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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA 2.5kb基因片段的分子克隆及其表达
引用本文:邵美丽,刘思国,王春来,郭洋,张秀华,郭设平,佟恒敏.猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA 2.5kb基因片段的分子克隆及其表达[J].中国兽医科学,2005,35(7):525-528.
作者姓名:邵美丽  刘思国  王春来  郭洋  张秀华  郭设平  佟恒敏
作者单位:1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030
2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001;沈阳农业大学,辽宁,沈阳,110161
4. 东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030
基金项目:黑龙江省博士后科研启动基金项目
摘    要:以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清1型国内分离株721株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出ApxⅣA基因2.5kb特异片段,将其克隆于pMD18T中,经酶切鉴定筛选重组质粒后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中登录的血清1型ApxⅣA(AX002405)基因进行比较,结果显示核苷酸同源性为99.5%。将该片段亚克隆到原核表达载体pGEX6P1的EcoRⅠ/SalⅠ位点,成功地构建了重组表达载体pGEXapxⅣA,并转化大肠埃希氏菌BL21,获得了表达。SDSPAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为117ku,与预期片段大小相符;Westernblotting分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。

关 键 词:胸膜肺炎放线杆菌  ApxⅣA基因  融合表达  
文章编号:1000-6419(2005)07-0525-04
修稿时间:2005年4月21日

Cloning and expression of toxin ApxⅣA 2.5 kb fragment of Actinobacillus pleuropneumoniae in Escherichia coli
SHAO Mei-li,LIU Si-guo,WANG Chun-lai,GUO Yang,ZHANG Xiu-hua,GUO She-ping,TONG Heng-min.Cloning and expression of toxin ApxⅣA 2.5 kb fragment of Actinobacillus pleuropneumoniae in Escherichia coli[J].Veterinary Science in China,2005,35(7):525-528.
Authors:SHAO Mei-li  LIU Si-guo  WANG Chun-lai  GUO Yang  ZHANG Xiu-hua  GUO She-ping  TONG Heng-min
Abstract:
Keywords:
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