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H3N8亚型马流感病毒M1基因在昆虫细胞中的表达及活性分析
引用本文:王伟,刘春国,刘明,张超林,刘飞,刘彦云,王寿山,王丹,吕让,相文华.H3N8亚型马流感病毒M1基因在昆虫细胞中的表达及活性分析[J].中国兽医科学,2013(1):60-64.
作者姓名:王伟  刘春国  刘明  张超林  刘飞  刘彦云  王寿山  王丹  吕让  相文华
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;东北农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;黑龙江省医院
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(201303046);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN0702-02)
摘    要:为建立H3N8亚型马流感血清学诊断方法,将H3N8亚型马流感病毒A/equine/Xinjiang/3/2007(H3N8)M1基因插入到杆状病毒转移载体pFastBac Dual中,构建重组转移质粒pFastBac Dual-M1;将pFastBac Dual-M1转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选重组穿梭质粒rBD-M1;在脂质体转染试剂介导下将rBD-M1转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒rBV-M1;rBV-M1感染Sf9细胞后,通过Western-blotting和免疫组织化学染色进行蛋白表达分析。结果表明,获得了分子质量为27ku的特异性M1蛋白,而且该蛋白具有良好的免疫活性。M1蛋白的成功表达为以M1蛋白作为诊断抗原的研究奠定了基础。

关 键 词:马流感病毒  H3N8亚型  M1基因  杆状病毒表达

Expression and biological characterization of M1 protein of H3N8 equine influenza virus in insect cells
WANG Wei,LIU Chun-guo,LIU Ming,ZHANG Chao-lin,LIU Fei,LIU Yan-yun,WANG Shou-shan,WANG Dan,Lü Rang,XIANG Wen-hua.Expression and biological characterization of M1 protein of H3N8 equine influenza virus in insect cells[J].Veterinary Science in China,2013(1):60-64.
Authors:WANG Wei  LIU Chun-guo  LIU Ming  ZHANG Chao-lin  LIU Fei  LIU Yan-yun  WANG Shou-shan  WANG Dan  Lü Rang  XIANG Wen-hua
Institution:1(1.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology/Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China;2.College of Veterinary Medicine,Northeast Agricultural University, Harbin 150030,China;3.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241,China;4.Heilongjiang Provincial Hospital,Harbin 150001,China)
Abstract:
Keywords:
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