六种常见细菌16S rDNA基因的PCR-RFLP指纹图谱检测方法的建立 |
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引用本文: | 龙玲,吴达,张银霞,肖西志,王军平,李儒,毛海岩.六种常见细菌16S rDNA基因的PCR-RFLP指纹图谱检测方法的建立[J].中国兽医科学,2014(5):521-526. |
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作者姓名: | 龙玲 吴达 张银霞 肖西志 王军平 李儒 毛海岩 |
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作者单位: | 西北民族大学生命科学与工程学院;甘肃出入境检验检疫局;西北民族大学附属医院;山东出入境检验检疫局 |
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基金项目: | 国家质检总局科研基金资助项目(2012IK004);国家自然科学基金资助项目(31360533);甘肃省自然科学基金项目(1308RJZA168) |
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摘 要: | 为建立针对肺炎克雷伯氏菌、产色葡萄球菌、莫拉菌、睾丸酮丛毛单胞菌、炭疽芽胞杆菌和布氏杆菌的快速检测鉴定方法,提取上述6种菌的基因组DNA,然后以提取的DNA为模板,用16SrDNA的通用引物27f和1492r进行PCR扩增。用17种内切酶,即AvaⅠ、BgⅡ、BamHⅠ、DraⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅡ、HindⅢ、Hinf、HpaⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、TaqⅠ、XbaⅠ、XmaⅠ、AluⅠ、XhoⅠ和PvuⅠ,分别对6种菌的16S rDNA基因的扩增产物进行酶切。酶切产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果显示,每种菌形成了特异的16S rDNA RFLP指纹图谱。结果表明,建立的方法能够对6种细菌进行准确的鉴定,适用于口岸动物皮毛中6种细菌的快速鉴定。
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关 键 词: | SrDNA PCR-RFLP 指纹图谱 |
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