| 枯草芽孢杆菌pgsA与猪传染性胃肠炎病毒Sa融合基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 温海燕,葛仕豪.枯草芽孢杆菌pgsA与猪传染性胃肠炎病毒Sa融合基因的原核表达[J].中国兽医科学,2011(9). |
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| 作者姓名： | 温海燕 葛仕豪 |
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| 作者单位： | 菏泽学院制药工程系; |
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| 摘 要： | 为利用原核表达方法使猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)Sa蛋白表达在细菌的外表面,对克隆载体pMD18-T-pgsA进行KpnⅠ+BamHⅠ双酶切,将所得片段插入表达载体pET-32a(+)中,构建了重组质粒pET-pgsA,对克隆载体pMD18-T-Sa和重组质粒pET-pgsA分别进行BamHⅠ+HindⅢ双酶切,将Sa片段插入pET-pgsA中,构建重组质粒pET-pgsA-Sa。重组质粒pET-pgsA-Sa经PCR和序列鉴定为阳性后,转化入宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果表明,在70ku处出现了与预期大小相符的目的条带。Western-blot试验证实,融合基因pgsA-Sa获得了正确表达,具有良好的反应原性。间接免疫荧光试验证实融合蛋白在大肠杆菌表面获得了表达。结果表明,成功实现了TGEV Sa蛋白在细菌外表面的正确表达,初步鉴定其具有良好的反应原性。本研究为跨膜表达体系的建立和新型口服基因工程疫苗的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 pgsA基因 猪传染性胃肠炎病毒 Sa基因 原核表达 |
Prokaryotic expression of pgsA gene of Bacillus subtilis fused with Sa gene of transmissible gastroenteritis virus of swine |
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| WEN Hai-yan,GE Shi-hao.Prokaryotic expression of pgsA gene of Bacillus subtilis fused with Sa gene of transmissible gastroenteritis virus of swine[J].Veterinary Science in China,2011(9). |
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| Authors: | WEN Hai-yan GE Shi-hao |
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| Institution: | WEN Hai-yan,GE Shi-hao(Pharmaceutical Engineering Department,Heze University,Heze 274015,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus subtilis pgsA gene transmissible gastroenteritis virus of swine Sa gene prokar-yotic expression |
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