猪霍乱沙门氏菌C78-1株ΔcrpΔasd缺失株平衡致死载体系统的构建及生物学特性研究 |
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引用本文: | 张明亮,张春杰,程相朝,赵战勤,李正,王慧,郁川.猪霍乱沙门氏菌C78-1株ΔcrpΔasd缺失株平衡致死载体系统的构建及生物学特性研究[J].中国兽医科学,2012(4):373-379. |
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作者姓名: | 张明亮 张春杰 程相朝 赵战勤 李正 王慧 郁川 |
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作者单位: | 河南科技大学动物科技学院;扬州大学兽医学院 |
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基金项目: | 河南省科技攻关项目(112102110019) |
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摘 要: | 为开发减毒猪霍乱沙门氏菌的活疫苗载体,通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,构建了猪霍乱沙门氏菌C78-1株ΔcrpΔasd双基因缺失株,并对其生物学特性进行探讨。首先构建含有缺失1 488bp asd基因的重组自杀性质粒pREΔasd,然后与已构建完成的ΔcrpC78-1缺失株进行接合转移,采用两步法筛选无抗性的C78-1的ΔcrpΔasd双缺失株。PCR鉴定结果表明,C78-1的ΔcrpΔasd双缺失株构建成功;进一步研究表明,该缺失株的生长需要外源的二氨基庚二酸(DAP),且能稳定遗传缺失的asd基因,与C78-1相比,其血清型未发生变化,但其生长速度明显减慢。ΔcrpΔasd C78-1双缺失株可接受asd+质粒作为宿主平衡致死系统高效稳定地表达外源基因,为开发以C78-1为载体的口服多价疫苗奠定了基础。
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关 键 词: | 猪霍乱沙门氏菌C78-1株 Asd+平衡致死系统 重组自杀性质粒 活疫苗载体 |
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