| 牛胸腺素原α基因的原核表达与分析鉴定 |
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| 引用本文： | 李小庆,陈国华,房永祥,何延华,冯海燕,景志忠.牛胸腺素原α基因的原核表达与分析鉴定[J].中国兽医科学,2011(12). |
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| 作者姓名： | 李小庆 陈国华 房永祥 何延华 冯海燕 景志忠 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30871884); “十二五”国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A211) |
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| 摘 要： | 为了把牛胸腺素原α(ProTα)开发为免疫增强剂,从重组克隆载体pMD18-T-ProTα上扩增ProTα基因,分别构建和筛选出了pGEX-4T-1-ProTα、pET-30a(+)-ProTα的BL21、BL21codon plus和Rosetta Blue(DE3)plys重组原核表达菌株,采用不同的条件组合对其进行诱导表达。结果,重组菌BL21codon plus-pET-30a(+)-ProTα表达出约24ku和30ku两个蛋白条带,且在37℃、IPTG浓度为0.5mmol/L、诱导3h时表达量最大,重组蛋白主要以可溶性形式存在;而pGEX-4T-1-ProTα重组菌在诸多条件下都未表达出目的蛋白。纯化产物的Western-blot分析显示,重组蛋白可与兔抗人ProTα多抗发生特异性免疫反应,表明重组蛋白具有免疫学活性结构。研究结果为重组ProTα蛋白的结构与功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 胸腺素原α 原核表达 优化 鉴定 |
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