| A型产气荚膜梭菌α毒素His-68基因的定点突变与结构分析 |
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| 引用本文： | 许崇波,樛跃,许崇利,高凤山,窦永喜,才学鹏.A型产气荚膜梭菌α毒素His-68基因的定点突变与结构分析[J].中国兽医科学,2010,40(8). |
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| 作者姓名： | 许崇波 樛跃 许崇利 高凤山 窦永喜 才学鹏 |
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| 作者单位： | 许崇波(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046;大连大学医学院,辽宁,大连,116622);樛跃,高凤山(大连大学医学院,辽宁,大连,116622);许崇利(吉林化工学院,环境与生物工程学院,吉林,吉林,132022);窦永喜,才学鹏(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题 |
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| 摘 要： | 利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第68位组氨酸(CAT)定点突变成甘氨酸(GGT),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pMCPA-H68G含有CPA-His68Gly突变基因,且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的31.65%。应用EXPASY服务器上的SOPMA法对CPA和CPA-His68Gly突变体分子进行二级结构的预测,同时模拟了其三级结构。结果显示,CPA和CPA-His68Gly突变体的二级结构主要是由α螺旋和无规则卷曲组成的,三级结构非常相似。
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| 关 键 词： | 产气荚膜梭菌 α毒素基因 定点突变 表达 |
Site-directed mutagenesis and structure analysis of Clostridium perfringens type A alpha-toxin gene His-68 |
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