州电视台节目“行风面对面”，主持人“突袭”，建议现场拨打区长热线。但是，第一个号码响铃一分钟没人接，第二个号码是空号，区长建议再拨打第一个号码，这次终于通了，工作人员表示可以帮助登记并转到信访那边。     

动物福利保护立法绕不过的困境

当动物福利保护由一个边缘性话题,成长为拟立法的层面时,其积极意义不言而喻。因此,我们更需要探究,应该以一种怎样的能被最大可能信仰和执行的反虐待动物法,来保障法律不流于过度动物福利保护的误区,也不流于高来高去的法规不可行的尴尬局面。     

每月万元公积金是怎么缴的？

从这份兰州石化公积金明细，可以推测一份国企高管薪酬的账单。一份《兰州石化党委办公室2011年度职工住房公积金明细账》日前被媒体曝光。在列入名单的52人中，兰州石化为他们缴存公积金超过9万元的有10人，而缴存额最高的则达到12万元，平均每个月达到1万元。（央广《中国之声》3月31日）     

羞辱是一门选修课

近来涉猎名人传记,其中戏剧家曹禺的一则逸闻催生了我的好奇心。上世纪80年代初,年逾古稀的曹禺已是海内外声名鼎盛的戏剧作家。一次,美国同行阿瑟·米勒应约来京执导新剧本,作为老朋友的曹禺特地邀请他到家做客。午饭前的休息时分,曹禺突然从书架上拿起一本装帧讲究的册子,册子上面裱着画家     

不应失去对粮食的敬畏和尊重

数字会说话.2016年年初,有公开调查数据显示,中国一年浪费的餐饮蛋白质、脂肪高达1100万吨.10月16日是世界粮食日,节约粮食是人类应有的意识.但很少有人意识到,浪费粮食就在我们身边.2016年10月,有媒体记者对陕西省西安市部分就餐场所进行调查走访时,发现除一些学校食堂能做到“光盘”外,其他不少就餐场所浪费粮食现象之严重,已到了不容忽视的地步.甚至在一些机关食堂,尽管墙壁和餐桌上张贴或摆放着“杜绝浪费”的宣传品,但不少餐盘上仍剩有米饭或菜肴.     

秦巴山下的小站民警

襄渝铁路是巴蜀咽喉,为了守卫这＂咽喉＂,民警们选择了责任和重托。襄阳铁路公安处胡家营火车站派出所位于秦巴山区,一条美丽的汉水成为湖北与陕西的分水岭,汉江环绕着秦巴山从胡家营车站脚下缓缓流过。作为旅行者,这儿是个不错的地方,但如果常年工作在此,就是另外一回事了。这个所管辖的襄渝线31.4公里线路中,41座桥梁和25个隧道就占了近20公里。     

首例开瓶费案判决的意义在胜诉之外

日前,四川省首例因收取“开瓶费”“包间费”而起诉的餐饮服务合同纠纷案件在成都市锦江区人民法院开庭。法庭当庭判决餐厅退还开瓶费、包间费共80元。法庭宣判,消费者与餐厅之间形成的餐饮服务合同有关开瓶费部分的约定无效,并因为被告收取原告包间费时侵犯了原告的知情权,故判决餐厅应退还消费者包间费和开瓶费。     

胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因的筛选

利用体内诱导抗原技术对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了初步筛选.将收集到的5份感染了APP1型的猪血清混合,分别用体外培养的APP1和大肠杆菌BL21(DE3)的全菌及全菌裂解物进行吸附,用ELISA方法检测吸附效果,经吸附后血清D450nm分别由原来的0.927和0.239降低为0.196和0.078.同时,将APP1基因组DNA以Bsp143 Ⅰ进行酶切,回收500～2000 bp的片段,与pET30a/b/c载体连接,构建了APP1基因组质粒表达文库,库容量(CFU)为2.0×105.用吸附后的血清通过菌落原位免疫杂交筛选该基因组表达文库,从3 000个菌落中获得了12个阳性克隆.