死亡人体组织中rRNA亚基的稳定性及影响因素评价

目的探讨人尸体组织中rRNA亚基表达水平的稳定性及影响因素。方法选取3例成人、3例婴幼儿大脑皮质和脾组织,在尸检即刻、48、72、96、120、144、168、192、216、240h,采用实时荧光定量RT-PCR法检测5s、5.8s、18s、28s rRNA的表达水平。结果两个年龄组两种组织中4种rRNA亚基表达量相比较均显示有差异(P0.05)。同种组织比较:脑组织中两个年龄组最后一个时间点与第一时间点4种rRNA亚基的表达量均有差异(P0.05),其他各时间点与第一时间点无显著性差异(P0.05);脾组织中婴幼儿5s rRNA在最后一个时间点,其余3种rRNA亚基最后两个时间点与第一时间点比较有差异(P0.05);成人5s rRNA最后一个时间点,5.8s rRNA亚基最后两个时间与第一时间点比较差异(P0.05),其余两种亚基各时间点与第一时间点相比较均无差异(P0.05)。结论尸体组织中rRNA亚基表达稳定性好,适于作为晚期死亡时间推断的内参基因使用,但需注意指标、组织和年龄段差异性。     

核酸染色技术辅助推断晚期死亡时间的初步研究

目的探讨HE染色与吡罗红-甲基绿特殊染色结合图像分析技术辅助推断晚期死亡时间的可行性。方法在明确死亡时间的尸体解剖案例中分别取脑、脾脏、肌肉组织作为实验检材,离体放置,以2d为起始时间点,分别以2d、4d、6d、8d、10d、12d为时间点进行取材。将取得的组织块制备石蜡切片经HE染色及吡罗红-甲基绿特殊染色后放置于OLYMPUS BX61自动金相显微镜下利用IPP 5.0显微图像分析软件测量其各个时间点的平均光密度值。测量得到的各个时间点的光密度值用SPSS 13.0软件进行Kruskal-Wallis检验。结果脾脏、肌肉在2d、4d、6d三个时间点上光密度呈现出具有统计学意义的规律性的下降趋势,脑组织在各个时间点内光密度值波动无规律性。脑组织的特殊染色的效果比脾脏、肌肉组织的效果要好。脑组织经特殊染色后其DNA光密度值/(RNA+底色光密度值)在2d、4d、6d时具有统计学意义的规律性的下降趋势。结论死后1周以内的尸体脾脏及胸大肌组织经HE染色与脑组织经吡罗红-甲基绿特殊染色结合图像分析技术可以辅助推断死后经过时间,为晚期死亡时间的推断提供辅助证据。