鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gE基因的克隆及序列分析

根据鸡传染性喉气管炎病毒 (AILTV)美国农业部 (USDA)标准毒株的基因序列 ,在AILTVgE基因起始密码子上游和终止密码子下游设计了 1对引物 pAL1和 pAL2 。以AILTV王岗株DNA为模板 ,进行PCR扩增 ,得到约 1.5kb的片段 ,经酶切鉴定为AILTVgE基因。将此PCR产物与pUC19质粒载体用限制性内切酶PstⅠ消化、连接 ,转化JM 83大肠埃希氏菌感受态细胞 ,用限制性内切酶酶切和PCR方法鉴定阳性重组质粒 pRHE。对其进行测序后 ,与AILTVUSDA标准攻毒株的gE基因序列进行比较 ,发现其核苷酸同源性为 99.5 % ,所编码氨基酸的同源性为 99.2 %。