| 猪轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 黄小波,徐璐,曹三杰,文心田,曾燕,余慧.猪轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(8). |
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| 作者姓名： | 黄小波 徐璐 曹三杰 文心田 曾燕 余慧 |
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| 作者单位： | 四川农业大学,动物传染病与基因芯片实验室,四川省动物疫病与人类健康重点实验室,四川,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目，四川省教育厅资助项目 |
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| 摘 要： | 用差速离心法纯化的猪轮状病毒(RV)分别免疫仔猪和兔,制备了猪抗RV和兔抗RV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测RV的双抗体夹心ELISA方法.结果表明,该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:猪抗RV IgG包被浓度为4 μg/mL,兔抗RV IgG最佳工作浓度为3.5μg/mL,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1:8 000,以D<,450nm≥10.161作为阳性判定标准.该ELISA的重复性变异系数小于10 %,最低检测限为1.25μg/mL,并与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温和4℃条件下至少可保存4个月.用该ELISA方法和RV金标检测卡检测70份临床粪便样品,结果显示,ELISA的阳性检出率为22.9%,而金标检测卡的阳性检出率为20.0%.表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于RV的快速检测.
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| 关 键 词： | 猪轮状病毒 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 检测 建立 |
Development of a double antibody sandwich ELISA for detection of porcine rotavirus |
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| HUANG Xiao-bo,XU Lu,CAO San-lie,WEN Xin-tian,ZENG Yan,YU Hui.Development of a double antibody sandwich ELISA for detection of porcine rotavirus[J].Veterinary Science in China,2009,39(8). |
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| Authors: | HUANG Xiao-bo XU Lu CAO San-lie WEN Xin-tian ZENG Yan YU Hui |
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