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牛D型产气荚膜梭菌肠毒血症间接ELISA诊断方法的建立
引用本文:金鑫,李云霄,张营,单雪梅,于丹,任春雨.牛D型产气荚膜梭菌肠毒血症间接ELISA诊断方法的建立[J].中国兽医科学,2008,38(4):308-314.
作者姓名:金鑫  李云霄  张营  单雪梅  于丹  任春雨
作者单位:延边大学,农学院,动物医学系,吉林,龙井,133400
基金项目:吉林省延边朝鲜族自治州科技攻关重点项目
摘    要:根据菌体蛋白可以刺激机体产生相应抗体的原理,建立了以产气荚膜梭菌粗提菌体蛋白为抗原的检测牛D型产气荚膜梭菌抗体的间接ELISA.结果显示,D型产气荚膜梭菌菌体裂解抗原最适包被浓度为50 μg/mL,最适包被条件为37 ℃ 1 h;被检血清的最适稀释度为1∶100,酶标二抗的最适工作浓度为1∶1 000,血清与酶标二抗的反应时间均为37 ℃ 1 h;最适封闭时间为37 ℃ 1 h;PBST稀释液中脱脂乳的浓度为30 g/L;底物最适反应条件为室温25 min;阴阳性临界值为0.032.对采集于吉林省延边州的100份牛血清样品采用建立的间接ELISA进行了检测;结果,阳性率为11.0%.经特异性试验、重复性试验和与琼脂扩散抗体检测法比较,采用裂解菌体蛋白为抗原建立的ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性.

关 键 词:D型产气荚膜梭菌    裂解抗原  间接ELISA  产气  荚膜  梭菌  肠毒血症  indirect  ELISA  诊断方法  type  Clostridium  perfringens  bovine  diagnosis  敏感性  比较  检测法  琼脂扩散  重复性试验  特异性试验  阳性率  血清样品  延边州  吉林省
文章编号:1673-4696(2008)04-0308-07
修稿时间:2007年11月15

Development of an indirect ELISA for diagnosis of bovine enterotoxemia resulted from Clostridium perfringens type D
JIN Xin,LI Yun-xiao,ZHANG Ying,SHAN Xue-mei,YU Dan,REN Chun-yu.Development of an indirect ELISA for diagnosis of bovine enterotoxemia resulted from Clostridium perfringens type D[J].Veterinary Science in China,2008,38(4):308-314.
Authors:JIN Xin  LI Yun-xiao  ZHANG Ying  SHAN Xue-mei  YU Dan  REN Chun-yu
Abstract:
Keywords:
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