| 金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 刘丽娜,张洁,周静,钟乃凤,胡祖权,贾义,谭承建.金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备[J].中国兽医科学,2015(4):375-379. |
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| 作者姓名： | 刘丽娜 张洁 周静 钟乃凤 胡祖权 贾义 谭承建 |
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| 作者单位： | 贵阳医学院生物技术教研室;贵州民族大学化学与环境科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31360084);贵州省科技厅社发项目(黔科合[2010]3144);贵州省卫生厅科学技术基金项目(gzwkj2011-1-018);贵阳医学院博士启动基金项目(K2010-32);贵州省科技厅科学技术基金项目(黔科J字[2010]2273) |
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| 摘 要： | 通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出分子质量约为54 000u的重组融合蛋白。表达产物经亲和层析纯化后可获得较高纯度的目的蛋白。Western-blot检测证实该重组蛋白能与乳腺炎患病奶牛恢复期血清发生阳性反应。ELISA结果显示,重组蛋白免疫新西兰大白兔能产生高效价的抗血清,提示StbA主要抗原表位区能刺激机体产生强大的免疫应答,StbA是一个有潜力的保护性抗原候选分子。
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 转铁蛋白结合蛋白A 蛋白表达 抗血清制备 |
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