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甲基苯丙胺稀土荧光试纸条的研制 总被引:1,自引:1,他引:0
目的建立一种检测尿液中甲基苯丙胺物质的高灵敏度检测方法。方法以稀土荧光纳米颗粒为标记物,采用反应杯+试纸条的反应模式,建立了免疫层析法,用于尿液中甲基苯丙胺的定性检测。结果用所制备的试纸条检测尿液中的甲基苯丙胺,肉眼和仪器判读的敏性均为100ppb,与吗啡、亚甲二氧基苯丙胺、氯胺酮、苯丙酮、可卡因等无交叉反应;将制备的反应杯和试纸条置于37℃7d,试纸条的性能没有明显降低。结论本研究建立的甲基苯丙胺免疫层析法用于定性检测尿液中的甲基苯丙胺,具有较高的灵敏性和较高的应用价值。 相似文献
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为获得针对猪带绦虫六钩蚴(TSO)45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株,用IPTG对TS045W-4BX的重组质粒pGEX-4BX进行了诱导表达,并采用Sepharose-4B层析技术对表达产物进行纯化,运用SDS-PAGE和Western-blot分别对其纯度和活性进行了检测.分别用弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂乳化已纯化的猪带绦虫TS045W-4BX重组抗原,随后用其分别免疫BALB/c小鼠3次,检测血清抗体效价呈阳性.之后,再进行加强免疫,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞进行融合,经TS045W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,最终获得了18株抗TS045W-4BX抗原的杂交瘤细胞株.采用有限稀释法对其中的4株进行5次亚克隆,最终获取了4株稳定分泌针对TS045W-4BX抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型. 相似文献
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A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的研制 总被引:4,自引:0,他引:4
为建立一种快速、简便的猪轮状病毒检测方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗猪轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上喷加纯化的抗猪轮状病毒VP6蛋白多克隆抗体和羊抗鼠IgG,制成检测猪轮状病毒抗原的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,所制备的试纸条用于检测猪轮状病毒感染的MA104细胞培养物,在检测线处出现红色反应带,未感染病毒的细胞培养物在检测线处未出现反应条带,上述培养物在质控线处均出现红色反应条带;进一步试验表明,试纸条检出病毒培养液(TCID50是10-6.25/0.1 mL)的最低限为1∶32稀释;用不同批次的试纸条重复检测,结果无差异;该试纸条不与相关的腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒发生反应,所制备的试纸条具有一定的敏感性和特异性,重复性良好。 相似文献
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本研究旨在根据鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus)F基因序列,利用Oligo 7设计RPA引物以及nfo探针,建立快速检测新城疫病毒的结合胶体金试纸条的RPA检测方法。在试验中,对探针浓度、引物浓度、反应温度、反应时间进行了优化;并将检测结果与荧光RT-PCR商品化试剂盒的检测结果进行了比较。结果显示,本方法采用50μL体系,37℃20 min即可对新城疫病毒F基因进行快速检测。该方法灵敏度高,特异性强,重复性好,检测结果与荧光RT-PCR商品化检测试剂盒检测结果一致,为养殖场检测新城疫病毒提供了一种简便可靠的检测方法。 相似文献
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为了建立一种快速检测狂犬病病毒抗体水平的方法,用浓缩提纯的狂犬病病毒CVS11株作为胶体金标记抗原,以金黄色葡萄球菌A蛋白为检测线上的捕获抗原,制备狂犬病病毒抗体水平检测试纸条。应用该试纸条进行临床样品检测,结果表明,以稀释后的犬全血或血清作为检测样品,试纸条检测的灵敏度为0.002U/mL,特异性试验证明该试纸条与犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬腺病毒2型犬科疾病阳性血清没有交叉反应,稳定性试验证明该试纸条在室温下保存的有效期为12个月,检测结果与快速荧光抑制试验的符合率为95.12%。证实该狂犬病病毒抗体免疫金标检测试纸可以方便、快速、灵敏、特异地检测狂犬病病毒的抗体水平。 相似文献
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2015年4月7日,北京,碧云蓝天,阳光明媚。但不期而来的倒春寒却让人感到阵阵寒意。相比他人,北京义贤律师事务所律师黄乐平则感受到了更多的寒意,他提起的转基因信息公开公益诉讼第一案等到了一纸败诉判决书。早些时候的2月28日,面对转基因非法扩散的行为,农业部推荐了5种快速检测转基因的试纸条,以期 相似文献
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日前,2009年公安科技成果推广引导计划项目"唾液甲基苯丙胺/吗啡胶体金法检测试纸条(卡)"(项目编号:2009TGYDBJSJ0004)顺利通过由公安部科技信息化局组织的专家验收。该项目产品采用生物工程技术研制的高特异性、高灵敏度单克隆抗体和小分子耦合物抗原,通过免疫竞争抑制法和胶体金免疫层析技术, 相似文献