大熊猫轮状病毒CH-1株外衣壳蛋白VP4基因的克隆与生物信息学分析

利用MA-104细胞培养增殖大熊猫轮状病毒CH-1株,提取总RNA,运用RT-PCR扩增外衣壳蛋白VP4基因,将其与pMD19-T simple vector连接并转化DH5α,经PCR扩增和测序分析进行鉴定,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示,成功获得大熊猫轮状病毒VP4蛋白基因,长2 362bp,包含一个2 331bp的开放阅读框,编码776个氨基酸,测序结果在GenBank中的登录号为HQ641296。生物信息学分析表明,VP4蛋白基因编码产物分子质量为86 768.8u,理论等电点为5.56,半衰期为30h(体外哺乳类网状细胞),不稳定系数为28.64,脂肪指数为82.53,总平均亲水性为-0.265,最大疏水性为2.244,最小疏水性为-2.911;无信号肽序列;跨膜结构分析显示VP4蛋白无跨膜区,位于病毒膜外区;在VP4序列中的抗原决定簇主要位于VP4的N-末端和C-末端。预测其可能包含8个N-糖基化作用位点,15个蛋白激酶C磷酸化作用位点、15个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、12个N-豆蔻酰化位点。系统进化分析显示,大熊猫轮状病毒的VP4基因与猪轮状病毒的VP4基因的进化距离最...     

事业单位分类改革中企业化路径研究

改善事业单位的绩效,对于提高公共服务的质量,适应中国经济发展目标,落实＂以人为本＂的发展观,都具有非常关键的意义。长期以来,我国社会事业发展相对滞后,一些事业单位功能定位不清,政事不分、事企不分;有些事业单位对部门利益和个人利益的追求,偏离了公共服务这个公共机构的基本价值取向。因此,中国需要进行全面的、协调的事业单位改革。分类改革是全面实施事业单位改革的首要任务,而将主要从事生产经营的事业单位企业化,则是分类改革遇到的难点之一。     

梅花鹿混合感染普通变形杆菌及大肠埃希氏菌的诊治

1999年 68月 ,我园先后发生了 3例梅花鹿的急性死亡 ,其死前症状与尸体剖检病变基本一致 ,取 1例死亡鹿的病理材料送实验室作微生物培养 ,结果显示为普通变形杆菌和大肠埃希氏菌合并感染。药敏试验结果表明 :2株菌对氧哌嗪青霉素、福达欣、先锋必素敏感 ;对庆大霉素、妥布霉素、磺胺甲基异恶唑不敏感 ;大肠埃希氏菌对丁胺卡那霉素敏感而普通变形杆菌则中度敏感。根据药敏试验立即选取敏感药物进行治疗 ,该群梅花鹿未见再发生死亡。由于该病发病急、死亡快、常规抗菌药物治疗无效。1　临床症状3例死亡梅花鹿 ( 2雄 ,1雌 )均系成年 ,发病前无…     

北极熊气单胞菌感染的诊治

气单胞菌属(Ａｅｒｏｍｏｎａｓ)的细菌广泛存在于淡水、海水、土壤及鱼类等脊椎动物的肠道中。以往人们普遍认为本属的细菌为低毒的条件性致病菌。近年来,由本菌引起的腹泻及其他感染的报道日益增多。1999年5月,成都动物园饲养的1头北极熊发生急性肠道感染,经实验室生物学检查,诊断为维隆气单胞菌引起的感染。1　发病情况与临床症状　　发病的北极熊表现烦躁不安,不停走动、呕吐、呕吐物中有香蕉皮、塑料袋等物;随后开始发生水样腹泻,最后排血便,每隔30ｍｉｎ左右排1次血便。2　细菌学检查取血便直接涂片,革兰氏染色镜检,可见大量革兰氏阴…     

小熊猫绿脓杆菌病的诊断

小熊猫 (Ａｉｌｕｒｕｓｆｕｌｇｅｎｓ)属食肉目浣熊科动物 ,主要产于我国西南地区 ,属国家二类保护动物 ,具有较高观赏价值。 1999年 1月 15～ 2 2日 ,成都动物园饲养的 3只小熊猫先后发病 ,经系统检查确诊为绿脓杆菌病 ,但所表现的临床症状及药物敏感试验结果均与以前曾报道的小熊猫绿脓杆菌病有所差异。1　临床症状病初表现为精神沉郁、食欲不振 ;继而表现眼结膜潮红、充血 ,无眼屎 ,由于口鼻分泌物增多 ,两前肢不断磨擦口鼻部 ;随后精神极度沉郁 ,头颈僵直 ,行走时后肢无力 ,左右摇摆 ,呼吸急促 ,呈典型腹式呼吸 ,并很快发展为阵发性痉…     

犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法的建立

为快速诊断犬恶丝虫病,建立了犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法,并与阻断试验、交叉反应试验、重复性试验、琼脂扩散试验和平行对照试验进行了比较.结果显示,制备的犬恶丝虫虫体粗制抗原与犬钩虫、犬弓首蛔虫和犬蠕形螨感染犬的阳性血清无交叉反应,检出犬恶丝虫阳性血清的最高抗体效价为11024,重复性好;建立的犬恶丝虫病dot-ELISA诊断方法的灵敏度比琼脂扩散试验和美国IDEXX实验室制备的犬恶丝虫病诊断试剂盒分别高2048倍和48倍.     

大熊猫轮状病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的大熊猫轮状病毒(RV)VP7基因序列,设计了1对特异性引物,建立了快速检测大熊猫RV的RT-PCR方法.用该方法对MA-104细胞增殖的大熊猫RV进行RT-PCR扩增,结果得到与试验设计相符的342 bp的特异性扩增条带,而对传染性胃肠炎病毒、大肠杆菌和沙门氏菌的扩增结果为阴性.测序比对结果证实该体系检测结果准确;该方法最低可检测出约1 pg的病毒核酸;重复性试验结果显示,其检测重复性好,提示该RT-PCR方法可用于大熊猫RV的临床快速检测.     

黄芪多糖对鸡新城疫和传染性腔上囊病疫苗免疫力的影响

将黄芪多糖(APS)分别按0、2.5、5.0、10.0 mg/只,以点眼、滴鼻、皮下注射、肌肉注射的不同方式,分别与鸡NDⅠ系、NDⅣ系、ND油乳剂苗和IBD冻干苗同时接种于4组(每组35只)健康非免疫雏鸡,对血清中ND、IBD抗体效价及脾、腔上囊重量的变化进行了动态观察.检测结果各APS组血清ND、IBD抗体效价显著高于APS空白组(P＜0.05),其中以APS 5.0 mg/只组的抗体效价最高;除ND油乳剂苗各APS组和NDⅣ系APS 2.5 mg/只在12日龄测定值外,各APS组脾和腔上囊重量显著高于APS空白组(P＜0.05).试验表明,APS可用作鸡疫苗的免疫佐剂提高鸡的免疫力;点眼、滴鼻、皮下注射、肌肉注射的接种方式不影响APS提高鸡免疫力的作用;APS以5.0 mg/只为最适剂量.     

宁夏:做好“五个三” 打好全面开展灾害综合风险普查基础

宁夏回族自治区三面环沙、地形复杂、生态脆弱,自然灾害多发易发,灾害防治形势严峻。第一次全国自然灾害综合风险普查试点工作正式启动以来,全区紧紧抓住关键环节,推进三级联动,编制三层方案,强化三重保障,做好三个结合,查找三项不足,确保组织领导、责任分工、配套支撑、推进落实、有效衔接到位,为当地第一次全国自然灾害综合风险普查的全面开展打好基础。     

大熊猫轮状病毒CH-1株NSP4基因的克隆与生物信息学分析

用MA-104细胞增殖大熊猫轮状病毒(RV),并提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得NSP4基因,将其克隆到载体进行测序,应用生物信息学方法初步分析NSP4基因的结构及功能,并与不同动物的RV构建系统进化树。结果显示,获得了长750bp的大熊猫RVNSP4基因,此序列包含1个528bp的完整开放阅读框,编码175个氨基酸;预测大熊猫RVNSP4基因的理论分子质量为20223.7u,等电点为6.84,半衰期为30h,不稳定系数为30.40,总平均亲水性为-0.240,疏水性为-2.400～2.622;无信号肽序列;跨膜结构分析表明,NSP4有1个跨膜区,其N端位于病毒膜外区,C端位于病毒膜内区;抗原表位预测显示,NSP4有6个抗原决定簇;结构预测显示,其可能包含2个N-糖基化作用位点、6个蛋白激酶C磷酸化作用位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点和1个酪氨酸激酶磷酸化作用位点;系统进化树分析显示,大熊猫RV NSP4基因与猪RV NSP4基因的进化距离最近。