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禽流感野毒感染禽与疫苗免疫禽NS1-ELISA鉴别方法的建立
引用本文:孙进华,张雅为,李士平,王君伟.禽流感野毒感染禽与疫苗免疫禽NS1-ELISA鉴别方法的建立[J].中国兽医科学,2008,38(5):412-416.
作者姓名:孙进华  张雅为  李士平  王君伟
作者单位:1. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学,动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030
2. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030
3. 东北农业大学,动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030
摘    要:分别构建了重组禽流感病毒H9N2亚型、H5N1亚型NS1基因原核表达菌株,IPTG诱导表达,表达的蛋白用Ni -NTA Agarose纯化,Western-blotting检测两种蛋白的活性,并进行交叉反应检测;以H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,并优化各项反应条件.高效表达了H9N2和H5N1亚型NS1蛋白,融合蛋白的分子质量均为30 ku左右;Western-blotting检测均有特异性条带,并且存在明显的交叉反应.选择重组的H5N1亚型NS1蛋白建立了间接ELISA检测方法,最佳抗原包被浓度为1.325μg/mL,血清稀释度为1400.结果表明,以H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白为包被抗原的ELISA检测方法可区分禽流感病毒感染禽与疫苗免疫禽.

关 键 词:禽流感病毒  非结构蛋白  ELISA  禽流感  感染  疫苗免疫  鉴别方法  infected  poultry  结果  稀释度  血清  包被浓度  包被抗原  最佳  选择  交叉反应  存在  特异性条带  分子质量  融合蛋白  高效表达  反应条件
文章编号:1673-4696(2008)05-0412-05
修稿时间:2007年11月22

Establishment of an NSl-ELISA for differentiating poultry infected from those vaccinated
SUN Jin-hua,ZHANG Ya-wei,LI Shi-ping,WANG Jun-wei.Establishment of an NSl-ELISA for differentiating poultry infected from those vaccinated[J].Veterinary Science in China,2008,38(5):412-416.
Authors:SUN Jin-hua  ZHANG Ya-wei  LI Shi-ping  WANG Jun-wei
Abstract:
Keywords:
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