副猪嗜血杆菌和猪鼻支原体双重PCR检测方法的建立及应用

为建立一种特异性鉴别副猪嗜血杆菌(Hps)和猪鼻支原体(Mhr)的检测方法,对Hps的P2蛋白基因和Mhr的P37蛋白基因分别设计了1对引物,建立Hps和Mhr双重PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度试验,同时应用所建立方法对临床样品进行检测。结果显示,该方法可特异性检测出Hps和Mhr,对其他细菌无非特异性扩增,检测灵敏度可达到100 copies;并可根据扩增产物的大小区分Hps P2蛋白基因的Ⅰ和Ⅱ两个基因型,初步判定Hps的致病性。对32份呼吸道疾病临床样品的检测结果显示,Hps和Mhr阳性率分别为59.4%和53.1%,双重感染的样品为34.4%。表明,成功建立了一种灵敏、特异和快速的双重PCR方法,实现了Hps和Mhr的同时、快速、准确诊断。