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目的实验评估不同条件下Percoll密度梯度离心分离组织中浮游生物的效果。方法大白兔肝组织匀浆后与3种藻类混合物混匀,分为混匀高速分离组、混匀低速分离组、叠加高速分离组、叠加低速分离组和未分离组(对照组)进行Percoll密度梯度离心分离浮游生物,镜检并提取其DNA,用PCR技术分别检测浮游生物16S rDNA和叶绿素基因特异性片段。结果混匀高速分离组有较多浮游生物呈分层条纹状分布于离心管中部,叠加高速分离组浮游生物紧邻组织细胞层下,低速分离组见较少浮游生物紧邻于组织细胞层之下,未分离组见浮游生物和组织细胞混杂沉于管底;经DNA检测,各分离组组织细胞层下液体均可检出浮游生物的1条447bp 16S rDNA片段及1条194bp叶绿体/叶绿素脱辅基蛋白基因片段,未分离组均未检出扩增产物且背景较深。结论混匀加样方式进行高速Percoll密度梯度离心,合并收集组织细胞层下所有液体,是分离浮游生物的最有效方法。 相似文献
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目的建立并评估PCR-DGGE法检测浮游生物对溺死鉴定的应用价值。方法大白兔30只随机分为3组:溺死组(n=12),死后抛尸组(n=12)和对照组(n=6);溺死组和死后抛尸组又分为2个亚组:东湖水域组(n=6)和墨水湖水域组(n=6)。死后提取心血和肺、肝、肾、脑等组织,匀浆后,采用Percoll密度梯度离心法分离浮游生物并提取其DNA,PCR扩增浮游生物特异的16S rDNA片段后分别用琼脂糖凝胶电泳及DGGE检测分析。2个溺死案例检材同法检验。结果溺死组各组织器官中浮游生物检测多呈阳性:肺(100%)、肝(83%)、肾(75%)、心血(83%)、脑(42%);死后抛尸组仅2例肺组织(16.7%)检出阳性;对照组全部阴性。溺尸肺组织DGGE分型图谱与相应溺死点水样分型图谱相似,而与非溺死点水样分型结果差异显著。2实际案例均呈阳性。结论本方法不仅有助于定性诊断溺死,而且通过比较产物的多样性可以推断溺死地点,在法医学溺死鉴定中具有较大实用价值。 相似文献
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花季少年魂断大沙河 1998年6月12日下午,江山市第六小学根据市教育学会、市教研室关于进行小学大课间活动评优的通知精神,组织全校学生进行大课间活动,活动内容是广播操比赛。比赛结束后放学,比平时正常放学时间稍早。五年级男生刘晓(13岁)与另一同学张良认为,今日提前放学,天气又热,下河洗个澡,家里又不知道,真是太好了!于是,他俩回家换上凉鞋后,便前往附近的大沙河洗澡。不料,下水才几分钟,刘晓就两腿抽筋,他在水中挣扎了几下便沉入水底。张良见状,吓得赶紧跑到岸上大呼“救命!”“救命!”附近几个农民闻声跑过来… 相似文献
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2007年5月17日,重庆市潼南县公安局接到报案,在县城涪江码头的浮桥边,发现有一具男童的尸体,法医将其初步定性为落水死亡。然而,一个月后,当地年轻富翁、受害男童的亲生父亲李茂友却主动到公安机关自首,称是父母为了阻止自己再婚,一再声称要把登记在他们名下的百万家产转到儿子名下。为了与9岁的儿子争夺这笔财产,他给儿子服下大量的安眠药后,将其投入江中溺死。那么,李茂友在家里究竟受到了怎徉的精神伤害,要将自己的亲生儿子杀害呢? 相似文献
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用乙醇和正丁醇判断豚鼠溺死时间的实验探索 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以豚鼠为实验动物,溺死后浸泡于水温为20℃的水缸小。运用气相色谱法测定其溺死后不同浸泡时间在心、肺、肝小#在的乙醇和正了醇含量。实验结果表明在溺死后8天内,样本中乙醇和正了醇量随浸泡时间的延长而增加,且呈高度的直线相关。其血、肺、矸中乙醇量与溺死时间的回归方程依次为y1=-16.82+12.95X,y2=-58.53+19.23X,y3=-31.91+47.29X。血、肺、肝小正丁醇量与溺死时间的回归方程依次为y4=-10.13+5.86x,y5=-29.45+16.17x,y6=3.75+14.31x。综合分析溺死后血、肺、肝小乙醇和正丁醇,有可能作为判断溺死时间的新指标。 相似文献