| Asia 1型口蹄疫病毒多表位基因的原核表达及ELISA 检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 鲁会军,金宁一,郑敏,韩松,霍晓伟,田明尧,李霄,金扩世.Asia 1型口蹄疫病毒多表位基因的原核表达及ELISA 检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(1). |
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| 作者姓名： | 鲁会军 金宁一 郑敏 韩松 霍晓伟 田明尧 李霄 金扩世 |
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| 作者单位： | 1. 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
2. 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 |
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| 摘 要： | 根据国内流行的Asia 1型口蹄疫病毒的基因组特性,合成了Asia 1型口蹄疫病毒2个流行毒株VP1基因的5个抗原表位,并将其克隆到pMDl8-T载体上,再按设计的酶切位点连接,构建出Asia 1型口蹄疫病毒VP1双拷贝基因片段(VPlAsia).然后,将VP1Asia基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,构建了重组表达质粒pET-28a-VPlAsia,接着将其转入BL21茵中进行原核表达.以纯化的表达蛋白作为抗原检测了牛Asia 1型口蹄疫病毒阳性血清.结果显示,VPIAsia基因在大肠杆菌中获得了高效表达,以纯化的VPIAsia蛋白作为抗原建立了检测Asia 1型口蹄疫病毒抗体的ELISA方法.以建立的ELISA方法和标准Asia 1型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒对30份临床样品进行了检测,两种检测方法的阳性率分别为90.0% (27/30)和93.3%(28/30),符合率为89.7%(26/29).本研究为组装Asia 1型口蹄疫病毒抗体ELISA诊断试剂盒奠定了基础.
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| 关 键 词： | 口蹄疫 亚洲1型 多表位基因 酶联免疫吸附试验 |
Prokaryotic expression of multi-epitope gene of foot-and-mouth disease virus serotype Asia 1 and establishment of an ELISA for detection of the virus |
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| LU Hui-jun,JIN Ning-yi,ZHENG Min,HAN Song,HUO Xiao-wei,TIAN Ming-yao,LI Xiao,JIN Kuo-shi.Prokaryotic expression of multi-epitope gene of foot-and-mouth disease virus serotype Asia 1 and establishment of an ELISA for detection of the virus[J].Veterinary Science in China,2009,39(1). |
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| Authors: | LU Hui-jun JIN Ning-yi ZHENG Min HAN Song HUO Xiao-wei TIAN Ming-yao LI Xiao JIN Kuo-shi |
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