柔嫩艾美耳球虫SSADH基因的克隆原核表达与序列分析 |
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引用本文: | 霍晨阳,廖申权,戚南山,李娟,吴彩艳,吕敏娜,林栩慧,胡俊菁,孙铭飞,李国清.柔嫩艾美耳球虫SSADH基因的克隆原核表达与序列分析[J].中国兽医科学,2018(9). |
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作者姓名: | 霍晨阳 廖申权 戚南山 李娟 吴彩艳 吕敏娜 林栩慧 胡俊菁 孙铭飞 李国清 |
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作者单位: | 华南农业大学兽医学院;广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室 |
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摘 要: | 为研究柔嫩艾美耳球虫琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)的生物学功能,参考已公布的柔嫩艾美耳球虫SSADH(Et SSADH)的基因序列设计特异性引物,运用RT-PCR方法扩增Et SSADH基因序列,将扩增产物克隆入p GEX-4T-1载体进行诱导表达。同时,利用在线软件对该基因编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果显示,Et SSADH基因的ORF序列长1 896 bp,编码631个氨基酸;该编码蛋白主要定位于线粒体,不含信号肽,无跨膜结构域;将Et SSADH与不同物种SSADH氨基酸序列进行比对,发现该蛋白的氨基酸序列之间具有较强的保守性。诱导表达后获得分子质量约91.18 ku的重组蛋白。Et SSADH基因的成功克隆与表达为该酶的功能研究奠定了基础。
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