山羊支原体山羊肺炎亚种黏附相关蛋白的特性 |
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引用本文: | 白 帆,李 媛,吴金迪,汪 洋,刘素丽,周玉梅,赵 权,辛九庆.山羊支原体山羊肺炎亚种黏附相关蛋白的特性[J].中国兽医科学,2014(6):583-588. |
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作者姓名: | 白 帆 李 媛 吴金迪 汪 洋 刘素丽 周玉梅 赵 权 辛九庆 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物科学技术学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室;东北农业大学动物医学学院; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31072131) |
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摘 要: | 为鉴定山羊支原体山羊肺炎亚种的黏附相关蛋白,通过对山羊支原体山羊肺炎亚种基因组编码的假定的膜蛋白基因(0297)进行扩增,并连接到pET-32a(+)载体,转化于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导获得了以可溶形式表达的重组蛋白,大小约为43ku,将该重组蛋白命名为P0297。用纯化的P0297免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体。利用激光共聚焦显微镜观察到蓝色的细胞核周围有重组蛋白的绿色荧光存在,其外形与细胞膜的红色荧光基本重合,表明P0297对山羊气管上皮细胞有明显的黏附作用。夹心ELISA结果显示,重组蛋白P0297的黏附作用与蛋白浓度成正比,并且黏附作用可被多克隆抗体阻断,说明该重组蛋白的黏附为特异性黏附。上述结果表明,P0297蛋白是山羊支原体山羊肺炎亚种的一个黏附相关蛋白。
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关 键 词: | 山羊支原体山羊肺炎亚种 黏附因子 特性 |
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