| 对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 冯华,张改平,郭军庆,王爱萍,赵丽娜,杜晓明,王林林.对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立[J].中国兽医科学,2011(7). |
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| 作者姓名： | 冯华 张改平 郭军庆 王爱萍 赵丽娜 杜晓明 王林林 |
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| 作者单位： | 郑州大学生物工程系;河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室;河南科技大学食品与生物工程学院; |
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| 基金项目： | 国家海洋局第三研究所合作研究项目(nycytx-46) |
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| 摘 要： | 根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28的基因序列设计合成4条特异性引物,以pMDT-VP28重组质粒为标准模板,通过优化反应体系和反应条件,建立了WSSV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对WSSV-DNA的最低检测限,并与巢式PCR进行了比较。结果显示,该LAMP方法的最佳反应温度为65℃,反应时间为60min;LAMP对WSSV的最低检测限为10copies/μL,而巢式PCR为100copies/μL,表明该LAMP方法的敏感性显著高于巢式PCR检测方法。因此,WSSV的LAMP检测方法比PCR更为简便、快速、灵敏,且无需昂贵的变温仪器,更适应水产养殖的现地检测,本研究为WSSV早期感染的快速检测提供了新方法。
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| 关 键 词： | 对虾白斑综合征病毒 环介导等温扩增 巢式聚合酶链反应 VP28基因 |
Establishment of a loop-mediated isothermal amplification(LAMP) assay for detection of shrimp white spot syndrome virus(WSSV) |
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| FENG Hua,ZHANG Gai-ping,GUO Jun-qing,WANG Ai-ping,ZHAO Li-na,DU Xiao-ming,WANG Lin-lin.Establishment of a loop-mediated isothermal amplification(LAMP) assay for detection of shrimp white spot syndrome virus(WSSV)[J].Veterinary Science in China,2011(7). |
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| Authors: | FENG Hua ZHANG Gai-ping GUO Jun-qing WANG Ai-ping ZHAO Li-na DU Xiao-ming WANG Lin-lin |
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| Institution: | FENG Hua1,2,ZHANG Gai-ping1,GUO Jun-qing2,WANG Ai-ping1,ZHAO Li-na2,3,DU Xiao-ming1,WANG Lin-lin1,2(1.Department of Bioengineering,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001,China,2.Key Laboratory of Animal Immunology of the Ministry of Agriculture/Henan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology/ Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,3.College of Food and Biotechnology,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | shrimp white spot syndrome virus loop-mediated isothermal amplification nested PCR VP28 gene |
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