| 抗己烯雌酚噬菌体单链抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 周玄,吴聪明,沈建忠,张素霞,张艳蓉.抗己烯雌酚噬菌体单链抗体库的构建[J].中国兽医科学,2009,39(7). |
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| 作者姓名： | 周玄 吴聪明 沈建忠 张素霞 张艳蓉 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,动物医学院,北京,100193 |
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| 摘 要： | 利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经DES-BSA免疫的BALB/c小鼠脾细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库.通过重叠延伸PCR(SOE-PCR),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH基因和VL基因连接成VH-Linker-VL,在Sfi Ⅰ+Not Ⅰ酶切位点定向插入pCANTAB-5E噬菌体载体,转化大肠杆菌TG1后,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成了全套抗己烯雌酚单链抗体表面展示文库.噬菌体中scFv基因的插入率为87.5%,经M13K07超感染后,其噬斑计数的效价为2.2×1011PFU/mL.结果表明,抗己烯雌酚的单链抗体库的构建,为进一步富集筛选并表达己烯雌酚单链抗体奠定了基础.
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| 关 键 词： | 己烯雌酚 单链抗体 噬菌体展示技术 |
Construction of phage display library of single-chain Fv antibodies against diethyistilbestrol |
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| ZHOU Xuan,WU Cong-ming,SHEN Jian-zhong,ZHANG Su-xia,ZHANG Yan-rong.Construction of phage display library of single-chain Fv antibodies against diethyistilbestrol[J].Veterinary Science in China,2009,39(7). |
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| Authors: | ZHOU Xuan WU Cong-ming SHEN Jian-zhong ZHANG Su-xia ZHANG Yan-rong |
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