| 微小牛蜱Bm86基因的真核表达 |
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| 引用本文： | 李文卉,罗建勋,殷宏,关贵全,马米玲,刘志杰,刘爱红,党志胜,高金亮,任巧云.微小牛蜱Bm86基因的真核表达[J].中国兽医科学,2005,35(9):718-722. |
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| 作者姓名： | 李文卉 罗建勋 殷宏 关贵全 马米玲 刘志杰 刘爱红 党志胜 高金亮 任巧云 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110)，国家自然科学基金与JSPS国际合作项目(30270992) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR技术从微小牛蜱饥饿幼蜱破解物中扩增到Bm86基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K重组构建了重组表达载体pPIC9K-Bm86,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的68 ku重组Bm86蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的32%以上,诱导96 h目的蛋白的表达量为0.36 mg/mL。
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| 关 键 词： | 微小牛蜱 Bm86基因 毕赤酵母 真核表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)09-0718-05 |
| 修稿时间： | 2005年8月15日 |
Eukaryotic expression of Bm86 gene of Boophilus microplus in Pichia pastoris |
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| LI Wen-hui,LUO Jian-xun,YIN Hong,GUAN Gui-quan,MA Mi-ling,LIU Zhi-jie,LIU Ai-hong,DANG Zhi-sheng,GAO Jin-liang,REN Qiao-yun.Eukaryotic expression of Bm86 gene of Boophilus microplus in Pichia pastoris[J].Veterinary Science in China,2005,35(9):718-722. |
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| Authors: | LI Wen-hui LUO Jian-xun YIN Hong GUAN Gui-quan MA Mi-ling LIU Zhi-jie LIU Ai-hong DANG Zhi-sheng GAO Jin-liang REN Qiao-yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Boophilus microplus Bm86 gene Pichia pastoris eukaryotic expression |
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