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Asia 1 型口蹄疫病毒多表位基因的设计及其在毕赤酵母中的表达
引用本文:鲁会军,金宁一,郑敏,韩松,霍晓伟,胡博,田明尧,金扩世.Asia 1 型口蹄疫病毒多表位基因的设计及其在毕赤酵母中的表达[J].中国兽医科学,2009,39(1).
作者姓名:鲁会军  金宁一  郑敏  韩松  霍晓伟  胡博  田明尧  金扩世
作者单位:1. 中国人民解放军,军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
2. 中国人民解放军,军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;内蒙古民族大学,动物科技学院,内蒙古,通辽,028000
3. 中国人民解放军,军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家科技支撑计划 
摘    要:为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)特异性诊断抗原,根据国内Asia 1型FMDV流行毒株的序列,合成了2个FMDV流行毒株VPl基因的5个抗原表位.采用Insight Ⅱ软件进行蛋白空间构象模拟,证实设计的多表位分子结构符合要求.将合成的多表位基因按设计的酶切位点进行酶切连接,构建了Asia 1型FMDV VP1双拷贝基因重组质粒(pMD18-dVP1Asia).从该重组质粒获得dVP1Asia基因,与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-dVP1Asia.用BglⅡ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌.经筛选、鉴定,成功获得了表达FMDV多表位VP1蛋白的阳性重组酵母茵.该阳性重组酵母茵经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白.Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别Asia 1型FMDV抗体,且具有很好的反应原性.

关 键 词:Asia1型口蹄疫病毒  多表位基因  分子设计  毕赤酵母  表达

Molecular design of multi-epitope VP1 genes of foot-and-mouth disease virus type Asia 1 and their expression in Pichia pastoris
LU Hui-jun,JIN Ning-yi,ZHENG Min,HAN Song,HUO Xiao-wei,HU Bo,TIAN Ming-yao,JIN Kuo-shi.Molecular design of multi-epitope VP1 genes of foot-and-mouth disease virus type Asia 1 and their expression in Pichia pastoris[J].Veterinary Science in China,2009,39(1).
Authors:LU Hui-jun  JIN Ning-yi  ZHENG Min  HAN Song  HUO Xiao-wei  HU Bo  TIAN Ming-yao  JIN Kuo-shi
Abstract:
Keywords:
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